白及提取物乳膏劑的處方篩選研究

趙春麗，申孝靈，晏合呂，李 婷，李秀雅，周永強

(貴州中醫藥大學，貴州 貴陽 550025)

皮膚具有一定的彈性和韌性，經常會或輕或重地受到損傷，手足皸裂就是最令人煩惱的損傷之一。不僅是可以直接觀察到的皸裂稱為損傷，事實上，皮膚粗糙也可以認為皮膚已受到損傷。近年來，有報道在中醫美容方中加入一種或幾種藥性相容、療效強的外傷中草藥，能夠對防治皮膚皸裂取得很好的效果。例如“純中藥萃取養膚霜”，其中添加的中草藥(丹參、紅景天等)有清熱活血養膚生肌之效，在皮膚干燥、脫屑、脫皮及皮膚皸裂方面療效顯著[1]。白及為蘭科植物白及BletillaStriata(Thunb.) Reichb. f .的干燥塊莖。具有收斂止血，消腫生肌的作用，多用于咯血，吐血，外傷出血，瘡瘍腫毒，皮膚皸裂[2]。《新修本草》云：“此物，山野人患手足皸拆，嚼以涂之有效[3]。”《本草易讀》中也有記載：“除頭面，使皮黑反白，手足皴裂，令澀肌變滑。去腐逐瘀甚速，生肌止痛良效。肺癰膿血未盡者勿用。手足皴裂，水合末塞之。勿犯水[4]。”目前研究發現白及中主要含有聯芐類、二氫菲類、聯菲類、聯菲醚類、菲并吡喃類、聯芐葡萄糖苷類、甾體、三萜、脂肪酸、多糖蒽醌、黃酮等多種成分[5]。白及的這些功效與其所含有的藥效成分密切相關，其塊莖提取物主要成分為白及多糖，化學組成分為葡甘聚糖[6]。故本研究選用中藥白及作為天然添加劑，通過制備O/W型乳膏劑，優化其制備工藝，并結合白及中膠狀成分愈合創傷的優點，以治療手足皸裂、保持手部肌膚柔嫩細膩為主要目的，研制含有白及提取物的乳膏劑，以期為進一步深度開發白及相關產品提供參考依據。

1 材料

1.1 藥材

白及購買于施秉縣富民高新農業發展有限公司。

1.2 主要試劑

硬脂酸，卡波姆、三乙醇胺、司盤-60等購自國藥集團化學試劑有限公司；蜂蠟，二甲基硅油、高級脂肪醇、棕櫚酸異丙酯、尼泊金乙酯等購買于天津市科密歐化學試劑有限公司。

1.3 主要儀器

電熱恒溫鼓風干燥箱(101-1AB，天津市泰斯特儀器有限公司)；電子分析天平(XS205DU，瑞士梅特勒公司)，電子恒溫水浴鍋(DKW-4，上海科西實驗儀器廠)；臺式低速離心機(L600，湖南湘儀實驗室儀器開發有限公司)。

2 方法

2.1 正交設計法篩選白及膠提取工藝

取約50 g白及新鮮藥材切丁，進行水煮提取，紗布過濾，合并濾液，濃縮，取濃縮濾液，加入3倍量醇沉，靜置至無沉淀生成，計算白及膠得率。以白及膠的得率為指標，設計L9(34)正交優化試驗，以提取次數(1、2、3)、料液比(1∶5、1∶10、1∶14)及醇沉濃度(95%乙醇、70%乙醇、80%乙醇)為考察因素，根據實驗結果，對提取時間(0.5、1、1.5)實施單因素考察，確定最終白及提取最優工藝。

2.2 乳膏劑基質處方的考察

2.2.1 單因素考察

以穩定性為指標，即在離心、耐寒、耐熱測試時同時穩定。具體為2000 r/min旋轉30 min離心后，觀察其是否分層；進行耐寒測試時，置于-6～-10℃保持24 h后，恢復室溫后應與試驗前相比，觀察是否有明顯性狀差異；進行耐熱測試時，置于(40±1)℃保持24 h，恢復至室溫后觀察膏體是否有油水分離現象。具體為只改變一個因素組成的加入量，其他因素含量固定不變[6]。

2.2.2 多因素試驗設計

根據單因素實驗結果，設計多因素試驗考察對穩定性影響較大的硬脂酸、蜂蠟、二甲基硅油、高級脂肪醇原料的質量配比，在符合穩定性(耐熱、耐寒、離心)要求，同時兼顧外觀，細膩度、粘度、涂展性、吸收性等方面滿足要求。

表1 多因素實驗設計

2.2.3 考察指標及評分標準

參照參考文獻[7]及《中國藥典》[8]要求乳膏劑應均勻、細膩、具有適當的粘稠度、易于涂布，故設計考察指標以穩定性和乳膏的外觀性狀進行評分，綜合評分滿分為100分，每項各占10分。同時對乳膏劑的外觀(形態、色澤、透光度)、細膩度、粘度、涂展性、吸收性進行評價，評分標準見表2。

表2 處方篩選各項考察指標評分標準

2.2.4 乳化時間和乳化溫度的選擇

乳化時間和乳化溫度對乳化體系亦有較大的影響，分別對乳化溫度及乳化時間進行的單因素考察。參照評分標準優選最佳乳化時間及溫度。

2.3 白及膠乳膏的制備及質量評價

根據課題組前期研究，發現白及膠含量為5%時治療皮膚皸裂效果最好[9]，故最優工藝為5%白及膠與空白基質制備成白及膠乳膏劑。參照文獻[10]的方法，根據最優工藝制備三批白及膠乳膏劑，對乳膏劑的外觀性狀、物理穩定性進行評價，并對其pH值進行測定。

3 結果與分析

3.1 白及膠的最佳提取工藝確定

以水提次數(A)、水提料液比(B)、醇沉時醇的濃度(C)為影響因素，以白及膠得率為測定指標，設計L9(34)正交優化試驗，優選白及的提取工藝，正交實驗因素水平見表3，正交實驗結果見表4，方差分析結果見表5。

表3 正交試驗因素水平

表4 白及提取正交試驗結果

表5 方差結果分析

由表3和表4可知，影響白及膠得率的先后順序依次為A>B>C，即水提次數>水提料液比>醇沉濃度。其中，水提取次數和料液比有顯著影響，醇沉濃度也有一定影響，結合極差分析，最佳提取方案確定為A3B2C1，即加10倍量的水，提取3次，并用95%乙醇進行醇沉。

3.2 單因素實驗設計及結果

實驗設計及結果見表6。

表6 單因素實驗設計及結果

表6(續)

由單因素實驗可知，硬脂酸、蜂蠟、二甲基硅油、高級脂肪酸醇對乳膏穩定性影響較大，硬脂酸的穩定范圍為4%～6%，蜂蠟的穩定范圍為3%～5%，二甲基硅油穩定范圍為1%或3%，高級脂肪醇為1%～2%。

3.3 多因素實驗結果

對上述指標進行綜合評分，結果見表7。

表7 綜合得分表

由表7中數據可知，油相的比例會對穩定性的各指標具有極大影響，尤其是硬脂酸、蜂蠟、高級脂肪醇和二甲基硅油的比例對乳膏劑的耐寒、耐熱、離心穩定性影響較大，當上述四者比例發生變化時，護手霜在耐寒、耐熱、離心方面的穩定性也發生了較為明顯的變化。尤其在實驗6～8中，不僅在穩定性上出現了某方面或某幾方面明顯較差的情況，而且乳膏劑的其他性能也受到了不同程度的影響。

實驗結果表明，白及乳膏劑的最佳油相基質的組成為添加5%硬脂酸、1%高級脂肪醇、4%蜂蠟、1%二甲基硅油及1%棕櫚酸異丙酯；最佳水相基質的組成為添加0.2%尼泊金乙酯、0.2%卡波姆、1%三乙醇胺及1%司盤-60。

3.4 乳化溫度及時間的篩選結果

將所述油相、水相混合后，在60～80℃下乳化5～25 min。根據評分標準優選乳化溫度為80℃，乳化時間為15 min。故空白乳膏的最佳制備工藝為最佳油相組成與最佳水相組成混合，加入適量蒸餾水在80℃攪勻、乳化15 min。

3.5 白及膠乳膏劑的制備及質量檢查的結果

制備的三批白及膠乳膏，呈現均勻的乳白色、細膩無顆粒感、涂展性良好，粘稠度良好，pH適宜，且耐熱、耐寒、離心穩定性良好。結果見表8。

表8 外觀性狀、物理穩定性及pH值測定結果

4 討論與結論

根據《中國藥典》對于乳膏劑的要求，達到標準的乳膏劑需要滿足膏體均勻，細膩，應具有適當的粘稠度，同時在穩定性(耐熱、耐寒、離心考驗)等方面滿足要求。本研究發現，將硬脂酸、蜂蠟、二甲基硅油、高級脂肪醇以重量比為5∶4∶1∶1復配，可以達到很好的穩定性。在添加劑可以進一步改善乳膏劑的各方面性能考察時，僅添加氮酮或同時添加氮酮、羊毛脂、棕櫚酸異丙酯、甘油時，對乳膏劑的耐熱穩定性較為不利。而相較于其他單一組分或復配添加劑，在僅使用棕櫚酸異丙酯時，對乳膏劑的各方面性能改善效果最好。三乙醇胺和司盤-60可以改善乳膏劑的乳化效果，且其合用比任一單用效果更好，尤其在重量比2∶1比例時，乳化效果最佳。相較于現有技術中的其他防腐劑(如苯甲酸)，尼泊金乙酯對乳膏劑的各方面性能無不利影響，同時具有很好的防腐效果。充分考察以上處方各組成因素特征后確定該工藝。制備工藝簡單，質量易控，可實現大規模生產，具有較大的經濟效益。