酶聯免疫在洗衣機除塵螨過敏原中的淺析

羅寨洪

（威凱檢測技術有限公司 廣州 510663）

引言

隨著新冠疫情的發生，市場對于健康類產品的需求會進一步提高。而洗衣機作為人們家庭中常用的家用電器，在我國的普及率極高，從波輪、雙缸洗衣機，到滾筒洗衣機，再從全自動洗衣機到智能洗衣機。隨著科技制造工藝的不斷發展，眾多洗衣機制造商紛紛推出了具有除過敏原功能的洗衣機，來滿足消費者對于健康類洗衣機的需求。

當機體接觸過敏原一定時間后，機體致敏。致敏期的時間可長可短，這段時間內沒有臨床癥狀，當再次接觸過敏原后，方可發生過敏反應。生活中吸入式過敏原無處不在，花粉、柳絮、粉塵、螨蟲、動物皮屑、油煙、油漆、汽車尾氣、煤氣、香煙等都屬于吸入式過敏原。目前全球有22 %的人群患有過敏性鼻炎、哮喘、濕疹等過敏性疾病，并以每10年23倍的速度增加，其中高達53 %的過敏性疾病都與螨蟲有著緊密的聯系，其中人們生活中最常見的螨蟲便是塵螨。控制過敏原是預防過敏性疾病的關鍵途徑之一，目前，市場有部分宣稱具有除過敏功能的洗衣機，通過對衣物上過敏原物質殘留的去除，來減少各種過敏原對人們的危害。對此，我們采用酶聯免疫分析方法對部分宣稱具有除過敏功能的洗衣機進行塵螨過敏原去除率的試驗探索。

1 塵螨與塵螨過敏原

塵螨，屬節肢動物門、蜘蛛綱、真螨目、蜱螨科，截止到目前已有5 000多種塵螨被發現。塵螨廣泛存在于家庭環境中，包括地毯、床單、被單、窗簾等都有活螨的存在。塵螨以人體脫落物為主要食物來源，其螨蟲蟲體及代謝產物、排泄廢物等均具有較強的過敏原性，可引起超敏反應性疾病，如過敏性哮喘、過敏性蕁麻疹、特應性皮炎等[1]。全世界有將近10～20 %的人對于塵螨過敏，且塵螨引起超過50 %的Ⅰ型變態反應性疾病患者。

根據一項調查統計的結果顯示，在能夠引起過敏性疾病的眾多過敏原當中，塵螨的比例占得最多，幾乎是占到了一半以上，對人的危害性非常的巨大[2]。塵螨是屬于吸入性過敏原的一種，長得有一點像小型的蜘蛛。在我們的居家環境中，塵螨可以談得上是無孔不入。尤其是潮濕的環境里很容易滋生塵螨。塵螨的排泄物可以被分解成為極其細微的粉塵，它們可以依附在厚重的窗簾上，毛織的地毯上，枕頭上或者是床單上，是人們非常容易接觸到的一種過敏原。塵螨一旦被呼吸到鼻腔里面，就很有可能會引發鼻炎，如果是被呼吸入肺部的話，則非常容易會誘發哮喘疾病的發作[3,4]。

2 檢測原理與方法

酶聯免疫（ELISA）是以抗原與抗體的特異性反應作為基礎，加上酶與底物之間的特異性反應，使反應之間靈敏度放大的技術。ELISA是根據酶反應底物顯色的深淺進行定性或定量分析，由于酶促反應的放大作用能夠使免疫反應的靈敏度大大提高。隨著蛋白質分離純化技術和單克隆抗體制備技術的不斷完善和迅速發展，各種高純度抗體、單克隆抗體的全面應用，使得ELISA在特異性、靈敏度等許多方面都有了大幅度的提高，ELISA同時具有精確的定量分析能力，隨著其使用范圍的不斷擴大，ELISA逐步成為各種復雜體系中痕量物質分析定量的主要技術手段[5]。ELISA具有選擇性好、靈敏度高、結果判斷客觀準確、實用性強等眾多優點，同時可以彌補統計學分析方法和其它儀器測試手段的不足。

3 實驗與分析

3.1 實驗器材

微孔板分光光度計（酶標儀），洗板機（PW-812），移液器，震蕩搖床。

3.2 實驗材料與試劑

負載中平布（經紗22，緯紗22），屋塵螨變應原（Der P1），酶聯免疫試劑盒（Der P1 ELISA KIT）。

3.3 試驗步驟

3.3.1 器具準備

實驗前將待測洗衣機空載運行兩個除過敏程序。

3.3.2 試驗負載與試驗樣塊制備

試驗負載規格：33 cm×33 cm。

試驗樣塊規格：2.5 cm×7.5 cm。

121 ℃滅菌20 min，60 ℃烘干，至室溫后使用。

3.3.3 進行除過敏程序

將涂覆屋塵螨過敏原的試驗樣塊固定到試驗負載上，裝載進被測樣機內，啟動除過敏原程序。試驗使用負載為洗衣機額定容量的30 %，采用Der P1 ELISA KIT試劑盒進行檢測。

陽性對照：將涂覆過敏原的載體在室溫下放置與試驗組相同的時間。采用與試驗組相同的方式回收并檢測過敏原。

陰性對照：取未加過敏原的試驗樣塊3 塊，按照與試驗組相同的方法同步裝載、洗滌，作為陰性對照一組，取未加過敏原也不作洗滌的試驗樣塊作為陰性對照二組。按照與試驗組相同的方式回收并檢測過敏原。陰性對照的過敏原濃度不得高于試驗的最低檢出限。

3.4 計算公式

式中：

Kg—過敏原去除率，單位為（%）；

G0—對照組過敏原濃度，單位為（μg/m3）；

G1—試驗組過敏原濃度，單位為（μg/m3）。

3.5 結果分析

通過選擇10 臺商家宣傳具有除過敏原效果的洗衣機，采用屋塵螨變應原（Der P1），通過酶聯免疫分析方法進行過敏原去除率試驗探究所得結果。

表1所示的是第一臺洗衣機在采用酶聯免疫分析方法，采用屋塵螨過敏原時，屋塵螨過敏原標準物濃度所對應的吸光度值（OD），根據其得出兩者之間的線性關系，如圖1。

表2是洗衣機在除過敏程序下，對照組、試驗組的吸光度值和所對應的過敏原濃度，所測得該洗衣機在除過敏程序下的屋塵螨過敏原去除率達到95.19 %。

表1 洗衣機屋塵螨過敏原標準物濃度與吸光度值（OD）

圖1 洗衣機屋塵螨過敏原吸光度（OD）值與標準物濃度標準曲線

表2 洗衣機屋塵螨過敏原去除率試驗結果

表3 通過酶聯免疫分析方法對10 臺洗衣機不同程序進行過敏原去除率試驗結果

通過一系列的試驗探索，這10 臺洗衣機在不同工作原理的程序作用下，對屋塵螨的過敏原的去除作用效果差別也非常大。第一臺到第十臺的洗衣機采用的測試程序分別為除過敏、蒸汽消毒洗、蒸汽洗、標準洗、銀離子、空氣洗、強力洗、高溫洗、防過敏、標準洗，表3中，所選10 臺洗衣機程序的工作原理包括高溫漂洗、銀離子、巴氏低溫、臭氧等等。這10臺洗衣機對應程序所測得的屋塵螨過敏原去除率分別為95.19 %、98.86 %、98.74 %、82.34 %、92.10 %、90.61 %、79.64 %、97.77 %、96.41 %、77.28 %。其中，過敏原去除率達到90 %的洗衣機有6 臺，另外4 臺洗衣機的過敏原去除率相對較低。由此可見，目前市場上宣傳的具有除過敏原功能的洗衣機，除過敏原的作用效果參差不齊，體現出目前市場上所推出的除過敏原洗衣機所運用的技術原理還未成熟。

其中對居家塵螨過敏原去除率效果較好的洗衣機中，主要工作原理為高溫漂洗，在高溫的作用下，可以有效的去除生活中所存在和殘留的過敏原，有效的減少衣物上所殘留的多種過敏原，從而降低許多過敏原對我們身體的危害。但高溫漂洗的同時會對許多衣物或其他紡織品帶來不同程度的損傷，影響人們日后的使用。

4 結語

目前市場上具有除過敏原的洗衣機還相對較少，但是隨著科技的不斷發展，會有越來越多的能有效去除各種過敏原的洗衣機出現。如何在原有作用和功能的基礎上，讓洗衣機能夠更加有效的去除塵螨以及其他多種過敏原，同時減少高溫對衣物和其他紡織品所帶來的損害，也是未來洗衣機行業發展的一個技術難點；檢測機構和監管部門也應該制定出除過敏原的有關標準，完善對具有除過敏原作用的檢驗檢測，更快更全面的提升企業產品質量，進一步的提高消費者的健康生活水平。