不同樣本類型對EBV DNA檢測結果的影響

胡如政

摘要：目的：對臨床血漿樣本、外周血PBMC樣本與咽拭子樣本的EBV DNA陽性率以及相關計數情況進行對比，以分析有關樣本對最終檢驗結果所帶來的影響，評價樣本及方法的靈敏度。方法：在本院所有所收治接診的疑似為EBV感染的90例患兒作為本次研究的對象，對其采取血漿樣本、PBMC樣本及咽拭子樣本的采集，并觀察所有患兒最終結果的陽性率是否有明顯的差異，對其敏感度情況進行觀察，評價相關樣本的影響作用。結果：90例患兒最終檢查的結果可以發現，三種檢驗結果彼此之間的陽性率之間形成了明顯不同，從低到高依次為血漿、外周血PBMC和咽拭子標本，尤其以咽拭子標本為最高且明顯高于外周血PBMC與血漿檢查，靈敏度最強（P<0.05）。但在EBV DNA方面，外周血PBMC與咽拭子的相關結果未呈現明顯不同（P>0.05），兩項結果接近，而且明顯比血漿檢查結果更高（P<0.05）。結論：在臨床對EB病毒篩查的過程中。咽拭子標本的敏感性最強，陽性率最高，在EBV DNA方面與外周血PBMC接近，但是其陽性率卻明顯較高，可以結合實際情況選擇相應的標本進行疾病監測，以促使早期診斷積極進行干預。

關鍵詞：EB病毒;小兒;DNA;咽拭子;外周血PBMC;血漿;結果;影響

【中圖分類號】R446.5? 【文獻標識碼】A? 【文章編號】1673-9026（2020）07-034-01

引言：

EB病毒是臨床常見的一種皰疹病毒，尤其在小兒群體中發生感染的情況更多，作為一種傳染性單核細胞增多癥的病原體，在小兒群體中尤為常見，一般以呼吸道感染為主要癥狀，嚴重情況下可以累及全身多個臟器產生問題，感染之后以B淋巴細胞為主要攻擊的細胞，在其中增殖并感染其他細胞^[1]。而此類病毒感染之后帶來的較為典型性癥狀影響包括了發熱、淋巴結腫大，引起咽峽炎等一系列問題，主要以呼吸道癥狀和全身癥狀為主。EB病毒的感染很容易被漏診，進行診斷和治療的過程中，尤其要關注其方法和標本的使用，合理選取標本進行前期檢查診斷，為后續干預提供診斷依據和支持^[2]。針對這一特點，本次研究主要是采取實時熒光聚合酶聯反應（PCR）定量檢測，對不同的樣本陽性率、EBV DNA情況進行對比，以評價哪一種標本陽性率更高敏感性更強一些。

1.資料與方法

1.1一般資料

90例患兒均為本院所收治高度疑似為EBV感染的患兒群體，其年齡在4-12歲之間，平均（6.14±1.36）歲，伴有明顯的淋巴結腫大、咽喉疼痛、發熱咳嗽等問題，臨床診斷為肺炎、支氣管炎等等。所有患兒既往體健，沒有明確的免疫系統疾病或者凝血功能障礙等一系列問題，在此之前沒有使用過抗病毒、抗感染治療，基礎情況接近，不會影響最終結果準確性。

1.2方法

對所有患兒都進行血液標本和咽拭子標本采集，抽取靜脈全血2ml，使用乙二胺四乙酸進行抗凝然后離心分離血漿，留取血漿100ul進行EBV DNA提取，剩余全血標進行外周血的單個核細胞（PBMC）EBV DNA提取。咽拭子標本方面，按照有關要求進行采集，并密封進行送檢，無法及時檢測的存儲于零下20攝氏度環境，盡早進行檢測^[3]。使用ABI 7300/7500熒光定量擴增儀配合相關試劑，按照相關操作規范進行DNA模板提取，并在反應管內加入陰性質控品、質控品和參考品以及待檢測標本各2ul進行檢測。

1.3觀察指標

觀察所有患兒在三種標本同樣方法檢測之后的陽性率、EBV DNA對數值方面是否形成了明顯差異。

1.4統計方法

所有數據利用SPSS.20.0統計學軟件進行統計學數據處理，計量資料用均數±標準差（x+s）進行表示，采用t檢驗，當P<0.05時，表示差異較為顯著，具備統計學意義。

2.結果

分別采取三種標本的結果對比發現，以咽拭子標本的陽性率最高，明顯高于外周血PBMC與血漿（P<0.05），而在EBV DNA方面，其結果與外周血PBMC相近（P>0.05），但均明顯大于血漿檢查（P<0.05）。三種標本的最終陽性率與EBV DNA結果情況對比詳見表1.

3.結論

EB病毒感染的問題在臨床兒科十分常見，其發生率相對較高，由于免疫力差異導致患兒的臨床癥狀也有明顯不同，早期進行診斷對于后續治療影響十分明確^[4]。根據不同標本差異發現，咽拭子的陽性率更高，這主要是其分泌物是病毒傳播的主要載體，故而其陽性率更高。而外周血PBMC作為感染病毒后主要載體，感染之后主要攻擊B淋巴細胞上受體，所以其陽性率比血漿要更高一些。

如上所述，在臨床不同標本進行檢驗的過程中發現，咽拭子檢查的陽性率最高，在早期診斷的過程中選取相關方法取得的效果更好一些，有助于早期診斷和早期疾病治療。

參考文獻：

[1] 陳世知，謝運蘭，梅嚴花，et al.傳染性單核細胞增多癥患者不同標本EBV-DNA檢測的臨床價值[J].國際檢驗醫學雜志，2018，39（02）：53-55+58.

[2] Lorusso F ，Caleca M P ，Bellavia C ，et al.The EBV-DNA Can be Used as a Diagnostic and Follow-up Parameter of the Rhinopharyngeal Tumors in the Non-Endemic Population of the Western Sicily[J].Indian Journal of Otolaryngology and Head & Neck Surgery，2018，71-71.

[3] 張晴，崔蕾，馬宏浩，et al.血漿及全血EB病毒DNA對EB病毒相關噬血細胞性淋巴組織細胞增生癥患兒預后的影響[J].中華實用兒科臨床雜志，2020，35（15）：1138-1143.

[4] 彭惠軒，麥彩喜，陳廣道.EB病毒DNA檢測對兒童傳染性單核細胞增多癥的診斷價值及其影響因素[J].國際醫藥衛生導報，2018，024（004）：491-493.