基于原子熒光光譜測定釀酒糧食中汞含量的探討

懷閃閃，湯有宏，徐小偉，程 偉，郭乾玲，朱娜娜，孫 猛，張 燕

（安徽古井貢酒股份有限公司，安徽亳州 236820）

由于含汞農藥的廣泛使用，汞對食品污染的問題愈來愈嚴重。長期接觸汞會引起細胞中毒和毛細血管中毒，有時會誘發惡性腫瘤。食品中汞限量衛生國家標準規定的最低限量為0.01 mg/kg。由于食品衛生標準的較低限量指標，需要與之相適應的高靈敏度檢驗方法。微波消解由于其溶樣能力強、溶劑用量少和速度快等特點，已經成為一種新穎的分析測試樣品預處理技術，目前被廣泛地應用于各種試樣的前處理方法中。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑及儀器

原料：小麥(國產)。

儀器設備：PL2002電子分析天平，原子熒光光譜儀(北京瑞利AF-640A)，微波消解儀，控溫電熱板。

試劑：硝酸（HNO3），優級純；鹽酸（HCl），優級純；硼氫化鉀，分析純；氫氧化鉀，分析純。

1.2 試驗方法

采用GB 5009.17—2014《食品安全國家標準食品中總汞及有機汞的測定》的檢驗方法（原子熒光光譜分析法），測定釀酒小麥中汞含量。依據GB/T 27417—2017《合格評定化學分析方法確認和驗證指南》中測量范圍的確認方法，對本方法的測量范圍、檢出限和定量限進行確認，驗證其方法應用于釀酒小麥中汞含量測定的重復性、準確性、可行性。

1.3 檢驗方法

1.3.1 方法原理

試樣經酸加熱消解后，在酸性介質中，試樣中汞被硼氫化鉀還原成原子態汞，由載氣（氬氣）帶入原子化器中，在汞空心陰極燈照射下，基態汞原子被激發至高能態，再由高能態回到基態時，發射出特征波長的熒光，其熒光強度與汞含量成正比，與標準系列溶液比較定量。

1.3.2 樣品制備

稱取固體試樣小麥0.2～0.5 g（精確到0.001 g）于消解罐中，加入5 mL硝酸，加蓋放置過夜，旋緊罐蓋，按照微波消解儀的標準操作步驟進行消解，冷卻后取出，緩慢打開罐蓋排氣，用少量水沖洗內蓋，將消解罐放在控溫電熱板上，于80 ℃加熱，驅趕棕色氣體，取出消解液轉移至25 mL塑料容量瓶中，用少量水分3次洗滌內罐，洗滌液合并于容量瓶中并定容至標線，混勻，待測。同法制備空白試樣。

1.3.3 標準曲線的配制

1.3.3.1 試劑配制

鹽酸溶液(2 %)：量取20 mL硝酸,緩慢加入到980 mL水中，混勻。

硼氫化鉀溶液0.05%（W/V）溶液：（a）稱取2 g氫氧化鉀溶于約50 mL去離子水，加入1 g硼氫化鉀并使其溶解，用去離子水稀釋100 mL，搖勻。此溶液為1%KBH4。（現用現配）；(b)稱取2 g氫氧化鉀溶于約200 mL去離子水，加入1 % KBH4溶液50 mL，用去離子水稀釋至1000 mL，搖勻。此溶液為0.05%KBH4。（現用現配）。

硝酸溶液(1+9)：量取硝酸50 mL緩緩加入到450 mL水中。

1.3.3.2 標準溶液配制

汞標準儲備液（10 μg/mL）。

汞標準中間液（100 μg/L）：準確吸取汞標準儲備液（10 μg/mL）1.00 mL于100 mL容量瓶中，用含有0.5%g重鉻酸鉀的5%的硝酸溶液定容至刻度，混勻。

汞標準系列溶液：分別吸取汞標準中間液(100 μg/L)0.00 mL、0.10 mL、0.25 mL、0.50 mL、0.75 mL、1.00 mL于50 mL容量瓶中，用硝酸溶液(1+9)稀釋至刻度，混勻。此汞標準系列溶液的質量濃度分別為0.00 μg/L、0.20 μg/L、0.50 μg/L、1.00 μg/L、1.50 μg/L和2.00 μg/L。

1.4 結果計算方法

試樣中汞的含量按式(1)計算：

式中：X——試樣中汞的含量，mg/kg；

C——供試品溶液中汞的含量，μg/L；

C0——試劑空白溶液中汞的含量，μg/L；

V——樣品定容體積，mL；

m——樣品質量，g。

2 結果與分析

2.1 測量范圍

依據GB/T 27417—2017《合格評定化學分析方法確認和驗證指南》中5.2測量范圍的確認方法，對本方法的測量范圍進行確認，對0.2 μg/L、1.0 μg/L和1.5 μg/L 3個不同濃度的汞標準溶液進行6次檢測分析，其結果見表1和圖1。

表1 標準曲線線性

試驗所得標準曲線線性回歸方程的相關系數R2為0.998648，結果（見表1標準曲線線性）符合GB/T 27417—2017中對于準確定量方法，線性回歸方程的相關系數不低于0.99的要求。

精密度以不同濃度的汞標準溶液6次檢測結果值的室內變異系數表示，其結果（見表2標準溶液變異系數及正確度結果表）符合GB/T 27417—2017中被測組分含量為0.1～10 μg/L時實驗室內變異系數≤21%的要求。

表2 標準溶液變異系數及正確度結果表

表3 方法檢出限和定量限結果表

表4 正確度及精密度結果

正確度以不同濃度的汞標準溶液的回收率來表示，即汞標準溶液6次檢測結果的平均值與已知濃度的比值，其結果（見表2標準溶液變異系數及正確度結果表）符合GB/T 27417—2017中被測組分含量為＜100μg/L時方法回收率在60%～120%的要求。

2.2 線性范圍

依據GB/T 27417—2017《合格評定化學分析方法確認和驗證指南》中5.3線性范圍的確認方法，對本方法的線性范圍進行確認，線性回歸方程的相關系數R2為0.998648，結果（見表1標準曲線線性）符合GB/T 27417—2017中對于準確定量方法，線性回歸方程的相關系數不低于0.99的要求。

2.3 檢出限和定量限

依據GB/T 27417—2017《合格評定化學分析方法確認和驗證指南》中5.4檢出限和定量限的驗證方法，采用空白標準偏差法對本方法的檢出限進行驗證，方法的檢出限為空白試驗的平均值與3倍的標準偏差之和，方法定量限為方法檢出限的3倍。故本方法的方法檢出限為0.014 μg/L，定量限為0.042μg/L，見表3。

2.4 正確度

依據GB/T 27417—2017《合格評定化學分析方法確認和驗證指南》中5.5正確度的確認方法，采用加標回收的方法對準確度進行確認，方法回收率（見表4）符合GB/T 27417—2017中被測組分含量＜100μg/L時回收率在60%～120%的要求。

3 結論

本次研究依據GB/T 27417—2017《合格評定化學分析方法確認和驗證指南》對GB 5009.17—2014《食品安全國家標準食品中總汞及有機汞的測定》中汞含量的測定方法（原子熒光光譜分析法）進行驗證，驗證參數中的測量范圍、線性范圍、正確度及精密度均符合相關要求。