枳飲對酒精性肝損傷保護作用的實驗研究

莫桂蕓 吳 英 馬端鑫 葉 勇*

（云南中醫學院第一附屬醫院，云南 昆明650000）

飲酒不當及飲酒過量均可導致全身多系統的損傷，尤其對消化道損傷、肝臟損傷更為顯著。但在日常生活中，糾正酒精性所引起的肝臟損傷則是一個長期性、世界性的難題[1-2]。云南省名老中醫趙淳教授、祁濤教授經多年臨床經驗總結，應用枳飲方取得很好的臨床療效。葉勇教授在兩位教授的經驗基礎上，結合現代營養治療學及現代中藥、食品工藝技術調配而成枳飲顆粒，更方便的應用于臨床。本文對枳飲對酒精性肝損傷保護作用進行實驗研究。

1 實驗材料

1.1 試劑及試藥

乙醇：食品級

聯苯雙酯：武漢東康源科技有限公司生產。

氯化鈉注射液：山東省齊都藥業有限公司，生產批號：1D09090302。

1.2 實驗儀器

臺式低速自動平衡離心機；KHB 酶標儀ST-360

1.3 實驗動物

小鼠120 只，雄，體重20+2g，由成都市達碩實驗動物研究中心提供，質量合格證：SCXK（川）2008-24，檢疫后備用，用SPF級飼養房飼養1 周后使用。

2 實驗方法

實驗分兩部分同時進行，隨機選取60 只大鼠，建立急性酒精肝損傷實驗模型和慢性酒精性肝損傷實驗模型。

2.1 急性酒精肝損傷實驗模型

將動物隨機分為6 組，設置每組10 只，分別為正常組、模型組，聯苯雙酯組（陽性組），枳飲高劑量組、中劑量組、低劑量組。灌胃給藥，正常組和模型組予以氯化鈉注射液，陽性組1.5mg/kg，枳飲高劑量是0.6mg/kg，中劑量組是0.3mg/kg，低劑量組是0.15mg/kg。連續給藥15 天，在最后給藥1 小時，除正常組外，其他各組灌胃濃度為50%乙醇12ml/kg，并且禁食16h，處死并采集實驗鼠的肝組織及血液。

2.2 慢性酒精性肝損傷實驗模型的建立

將動物隨機分為6 組，設置每組10 只，分別為正常組、模型組以及聯苯雙酯組（陽性組），枳飲高、中、低劑量組。正常對照組予以氯化鈉注射液，其他陽性組15mg/kg，枳飲高劑量0.42mg/kg，中劑量組0.21mg/kg，低劑量組0.11mg/kg，給藥后每天上午定時對給藥組予同等劑量50%乙醇6ml/kg，正常對照組同樣的灌胃相同劑量組供試樣品，連續給藥8 周，在最后給藥1小時后，將模型組大鼠處死，并取其血液以及其相應的肝組織[3-4]。

2.3 指標測量

2.3.1 血清的制備

將上述血液樣品經低速自動平衡離心機離心后取血清，測定其ALT、AST、TG 含量。

2.3.2 肝臟組織學觀察

將實驗鼠處死后立即取其肝臟，泡入新鮮配制4℃的預冷標準10%標準福爾馬林溶液中。對實驗肝組織予以相應石蠟切片，并將其脫蠟至水，進行HE 染色，其中實驗步驟包括分化、脫蠟、染色、脫水、促藍、透明、侵水等實驗相關過程，待染色處理完畢后，用高倍顯微鏡完成實驗觀察[3]。

3 實驗結果

數據采取標準均數±標準差（x±s），分析采用spss13.0 統計軟件進行相關分析。P<0.05 表示其實驗結果有統計學差異，p<0.01 表示其實驗結果有顯著差異。兩組間比較均采用t 檢驗；多組間用方差分析，多組間多兩兩進行比較，若方差齊采用LSD 檢驗；若方差不齊，采用Tamhane’s T2法。

3.1 急性酒精肝損傷結果分析（表1）

與模型組比較：*p<0.05, **p<0.01；與給藥前自身比較：#p<0.05,##p<0.01（n=10）

3.2 慢性酒精性肝損傷結果分析（表2）

與模型組比較：*p<0.05, **p<0.01; 與給藥前自身比較：#p<0.05,##p<0.01（n=10）

表1 枳 飲高、中、低劑量組中對急性肝損傷中ALT、AST、TG 的影響

表1 枳 飲高、中、低劑量組中對急性肝損傷中ALT、AST、TG 的影響

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表2 枳 飲高、中、低劑量組中對慢性肝損傷中ALT、AST、TG 的影響

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