參黃止癢凝膠劑的制備工藝研究

任思微 王梓丞 朱艷華*

（1、黑龍江中醫藥大學，黑龍江 哈爾濱150000 2、齊齊哈爾醫學院附屬第一醫院藥劑科，黑龍江 齊齊哈爾161041）

中藥凝膠劑作為中藥外用的新型制劑，兼具避免首關效應、提高生物利用度、減輕藥物不良反應、便于攜帶等優勢[1]。經大量文獻與大量濕疹外用方用藥規律分析，苦參、黃柏和地膚子在治療小兒濕疹方面有著顯著的療效且具有很高的使用頻率[2-4]。本文將以苦參、黃柏、地膚子三味中藥材為主藥，用于治療嬰幼兒濕疹，選用凝膠劑通過皮膚進行局部給藥，為中藥復方制劑研究提供新的思路和研究方法。

1 材料

R-205 型旋轉蒸發儀（上海申勝生物技術有限公司）；DELTA320 型pH 計（梅特勒- 托利多儀器上海有限公司）；HZS-HA 型水浴振蕩器（哈爾濱市東聯電子技術開發有限公司）；黃柏、苦參、地膚子（哈爾濱人民同泰藥店）；二甲苯（江蘇興華化工廠）；右旋糖酐-40（山東齊都藥業有限公司）；卡波姆-940（北京市海淀區會有化工廠，批號220527）；PEG-400（北京益利精細化學品有限公司，批號21007）；丙二醇（天津市恒興化學試劑制造有限公司，批號20180112）；三乙醇胺（天津市瑞金特化學品有限公司，批號20180310）。

小鼠（昆明，雌雄各半，體重18～22g，黑龍江中醫藥大學GLP 實驗室提供）。

2 方法與結果

2.1 處方比例篩選

2.1.1 處方藥材提取液的制備

分別按比例1:1:1、1:2:1、2:1:1 稱取黃柏、苦參、地膚子共30g，加8 倍量水，煎煮3 次，每次提取2h。將提取液減壓濃縮至生藥量0.5g/ml。

2.1.2 右旋糖酐致瘙癢試驗

取昆明種小鼠40 只, 隨機均分為空白對照組、1:1:1 組、1:2:1 組、2:1:1 組。在小鼠背部剃毛并均勻涂抹受試藥液或對照液，2次/天，連續3 天，每次給藥量為0.2ml。末次給藥1h 后，于各組小鼠尾靜脈注射0.025%右旋糖酐5ml·kg-1，以小鼠前爪搔抓頭部，后爪搔抓軀干，嘴咬全身各部位作為搔癢指征，觀察并記錄30min 內小鼠搔癢次數及搔癢持續總時間[5]。結果見表1。

*p＜0.05，與空白組相比，不同處方比例的水提取液均具有較好的抑制瘙癢作用，其中苦參、黃柏、地膚子處方比例為1:2:1時具有最佳止癢效果，瘙癢持續時間居中，而處方比例1:1:1 的瘙癢時間最短，止癢效果居中。

表1 不同處方比例的提取液對右旋糖酐致小鼠瘙癢的影響（±s）

表1 不同處方比例的提取液對右旋糖酐致小鼠瘙癢的影響（±s）

空白組 0.0 27.4±4.73 - 24.7±4.2 1：1：1 0.2 17.6±1.79* 37.03% 15.0±3.2* 1：2：1 0.2 16.8±3.42* 40.74% 19.0±2.87* 2：1：1 0.2 20.7±2.17* 25.93% 18.0±3.57*

2.1.3 二甲苯致耳腫脹試驗

取小鼠40 只，將小鼠隨機分成4 組，每組10 只，分別為空白對照組、1:1:1 組、1:2:1 組、2:1:1 組，每組小鼠右耳涂上二甲苯0.03ml/只。0.5h 后用相同劑量的上述藥物分別涂抹于每組小鼠右耳，對照組涂相同量的蒸餾水。4h 后將小鼠頸椎脫臼處死，將雙耳剪下，在雙耳的相同部位用6mm 直徑的打孔器打下相同大小的圓耳片，分別稱重，計算耳腫脹度和耳腫脹抑制率[6]。結果見表2。

耳腫脹度=右耳片質量－左耳片質量。

耳腫脹抑制率（%）=（陰性對照組腫脹度- 給藥組腫脹度）/陰性對照組腫脹度×100%。

表2 不同處方比例提取液對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響（±s）

表2 不同處方比例提取液對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響（±s）

*p＜0.05，與空白組相比，不同處方比例水提取液均具有較好的抑制瘙癢作用，苦參、黃柏和地膚子處方比例1:1:1 的抗炎作用最佳。

組別 劑量/ml· 只-1 耳腫脹度/mg 抑制率/% 空白組 0.03 13.76±2.00 - 1:1:1 0.03 7.33±1.38* 46.73 1:2:1 0.03 8.86±2.62* 35.61 2:1:1 0.03 9.53±2.23* 30.74

2.2 參黃止癢凝膠劑的制備

在適量的蒸餾水中均勻散入凝膠劑基質卡波姆940，溶脹12 小時。用三乙醇胺調節pH 值至6，攪拌至凝膠狀。另取苦參、黃柏、地膚子共10g 提取，提取液濃縮至1g/ml，分別將氮酮、PEG-400 、丙二醇加入至提取液濃縮液中，與卡波姆凝膠混勻，用蒸餾水定容至規定量，攪拌均勻后即得參黃止癢凝膠劑。

2.3 體外釋放行為測定

精密稱取6g 參黃止癢凝膠劑，放在長8cm*寬4cm 的模擬皮膚環境的透析袋中，以20%的乙醇生理鹽水400mL 作為凝膠劑的釋放介質，溫度為（37.0±0.5）℃[7]，轉速為（100±1）r·min-1，測定時間點為1/2h、1h、2h、3h、6h、，在269nm 處的吸光度，考察指標為Q 值，計算公式如下：（v：接受池體積400ml；Ci：第i 次取樣時的質量濃度；m：凝膠劑中總堿的質量）

2.4 參黃止癢凝膠劑處方的單因素考察

2.4.1 卡波姆的用量篩選

參黃止癢凝膠劑中卡波姆用量分別設為1%、1.2%、1.5%、2.0%，按2.2 制備參黃止癢凝膠劑，分別進行體外釋放試驗考察，在6h 時測定Q 值。結果見表3。結果顯示：隨著卡波姆的濃度增大，參黃止癢凝膠劑的粘度也隨之增大，釋藥阻礙力不斷增大，致使考察指標Q 值也隨之減小，與卡波姆用量成負相關，因此卡波姆的用量考察最佳為1%。

表3 卡波姆濃度對參黃止癢凝膠體外釋放的影響（n=3）

2.4.2 pH 調節劑的選擇

用pH 值調節劑三乙醇胺將凝膠劑的pH 值分別調至5.5、6.0、6.5、7.0，按2.2 制備凝膠劑，分別進行體外釋放試驗，在6h時測定Q 值。結果見表4。實驗結果顯示：pH 值為6 時，藥物釋放量最大，故選擇最佳pH 值為6。

表4 pH 值對參黃止癢凝膠體外釋放的影響（n=3）

2.4.3 保濕劑用量的篩選

保濕劑PEG-400 的用量分別為5%、10%、15%、20%，按2.2制備凝膠劑，分別進行體外釋放試驗，在6h 時測定Q 值。結果見表5。實驗結果顯示：當保濕劑PEG-400 的用量為5%時效果最佳。

表5 PEG-400 用量對參黃止癢凝膠體外釋放的影響（n=3）

2.4.4 助溶劑用量的篩選

丙二醇的用量分別選擇5%、10%、15%、20%，按2.2 制備凝膠劑，分別進行體外釋放試驗，在6h 時測定Q 值。結果見表6。實驗結果顯示：在PEG-400 用量為5%，丙二醇的用量選擇5%時，保濕劑效果最佳。

表6 PEG-400 與丙二醇合用對參黃止癢凝膠劑體外釋放的影響（n=3）

2.5 參黃止癢凝膠劑處方用量

對凝膠劑中的基質和輔料進行初步的選擇，通過單因素考察確定了參黃止癢凝膠劑的最佳處方用量，確定最終處方用量為中藥提取液10ml，卡波姆0.5g，PEG-400 2.5g，丙二醇2.5g，氮酮0.25g，三乙醇胺調pH 至6，加蒸餾水至50g。

3 結果與討論

本研究選用苦參、黃柏和地膚子三味中藥材為主藥，用于治療嬰幼兒濕疹，選用凝膠劑通過皮膚進行局部給藥，提高生物利用度。所制備的凝膠劑質地均勻細膩、易于涂布、無毒無刺激性、釋藥性好，該制備工藝方法簡便易行，益于產業化。