植物生長調節劑對懷牛膝產量及品質的影響

李曼 董誠明 王鑫源 楊朝帆 許貞

摘要：為探索不同植物生長調節劑及噴施次數對懷牛膝生產的影響效果，研究氯化膽堿+萘乙酸、蕓苔素內酯、氯化膽堿及18%氯膽.萘乙酸對懷牛膝產量及品質的影響。結果表明，植物生長調節劑可使牛膝增產，不同植物生長調節劑及噴施次數的浸出物、B-蛻皮甾酮、多糖含量均有不同的表現，變異系數權重法綜合分析得出氯化膽堿+萘乙酸噴施3次效果較佳。

關鍵詞：牛膝;植物生長調節劑;種類;次數;品質

牛膝為莧科植物牛膝（Achyramhes bidentata Bj）的干燥根。性味苦、甘、酸、平。功能有活血通經，補肝腎，強筋骨，利尿通淋，引血下行。始載于《神農本草經》，列為上品。牛膝在我國大部分地區均有分布，但以河南武陟、溫縣、博愛、泌陽等地為主要產區，是我國著名的“四大懷藥”之一。牛膝最主要的活性成分為蛻皮甾酮、齊墩果酸型三萜皂苷以及多糖類。近年來的藥理研究表明，牛膝具有調節免疫系統、抗衰老、抗腫瘤、抗骨質疏松等多種藥理作用，且對2型糖尿病及心血管系統均有一定的治療作用。

植物生長調節劑可增加葉片的光合效率，制造更多的營養物質向塊根、塊莖輸送，從而提高產量。且植物生長調節劑的作用面廣、應用領域多，故而其使用越來越普遍。植物生長調節劑的不合理使用會造成中藥材活性成分含量降低，影響藥材療效。為探索植物生長調節劑對懷牛膝生產的影響，研究氯化膽堿+萘乙酸、蕓苔素內酯、氯化膽堿及18%氯膽.萘乙酸噴灑不同次數對懷牛膝產量及品質的影響，為植物生長調節劑的使用提供科學依據。

1 材料與方法

1.1試驗材料

供試植物生長調節劑為：①大塊頭（氯化膽堿70%+萘乙酸2%）：水劑，山東菏澤永杰農化有限公司生產;登記證號：農肥（2005）準字0365號。②天豐素（蕓苔素內酯0.01%）：水劑，江門市大光明農化新會有限公司生產;生產批號：HNP44024-E0684。③氯化膽堿（氯化膽堿60%）：水劑，重慶雙豐化工有限公司生產;生產批號：HNP55008-E0577。④地胖哥（氯化膽堿17%、萘乙酸1%）：粉劑，重慶雙豐化工有限公司生產;生產批號：HNP55008-E0095。

1.2樣品采集與試驗設計

牛膝種子由河南中醫藥大學董誠明教授鑒定為莧科植物牛膝（Achyranthes bidentata BL）的種子，于2016年7月20日播種于河南省武陟縣大封鎮駕部村。試驗共設17個處理（見表1），每個處理重復3次，牛膝株行距6cm x 13cm，每小區20m²。當年使用植物生長調節劑，噴施濃度按照使用說明，現配現用。

1.3測定項目與方法

1.3.1產量。2016年2月5～7日采收各小區牛膝，記錄數據，進行產量分析。

1.3.2浸出物及B-蛻皮甾酮含量測定。參照《中國藥典》2015版中醇溶性浸出物測定法（通則2201）項下的熱浸法測定，用水飽和正丁醇作溶劑;參照《中國藥典》2015版中采用高效液相色譜法測定牛膝藥材中B-蛻皮甾酮含量。

1.3.3多糖含量測定。采用UV法進行多糖含量測定，最大吸收波長為625nm，以吸光度為縱坐標，100u g/mL葡萄糖標準品溶液的濃度為橫坐標，進行回歸處理，繪制標準曲線，回歸方程為y=0.0644x-0.0406.r²=0.9923。

精密稱取牛膝粉末0.5g，置錐形瓶內，加入25mL95%乙醇回流脫脂1h，藥材揮醇后加入50mL蒸餾水回流1h，過濾，用熱水分數次洗滌藥渣，合并濾液及洗液于100mL容量瓶中，加蒸餾水定容，搖勻，精密量取lmL轉移至50mL容量瓶中，用蒸餾水定容至刻度線，搖勻，即得供試品溶液;用0.2%蒽酮硫酸溶液顯色，測定供試品溶液的吸光度，計算多糖含量。

1.4數據統計分析

運用Excel和DPS對數據進行整理分析，運用變異系數權重法對牛膝各個指標綜合分析。

2 結果與分析

2.1 產量比較

由表2可知，P₃處理產量最高，為793.74kg/667m²;T1產量較低，為627.53kg/667m²。在噴施同種植物生長調節劑時，不同噴施次數的處理下各個小區產量：D₂>D₃>D₄>D₁、T₄>T₃>T₂>T₁、L₄>L₃>L₂>L₁、P₃>P₂>P₄>P₁。在噴施相同次數時，不同植物生長調節劑的處理下個小區產量：L₁>P₁>D₁>T₁、P₂>D₂>T₂>L₂、P₃>L3>D₃>T₃、L₄>P₄>D₄>T₄。P₃與CK之間具有顯著性差異，其余處理與CK之間均無顯著性差異。各處理產量均高于CK，各處理小區均對牛膝有增產作用，18%氯膽.萘乙酸噴施3次處理對牛膝增產作用最明顯。

2.2浸出物及B-蛻皮甾酮含量測定

2.2.1浸出物含量測定。由表3可知，不同處理浸出物含量均符合藥典規定，其中D₄處理浸出物含量最高（9.63%）;T₂處理的浸出物含量較低（6.87%）。在噴施同種植物生長調節劑時，不同噴施次數的各處理浸出物含量：D₄>D₂>D₃>D₁、T₄>T₁>T₃>T₂、L₃>L₂>L₄>L₁、P₃>P₂>P₄>P₁。在噴施相同次數時，不同植物生長調節劑的各處理浸出物含量：T₁>D₁>P₁>L₁、D₂>P₂>L₂>T₂、L₃>P₃>D₃>T₃、D₄>P₄>T₄>L₄。D₂、D₄與CK之間具有顯著性差異，其余處理與CK之間均無顯著性差異。D₂、D₄牛膝藥材浸出物含量均高于CK，說明氯化膽堿+萘乙酸噴施2次處理和氯化膽堿+萘乙酸噴施4次處理對牛膝質量產生有利影響，D₄含量最高，說明其處理可有效地提高牛膝中醇溶性浸出物的含量，進而對牛膝質量有一定的改善作用。

2.2.2β-蛻皮甾酮含量測定。由表3可知，P₄處理的β-蛻皮甾酮含量最高（0.089%），T₂處理的β-蛻皮甾酮含量最低（0.031%）。在噴施同種植物生長調節劑時，不同噴施次數的各處理β-蛻皮甾酮含量：D₄>D₂>D₁>D₃、T₃>T₄>T₁>T₂、L₄>L₁>L₃>L₂。在噴施相同次數時，不同植物生長調節劑的各處理β-蛻皮甾酮含量：P₁>L₁>D₁>T₁、P₂>D₂>L₂>T₂、T₃>P₃>L₃>D₃、P₄>T₄>D₄>L₄。D₃、T₁和T₂與CK之間具有顯著性差異，其余處理與CK之間均無顯著性差異。D₃、T₁、T₂，這3種處理牛膝藥材中β-蛻皮甾酮含量均低于CK，說明氯化膽堿+萘乙酸噴施3次處理、蕓苔素內酯噴施1次處理和蕓苔素內酯噴施2次處理降低牛膝藥材中β-蛻皮甾酮的含量，進而可能會對牛膝藥材質量產生不利影響。

2.2.3多糖含量測定。由表3可知，T₄處理的多糖含量最高（8.08%），P₄處理的多糖含量最低（5.25%）。在噴施同種植物生長調節劑時，不同噴施次數的各處理多糖含量：D₃>D₂>D₄>D₁、T₄>T₂>T₃>T₁、L₂>L₄>L₃>L₁、P₃>P₂>P₁>P₄;在噴施相同次數時，不同植物生長調節劑的各處理多糖含量：D₁>T₁>P₁>L₁、L₂>D₂>T₂>P₂、D₃>P₃>T₃>L₃、T₄>D₄>L₄>P₄。D₃、T₄與CK之間具有顯著性差異，其余處理與CK之間均無顯著性差異;D₃、T₄牛膝藥材多糖含量均高于CK，說明氯化膽堿+萘乙酸噴施3次處理和蕓苔素內酯噴施4次處理可提高牛膝中的多糖含量。

3 結論與討論

植物生長調節劑是一類與植物激素具有相似生理和生物學效應的人工合成物質。植物生長調節劑的應用，可調控植株的生長發育，增強植物抗逆性，增加中藥材的產量，提高中藥材有效成分的含量，改善藥材品質。牛膝中主要以蛻皮甾酮和牛膝甾酮的形式存在，其中蛻皮甾酮是牛膝中的主要藥用成分;牛膝中的多糖類成分含量較高，作用于人體內，能夠起到抑制腫瘤轉移、增強免疫力等作用。試驗采用4種不同種類的植物生長調節劑，每種植物生長調節劑均設置了4種不同的噴施次數，選擇用不同的植物生長調節劑及不同噴施次數對牛膝進行處理，以達到高產優質為目的。從各處理的綜合得分均高于CK可以看出，植物生長調節劑在一定程度上能提高牛膝的產量，改善其品質。試驗表明，不同噴施次數、4種類型的植物生長調節劑在牛膝上的使用產生了不同的效果，牛膝各處理的產量均高于CK，可見植物生長調節劑對牛膝有增產效果;變異系數權重法綜合分析得出氯化膽堿+萘乙酸噴施3次效果較佳。

藥材農藥殘留量測定以及土壤中植物生長調節劑殘留量測定也很重要，在牛膝栽培的過程中，若過多地使用植物生長調節劑，可能對人體、土壤及環境造成危害，農藥的殘留量超標也會影響中藥材的療效以及用藥安全，有待進一步研究。