HR-HPV E6/E7 mRNA檢查在宮頸癌篩查中的應用價值

蔣瑜，徐寶琳，周虹

江西省景德鎮(zhèn)市第二人民醫(yī)院 (江西景德鎮(zhèn) 333000)

宮頸癌是女性常見的惡性腫瘤，也是目前世界上第一個明確病因的惡性腫瘤。大量研究表明，其發(fā)病的主要原因是高危型人乳頭瘤病毒(high risk human papillonmavirus，HR-HPV)的持續(xù)性感染，約95%以上的宮頸癌組織中檢測到人乳頭瘤病毒[1]。薄層細胞學檢查(thinprep cytologic test ，TCT)聯(lián)合HPV-DNA分型檢查用于宮頸病變的篩查，可降低宮頸癌的發(fā)生率。但是，HPV-DNA分型檢查宮頸癌前病變及宮頸癌的靈敏度高，特異度低[2]，TCT的特異度高，但陽性預測值低，易漏診，對宮頸病變的進展不能進行有效的評估，而且一段時間內(nèi)的反復檢查，會給患者帶來經(jīng)濟上的負擔。近年來，HR-HPV E6/E7 mRNA檢查在臨床逐漸引起關注。本研究探討HR-HPV E6/E7 mRNA檢查在宮頸癌篩查中的應用價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2017年11月至2019年11月于我院門診行宮頸HPV-DNA分型檢查及TCT中疑似宮頸病變需轉(zhuǎn)診陰道鏡的患者386例，年齡22～69歲，行陰道鏡下組織病理活檢的同時行HR-HPV E6/E7 mRNA檢查，既往無宮頸上皮內(nèi)病變史或免疫抑制劑使用史，均自愿進行篩查。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會審核批準。

1.2 方法

(1)TCT：使用ThinPrep全自動超薄液基細胞學檢查系統(tǒng)，由專業(yè)婦科病理醫(yī)師進行細胞學診斷，結(jié)果判定參照2001 Bethesda系統(tǒng)分類標準。(2)HPV-DNA分型檢查：使用凱普公司提供的導流雜交HPV-DNA分型檢查法(HybriMax)，檢查14種HR-HPV(HPV16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59，66和68)。(3)HR-HPV E6/E7 mRNA檢查：使用河南科蒂亞生物技術公司生產(chǎn)的HPV E6/E7 mRNA檢查試劑盒，針對14種HR-HPV(HPVl6，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59，66和68)的E6/E7致癌基因片段mRNA。(4)病理學檢查：TCT≥非典型鱗狀上皮細胞(atypical squamous cells of undetermined significance，ASCUS)、HPV高危型陽性或HPV 16/18陽性的患者行陰道鏡檢查，由有經(jīng)驗的臨床醫(yī)師在陰道鏡下對宮頸可疑病變部位進行組織學活檢和宮頸管搔刮，病理學結(jié)果由2位專業(yè)的病理專家進行診斷，診斷標準參照世界衛(wèi)生組織分類標準執(zhí)行。

1.3 臨床評價

分析3種篩查手段與病理活檢結(jié)果[宮頸炎、宮頸上皮內(nèi)瘤變(cervical intraepithelial neoplasia, CIN)]的關系；比較3種篩查手段檢查宮頸病變≥CINⅡ級的診斷效能。1.4統(tǒng)計學處理

采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理，計數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 3種篩查手段與病理活檢的關系

386例患者中，病理活檢確診宮頸炎165例(42.7%)，CINⅠ級97例(25.1%)≥CINⅡ級，124 例(32.1%)；HR-HPV E6/E7 mRNA檢查陽性175例(45.3%)，陰性211例(54.7%)；HPV-DNA分型檢查陽性329 例(85.2%)，陰性57例(14.8%)；TCT陽性278例(72.0%)，陰性108例(28.0%)，見表1。

表1 3種不同篩查手段的檢查結(jié)果[例(%)]

2.2 3種方法檢查宮頸病變≥CINⅡ級的診斷效能比較

HR-HPV E6/E7 mRNA檢查、HPV-DNA分型檢查和TCT宮頸病變≥CINⅡ級的靈敏度分別為86.3%、92.7%、82.3%，特異度分別為74.0%、18.3%、32.8%，陽性預測值分別為61.1%、35.0%、36.7%，陰性預測值分別為91.9%、84.2%、79.6%；HR-HPV E6/E7 mRNA檢查的靈敏度低于HPV-DNA分型檢查，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；HR-HPV E6/E7 mRNA檢查的特異度、陽性預測值、陰性預測值均高于HPV-DNA分型檢查和TCT，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 3種篩查方法檢查宮頸病變≥CINⅡ級的結(jié)果比較(例)

3 討論

慢性持續(xù)HR-HPV感染是宮頸癌發(fā)生的主要誘因，但HPV感染多為一過性、無明顯臨床癥狀，感染率及自然清除率均較高，導致檢查結(jié)果假陽性高，影響臨床判斷[3]。近年來，有研究證實，HR-HPV的致癌風險取決于癌基因E6/E7mRNA的表達[4-5]。當持續(xù)性HR-HPV感染時，DNA整合入宿主的基因組，E6/E7 mRNA被宿主細胞轉(zhuǎn)錄，導致大量的E6/E7癌蛋白表達，細胞周期調(diào)控異常，從而誘發(fā)細胞高級別病變乃至癌變[6-8]。與HPV-DNA檢查相比，HR-HPV E6/E7 mRNA檢查判斷HPV感染與預測病變進展的特異度更高[9]，為宮頸病變篩查提供更加有效的方法[10]。TCT在高級別宮頸病變中與組織病理學吻合度較高，但受制于病理醫(yī)師專業(yè)水平不同，導致不同病理醫(yī)師診斷結(jié)果差異較大[11]。

本研究結(jié)果顯示，HR-HPV E6/E7 mRNA檢查的靈敏度低于HPV-DNA分型檢查，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；HR-HPV E6/E7 mRNA檢查的特異度、陽性預測值、陰性預測值均高于HPV-DNA分型檢查和TCT，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；提示HR-HPV E6/E7 mRNA檢查可減少HPV一過性感染造成的假陽性，診斷效能優(yōu)于HPV-DNA分型檢查和TCT。單獨行TCT及HPV-DNA分型檢查均不利于子宮頸病變的精準篩查[12]，HR-HPV E6/E7 mRNA檢查有著更高的特異度和陽性預測值，更加適合于宮頸病變的篩查。

綜上所述，HR-HPV E6/E7 mRNA檢查宮頸病變的總體診斷效能優(yōu)于HPV-DNA分型檢查和TCT，可減少HPV一過性感染造成的假陽性結(jié)果，減輕患者的心理壓力，降低過度治療帶來的風險，實現(xiàn)靈敏度和特異度的較好平衡，還可作為宮頸病變或癌變初篩的更佳選擇。