結(jié)核斑點試驗聯(lián)合結(jié)核抗體IgG檢測診斷結(jié)核的應用研究

廣東省茂名市電白區(qū)人民醫(yī)院（525400）楊恒明

肺外結(jié)核是臨床醫(yī)學較為多見的慢性傳染性病癥，會受到環(huán)境影響病情逐漸加重。目前，根據(jù)調(diào)查指出，我國結(jié)核病的發(fā)生率正在不斷增加，因為肺外結(jié)核也會影響患者的日常生活水平以及健康狀況[1]。針對肺外結(jié)核病臨床上應該早診斷早治療，以此采用針對性的治療方案，然而調(diào)查指出，因為結(jié)核病臨床表現(xiàn)并不顯著，在進行診斷時較為困難，極易出現(xiàn)誤診的情況。針對肺外結(jié)核病的檢驗普遍采用細菌學檢驗措施，但是操作較為復雜，并且檢驗時間較長，在早期診斷中并不適用[2]。近年來，結(jié)核感染T細胞斑點試驗以及結(jié)核抗體的檢驗措施逐漸普及，檢驗效果顯著。該研究對結(jié)核檢驗措施予以討論，通過對比論證的手法，以此分析探討結(jié)核斑點試驗聯(lián)合結(jié)核抗體IgG檢測在診斷結(jié)核中的應用，結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 該研究選擇我院2016年1月～2019年5月收治確診為結(jié)核病的患者41例，設(shè)為研究組，選擇同期正常非肺結(jié)核患者29例設(shè)為對照組。對照組，男19例，女10例，年齡21～70歲，平均年齡（37.91±6.61）歲；研究組，男21例，女20例，年齡22～72歲，平均年齡（38.97±6.58）歲。患者均簽署了同意書，其基本信息并沒有統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

1.2 方法 結(jié)核感染T細胞斑點計數(shù)試驗：①樣品采集、制作：取患者外周血，于室溫條件下進行不完全培養(yǎng)液的混合，予以分離，將單個細胞層于清潔離心管存放，予以細胞懸液并且稀釋，將細胞的混合液添加細胞計數(shù)板，予以活細胞計數(shù)的基本操作；②培養(yǎng)板：于培養(yǎng)板添加AIM-V，抗原A/B，劑量500μl即可，在低于37℃的條件下，予以CO2培養(yǎng)；③斑點計數(shù)：將培養(yǎng)板取出，孔內(nèi)液體不保留，做好清潔工作后，于孔內(nèi)添加酶標抗體液體，在5℃條件下進行孵育，具體問題的調(diào)整按照實際情況而定，不超過8℃，不低于2℃，并且再添加底物液體，于室溫狀況下進行一定的反映，用蒸餾水予以相關(guān)的洗滌工作，再予以干燥操作[3]；④判斷結(jié)果：依照斑點數(shù)對陽陰性予以測定。陰性：陰性對照斑點數(shù)小于5，并且抗原A、B斑點數(shù)相較于陰性對照組斑點數(shù)更多，超過7個。陽性：陰性對照斑點數(shù)超過5，抗原A、B斑點相較于陰性對照組斑點數(shù)更高，超出陰性對照組斑點數(shù)的兩倍。

結(jié)核抗體檢驗：使用結(jié)合分歧桿菌抗體診斷試劑盒，對患者血清抗結(jié)核抗體予以測定，按照相關(guān)措施予以嚴格的操作。結(jié)合IgG抗體會和SPA產(chǎn)生反應進而出現(xiàn)特異性紅色斑點，陽性：檢驗存在紅色斑點。陰性：不存在紅色斑點。

1.3 觀察指標 統(tǒng)計分析兩組患者感染T細胞斑點試驗與結(jié)核抗體檢驗的檢查結(jié)果，將研究組再細化為肺結(jié)核、肺外結(jié)核以及HIV-TB。分析兩種檢驗措施的陽性率以及斑點計數(shù)的差異[4]。

1.4 統(tǒng)計學方法 此項研究的調(diào)查數(shù)據(jù)應用統(tǒng)計軟件SPSS20.0進行分析，計量計數(shù)資料分別用t與x2檢驗，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

2 結(jié)果

2.1 結(jié)核感染T細胞斑點試驗檢出陽性情況比較 研究組檢出陽性率78.04%（32/41），其中肺結(jié)核88.0%（22/25），肺外結(jié)核60.0%（3/5），HIV-TB763.63%（7/41）。對照組10.34%（3/29），見附表1。

2.2 不同檢驗措施肺結(jié)核陽性率 研究組結(jié)核感染T細胞斑點試驗陽性率78.04%，結(jié)核抗體16例（39.02%），聯(lián)合檢測38例（92.68%）；對照組感染T細胞斑點試驗陽性率10.34%，結(jié)核抗體5例（17.24%），聯(lián)合檢測21例（72.41%），組間比較，具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

附表1 兩組結(jié)核感染T細胞斑點試驗檢出陽性情況比較

附表2 結(jié)核感染T細胞斑點試驗斑點計數(shù)

2.3 結(jié)核感染T細胞斑點試驗斑點計數(shù) 兩組通過結(jié)核感染T細胞斑點試驗A、B孔斑點計數(shù)并沒有統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見附表2。

3 討論

全球結(jié)核病的控制是通過早診斷早治療為基礎(chǔ)原則，通過對傳染性病理的控制，盡量避免結(jié)核分歧桿菌的擴散，因此應該著重病情的診斷[4]。故而還需要對結(jié)核病的基本特征予鑒別。結(jié)核病是臨床醫(yī)學中以細胞傳播為目的的慢性傳染病癥，常見于肺部以及相關(guān)的炎癥反應轉(zhuǎn)歸過程。結(jié)核感染T細胞斑點試驗以及抗結(jié)核抗體的檢驗是目前較為關(guān)鍵的檢驗措施。抗結(jié)核抗體試驗主要是通過將分歧桿菌細胞壁的38kD予以純化，再進行IgG的檢驗。38kD主要收益在質(zhì)膜定位，對B細胞有一定的刺激作用，但抗結(jié)核抗體在中晚期才會明顯，在早期診斷過程中不免會出現(xiàn)假陰性的狀況，并且抗體的出現(xiàn)也受到遺傳因素的影響。結(jié)合感染T細胞斑點試驗是通過相關(guān)的技術(shù)將單細胞水平予以檢驗的免疫學措施[5]。通過對分歧桿菌特異性的抗原予以評估，具有較高的敏感性，并且特異性較強。結(jié)合患者在不同過程其自身免疫功能也會存在不平衡的狀況，細胞免疫以及體液免疫等會從不同角度指出檢驗的結(jié)果。結(jié)核患者T細胞淋巴因子的分型狀況相對而言較為復雜，細胞環(huán)境也會受到因子的影響而發(fā)生變化，結(jié)核感染T細胞斑點試驗也存在患者環(huán)境因素的影響而出現(xiàn)的改變。相關(guān)資料指出，在對抗結(jié)核在治療過程中，結(jié)核感染T細胞斑點試驗檢驗的陽性幾率會受到影響逐漸變成陰性。相關(guān)研究指出，結(jié)核感染T細胞斑點試驗可以針對潛伏性結(jié)核感染患者進行診斷。目前我國結(jié)核病的發(fā)生率不斷增加，潛伏性結(jié)核感染患者相對較多，但是結(jié)核感染T細胞斑點試驗的檢出陽性率也并不是百分之百，結(jié)核感染T細胞斑點試驗和結(jié)核抗體檢驗的聯(lián)合應用診斷陽性率較高，但是還需要進行不斷的研究。

綜上所述，結(jié)核感染T細胞斑點試驗相較于結(jié)核抗體檢驗具有較高的敏感性，并且特異性較強，但結(jié)核感染T細胞斑點試驗和結(jié)核抗體聯(lián)合檢驗，效果更佳顯著，一定程度上能夠提升結(jié)核陽性率，在臨床治療中值得應用。