ADPN、ANGPTL4、RBP聯(lián)合檢測(cè)在DKD患者早期診斷及預(yù)后評(píng)估中的應(yīng)用

李 江，范凱慧

延安大學(xué)咸陽(yáng)醫(yī)院檢驗(yàn)科，陜西咸陽(yáng) 712000

近年來(lái)，隨著飲食結(jié)構(gòu)的改變，糖尿病的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)。糖尿病腎病(DKD)是其最為嚴(yán)重的并發(fā)癥之一[1]，有研究顯示，DKD患者的病死率明顯高于糖尿病患者[2]。但是DKD患者的臨床癥狀較為隱匿，發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，當(dāng)患者出現(xiàn)蛋白尿等癥狀時(shí)，其腎功能損傷已經(jīng)達(dá)到不可逆狀態(tài)[3]。所以，尋找DKD患者早期生化指標(biāo)的改變規(guī)律，對(duì)于DKD患者的早期診斷和預(yù)后分析具有重要意義。血清脂聯(lián)素(ADPN)為脂肪組織分泌的胰島素抵抗性負(fù)性調(diào)節(jié)因子，研究顯示，其血清水平與患者的蛋白尿排泄量呈正相關(guān)[4]。人血管生成素樣蛋白4(ANGPTL4)與糖尿病患者的糖代謝紊亂和胰島素抵抗有關(guān)；視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)表達(dá)水平，可在一定程度上反映患者的腎臟損傷情況。本研究通過(guò)分析ADPN、ANGPTL4、RBP聯(lián)合檢測(cè)在DKD患者早期診斷及預(yù)后評(píng)估中的價(jià)值，為臨床診斷和治療提供科學(xué)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2016年1月至2019年1月本院收治的2型糖尿病患者120例作為疾病組，男57例，女63例；年齡55～82歲，平均(60.6±3.5)歲；平均體質(zhì)量指數(shù)(24.15±2.67)kg/m2。再根據(jù)病情程度分為單純糖尿病組39例，微量蛋白尿(尿蛋白300～500 mg/d)DKD組34例，臨床蛋白尿(尿蛋白>500 mg/d)DKD組32例，終末期DKD組15例。另選取本院同期體檢健康者120例作為對(duì)照組，男53例，女67例；年齡53～79歲，平均(59.7±4.1)歲；平均體質(zhì)量指數(shù)(25.08±2.96)kg/m2。各組性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)DKD患者符合《糖尿病腎病防治專(zhuān)家共識(shí)(2014年版)》中關(guān)于DKD的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]，24 h尿蛋白定量0.3～1.0 g，同時(shí)符合2006年世界衛(wèi)生組織規(guī)定的2型糖尿病診斷的標(biāo)準(zhǔn)[6]，空腹血糖>7.0 mmol/L，糖耐量試驗(yàn)中口服75 g葡萄糖的2 h后血糖≥11.1 mmol/L；(2)服用二甲雙胍、磺脲類(lèi)藥物降糖；(3)采用胰島素、噻唑烷二酮類(lèi)藥物治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并有惡性腫瘤；(2)合并慢性呼吸系統(tǒng)疾病及其他原因所致的慢性腎臟疾病等；(3)精神障礙；(4)依從性差。各組研究對(duì)象均簽署知情同意書(shū)，且本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)論證通過(guò)。

1.2方法 入院第2天清晨空腹抽取外周靜脈血5 mL，3 000 r/min離心10 min，取上清液，-80 ℃儲(chǔ)存。采用RLMax型全自動(dòng)生化分析儀(購(gòu)自德國(guó)西門(mén)子公司)測(cè)定受試者的血清三酰甘油(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)水平。采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定檢測(cè)血清ADPN、ANGPTL4、RBP水平，儀器為NDM-9602G型全自動(dòng)酶標(biāo)分析儀(購(gòu)自北京普朗新技術(shù)有限公司)。所用試劑均購(gòu)自美國(guó)RD公司，均在有效期內(nèi)使用，嚴(yán)格按照儀器說(shuō)明書(shū)的實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行所有操作。

2 結(jié) 果

2.1各組血脂情況比較 疾病組TC、TG、LDL、HDL水平高于對(duì)照組(P<0.05)；不同病情程度患者LDL、HDL水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，TC、TG水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；隨著病情程度的加重，患者TC、TG水平升高(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 各組血脂情況比較

2.2各組ADPN、ANGPTL4、RBP水平比較 疾病組血清ADPN、ANGPTL4水平低于對(duì)照組，RBP水平高于對(duì)照組(P<0.05)。不同病情程度患者血清ADPN、ANGPTL4、RBP水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；隨著病情程度的加重，患者ADPN、ANGPTL4水平降低，RBP水平升高(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 各組ADPN、ANGPTL4、RBP水平比較

2.3DKD患者危險(xiǎn)因素分析 通過(guò)對(duì)不同嚴(yán)重程度DKD患者多因素Logistic回歸分析，血清低水平ADPN、ANGPTL4，高水平RBP均為DKD患者嚴(yán)重程度的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，見(jiàn)表3。

表3 DKD患者危險(xiǎn)因素分析

2.4單獨(dú)檢測(cè)及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)DKD患者嚴(yán)重程度的診斷效能分析 通過(guò)對(duì)不同嚴(yán)重程度DKD患者的診斷效能比較分析，聯(lián)合檢測(cè)的AUC及檢測(cè)靈敏度均高于單獨(dú)檢測(cè)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表4～6。

表4 單獨(dú)檢測(cè)及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)微量蛋白尿DKD組患者診斷效能分析

表5 單獨(dú)檢測(cè)及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)臨床蛋白尿DKD組患者診斷效能分析

表6 單獨(dú)檢測(cè)及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)終末期DKD組患者診斷效能分析

3 討 論

DKD是臨床上最常見(jiàn)的由腎小球和腎小管病變引起的一種具有嚴(yán)重危害性的微血管并發(fā)癥，也是導(dǎo)致糖尿病患者死亡的重要因素之一[7]。研究證實(shí)，高糖誘導(dǎo)的腎損傷，氧化應(yīng)激的增加，細(xì)胞因子和趨化因子的參與，細(xì)胞凋亡，線(xiàn)粒體功能障礙等因素參與DKD的發(fā)生、發(fā)展[8]。DKD較為隱匿，診斷較難，同時(shí)其病情進(jìn)展有不同的轉(zhuǎn)歸，若發(fā)展到終末期腎臟病，可引起腎衰竭，甚至死亡[9]，而DKD患者早期腎功能損傷有一定的可逆轉(zhuǎn)性，所以若能及時(shí)采取臨床干預(yù)措施進(jìn)行治療，可在一定程度上阻止DKD患者的病情繼續(xù)發(fā)展[10]。

本研究中，ADPN是脂肪細(xì)胞分泌的胰島素負(fù)性調(diào)節(jié)因子，可以增強(qiáng)患者的胰島素活性，降低患者的內(nèi)皮炎性反應(yīng)，同時(shí)，對(duì)于血管動(dòng)脈硬化具有一定的抑制作用[11]。ADPN位于染色體3q27，全基因組掃描揭示此區(qū)域含有2型糖尿病和代謝綜合征的易感基因[12]，其與糖尿病高血糖所致炎癥、氧化應(yīng)激損傷有關(guān)，其在DKD早期發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用，可通過(guò)調(diào)控轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子等細(xì)胞因子的表達(dá)及調(diào)控AMPK信號(hào)通路等改善腎細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激反應(yīng)狀態(tài)，有助于改善腎臟氧化應(yīng)激損傷[13]。本研究中，疾病組患者的ADPN水平低于對(duì)照組，且隨著DKD的病情加重，患者的ADPN表達(dá)水平呈下降趨勢(shì)，分析認(rèn)為隨著患者的腎臟損傷及微量蛋白尿的形成，患者血管內(nèi)皮炎性反應(yīng)增加，胰島細(xì)胞分泌功能不足，ADPN水平下降，脂代謝水平不足，患者的血脂水平有上升趨勢(shì)。從患者的血脂水平分析，隨著患者DKD病情的加重，患者的TG及TC水平呈上升趨勢(shì)。周瑞君等[14]根據(jù)24 h尿微量清蛋白水平，將DKD分為正常組、微量組和大量組，并設(shè)健康人群作為對(duì)照組，發(fā)現(xiàn)DKD患者血清ADPN水平低于健康人群，且DKD不同分期患者血清ADPN水平差異較大，隨腎臟損害程度加重，血清ADPN水平逐漸升高，但仍低于健康人群，與本研究結(jié)論一致。ANGPTL4主要是由腎臟足細(xì)胞過(guò)度分泌，以及由此造成的唾液酸化作用不足，最終導(dǎo)致患者的負(fù)電荷硫酸類(lèi)肝素蛋白與ANGPTL4相互過(guò)度結(jié)合，最終造成腎小球基底膜電位的改變，通過(guò)腎小球跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)的電荷改變作用力，加劇對(duì)患者的腎臟損傷，形成惡性循環(huán)。本研究中，疾病組患者血清ANGPTL4水平明顯低于對(duì)照組，且隨著病情加重，患者血清ANGPTL4水平明顯下降，提示大量血清ANGPTL4與帶負(fù)電荷的硫酸類(lèi)肝素蛋白相互結(jié)合，造成患者基底膜電位發(fā)生改變，最終影響患者的腎功能。李文娜等[15]分析了血清ANGPTL4在DKD患者中的變化，結(jié)果顯示患者血清ANGPTL4水平下降，尿液ANGPTL4水平上升，其變化情況與患者的疾病進(jìn)展呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)，與本研究類(lèi)似。血清RBP是一條單肽鏈，其相對(duì)分子質(zhì)量為21.2×103，通常與視黃醇等結(jié)合形成復(fù)合物，協(xié)助轉(zhuǎn)運(yùn)視黃醇。RBP主要是由肝臟合成，通過(guò)腎小球?yàn)V過(guò)，并由腎小管重吸收和降解。當(dāng)機(jī)體腎臟受到損傷后，腎小球?yàn)V過(guò)功能降低，導(dǎo)致血清RBP水平升高，因此可以檢測(cè)血清RBP的水平反映腎功能[16]。本研究顯示，與健康人群相比，DKD患者的RBP水平上升，且隨著病情加重，RBP水平升高更為明顯，提示由于患者的腎臟重吸收能力下降，患者的腎功能損傷程度加重，其RBP水平上升。詹頡等[17]在對(duì)DKD的早期診斷中指出，隨著患者RBP水平上升，患者的腎功能損傷加劇。張如霖等[18]報(bào)道，DKD患者血清RBP水平與病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，提示RBP可作為判斷腎功能受損的重要指標(biāo)，這與本研究結(jié)果一致。另外，聯(lián)合檢測(cè)對(duì)不同嚴(yán)重程度DKD患者的診斷效能分析，聯(lián)合檢測(cè)的診斷靈敏度和AUC均高于單獨(dú)檢測(cè)，對(duì)于疾病的早期診斷和治療效果評(píng)價(jià)均具有良好的作用。

綜上所述，聯(lián)合檢測(cè)血清ADPN、ANGPTL4、RBP的表達(dá)水平，對(duì)于DKD患者的早期診斷、干預(yù)具有預(yù)警價(jià)值，且對(duì)其不同嚴(yán)重程度的腎臟損傷具有較高的診斷靈敏度，建議臨床推廣。下一步將增加樣本量和聯(lián)合檢測(cè)血清指標(biāo)，以期更精準(zhǔn)預(yù)測(cè)和診斷DKD，實(shí)施早期藥物干預(yù)。