宮頸癌患者血清SCC-Ag、Tim-4、PD-L1水平與預后的相關性分析

宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤，早期常無癥狀和體征，隨著病情的發展可發生陰道流血、排液[1]。近年來，宮頸癌的發病率逐漸上升，并有年輕化的趨勢，嚴重威脅患者的生命安全。臨床已發現多種與宮頸癌相關的生物學指標，但發病機制仍不清楚，故尋找新的與宮頸癌發生發展及預后相關的生物學指標具有重要意義[2]。血清鱗狀細胞癌抗原（SCC-Ag）是鱗癌細胞產生的特異抗原，與腫瘤分級、大小及侵襲程度和淋巴結轉移相關[3]。T細胞免疫球蛋白黏蛋白分子4（Tim-4）是具有共同基序的跨膜糖蛋白，參與多種免疫性疾病的發生發展，其表達強度與腫瘤分化程度有關[4]?？扇艹绦蛐运劳龇肿?（PD-L1）信號通路是近年來醫學免疫學研究熱點，其主要通過抑制T細胞活化與增殖和細胞因子分泌負性調控T細胞免疫應答，在腫瘤免疫逃逸和耐受中具有重要作用[5]。臨床關于血清SCCAg、Tim-4、PD-L1水平與腫瘤預后關系的相關報道較少，本研究分析血清SCC-Ag、Tim-4、PD-L1水平與腫瘤預后的關系，旨在為臨床診斷和治療提供參考，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料回顧性分析2012年1月～2015年1月我院收治的60例宮頸癌患者的臨床資料。納入標準：①均經病理學證實，符合國際婦產科聯合會（FIGO）分類標準和WHO分級標準[6]者；②年齡30～75歲；③術前未行化療、放療或激素治療。排除標準：①嚴重肝腎功能不全者；②合并自身免疫系統疾病及其他惡性腫瘤者；③臨床資料不完整者。選取50例宮頸上皮內瘤病變（CIN）患者作為CIN組，同時選取同期于我院進行體檢的40例健康者作為對照組。宮頸癌組：年齡31～75歲，平均（47.26±5.33）歲；臨床分期：Ⅰb期28例，Ⅱa期12例，Ⅱb期20例；病理類型：鱗狀細胞癌41例，腺癌19例。CIN組：年齡30～75歲，平均（48.31±5.37）歲。對照組：年齡30～73歲，平均（46.95±5.30）歲。三組患者一般資料比較差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 臨床資料 記錄患者年齡、臨床分期、病理類型、腫瘤直徑、病理分級、浸潤深度、淋巴結轉移及脈管浸潤情況。

1.2.2 SCC-Ag、Tim-4、PD-L1水平測定 取晨起空腹靜脈血3ml，保存于EDTA 抗凝管中，在3 000r/min下離心15min，沉淀細胞，分離上清液后采用全自動電化學發光免疫分析儀（羅氏Cobas e601型）測定血清SCC-Ag、Tim-4、PD-L1水平。

1.2.3 宮頸癌患者隨訪 采用電話、門診等方式對患者進行至少5年的隨訪，起始時間為確診時間，5年生存隨訪截至2020年1月，總生存隨訪截至2020年4月，隨訪過程中2例失訪，隨訪率為96.67%，中位隨訪時間為（30.14±2.88）個月，記錄患者5年生存率和總生存率。

1.3 觀察指標①對比宮頸癌組、CIN組及對照組血清SCC-Ag、Tim-4、PD-L1水平；②對比不同年齡、病理類型、腫瘤直徑、臨床分期、病理分級、浸潤深度、淋巴結轉移及脈管浸潤患者的血清SCC-Ag、Tim-4、PD-L1水平。

1.4 統計學方法采用SPSS 20.0 軟件分析數據，計量資料以±s表示，行單因素方差分析及LSD-t 檢驗，多組比較采用F檢驗，多因素采用COX回歸分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組血清SCC-Ag、Tim-4、PD-L1水平比較宮頸癌組血清SCC-Ag、Tim-4、PD-L1水平均顯著高于CIN組和對照組（P＜0.05），CIN組血清PD-L1水平高于對照組，兩組血清SCC-Ag、Tim-4水平比較差異無統計學意義（P＞0.05），見表1。

表1 三組血清SCC-Ag、Tim-4、PD-L1水平比較（±s）

表1 三組血清SCC-Ag、Tim-4、PD-L1水平比較（±s）

注：與宮頸癌組比較，#P＜0.05；與對照組比較，*P＜0.05

組別 n SCC-Ag（ng/ml）Tim-4（ng/ml）PD-L1（%）宮頸癌組 60 9.05±3.26 18.69±9.10 9.91±3.55 CIN組 50 1.92±0.65# 15.61±7.12# 6.21±2.03#*對照組 40 0.64±0.20# 14.26±6.15# 3.80±1.24#F 245.671 3.924 69.342 P 0.000 0.022 0.000

2.2 宮頸癌患者血清SCC-Ag、Tim-4、PD-L1水平與臨床病理特征的關系SCC-Ag、Tim-4、PD-L1水平與臨床分期、病理分級、浸潤深度、淋巴結轉移及脈管浸潤相關，差異具有統計學意義（P＜0.05）；與年齡、病理類型、腫瘤直徑無關，差異無統計學意義（P＞0.05），見表2。

表2 宮頸癌患者血清SCC-Ag、Tim-4、PD-L1水平與臨床病理特征的關系（±s）

表2 宮頸癌患者血清SCC-Ag、Tim-4、PD-L1水平與臨床病理特征的關系（±s）

項目 n SCC-Ag（ng/ml） Tim-4（ng/ml） PD-L1（%）均數±標準差 t P 均數±標準差 t P 均數±標準差 t P年齡（歲） 0.396 0.964 0.914 0.365 1.940 0.057≤45 24 8.91±2.26 17.56±4.60 9.65±3.30＞45 36 9.15±2.33 18.76±5.22 8.14±2.70臨床分期 4.252 0.000 2.835 0.006 3.898 0.000Ⅰb 22 7.65±2.08 15.16±4.23 9.59±3.27Ⅱa+Ⅱb 38 11.44±3.86 18.87±6.37 7.04±1.81病理類型 0.424 0.673 0.501 0.618 1.506 0.138鱗狀細胞癌 41 9.13±2.40 18.17±5.62 9.31±3.24腺癌 19 8.85±2.34 17.45±4.01 7.98±3.05病理分級 7.669 0.000 2.617 0.013 4.026 0.000 G1+G2 39 7.33±1.26 15.64±3.34 6.87±2.26 G3 21 12.29±3.68 18.77±5.92 9.83±3.42腫瘤直徑（cm） 0.802 0.426 0.793 0.431 1.575 0.121≤5 32 8.74±2.30 17.09±5.04 8.05±3.04＞5 28 9.28±2.91 18.14±5.20 9.28±3.15浸潤深度 4.804 0.000 2.272 0.027 3.635 0.001≤1/2肌層 20 7.63±2.44 15.22±3.39 7.04±1.66＞1/2肌層 40 12.33±4.01 18.85±6.71 9.78±3.50淋巴結轉移 5.714 0.000 2.350 0.022 3.684 0.001是12 12.53±4.10 18.51±6.44 9.92±3.61否48 7.40±2.19 15.30±3.52 7.11±1.96脈管浸潤 4.984 0.000 2.601 0.012 2.444 0.018是17 12.43±4.05 18.57±6.32 9.24±3.05否43 8.04±2.61 15.26±3.47 8.19±2.88

2.3 影響宮頸癌預后的單因素分析單因素分析顯示，臨床分期、病理分級、浸潤深度、淋巴結轉移、SCC-Ag、Tim-4及PD-L1 與宮頸癌患者預后不良有關，差異有統計學意義（P＜0.05），見表3。

2.4 影響宮頸癌預后的多因素分析將單因素分析中有統計學意義的影響因素設為變量進行賦值（病理分期Ⅱa+Ⅱb=1、Ⅰb期=0；病理分級G3=1、G1+G2=0；浸潤深度＞1/2肌層=1，≤1/2肌層=0；有淋巴結轉移=1，無淋巴結轉移=0；SCC-Ag＞2ng/ml、Tim-4＞5ng/ml、PD-L1＞1%賦值為1，SCC-Ag≤2ng/ml、Tim-4≤5ng/ml、PD-L1≤1%賦值為0。COX回歸分析顯示，臨床分期、病理分級、浸潤深度、淋巴結轉移、SCC-Ag、Tim-4及PD-L1為宮頸癌患者預后不良的獨立危險因素（P＜0.05），見表4。

表3 影響宮頸癌預后的單因素分析[n（%）]

續表3

表4 影響宮頸癌預后的多因素分析

3 討論

近年來，我國宮頸癌發病率呈逐漸上升趨勢，且趨向年輕化。相關報道顯示，我國每年新發病例約13萬，占全世界宮頸癌新發病例的28%，且我國每年死于宮頸癌的患者約5萬，嚴重威脅女性生命安全，故宮頸癌早期篩查對早發現、早治療及預后具有重要意義[7，8]。

宮頸涂片和活檢是早期檢測宮頸癌的重要措施，而腫瘤標志物的檢測在早發現及預測腫瘤預后中具有重要意義。SCC-Ag是診斷宮頸癌的敏感指標，其是分子量為42 000～48 000 的糖蛋白，由機體鱗癌細胞合成和分泌，參與細胞凋亡調控，主要存在于子宮、子宮頸等鱗狀上皮細胞癌的細胞質內，當鱗狀細胞癌變時其基因表達和調控異常，蛋白質合成紊亂，從而導致SCC-Ag 基因活化，大量合成并分泌入血，故SCC-Ag 呈高表達[9]。Tim 主要定位于染色體5q33.2 上，該染色體區域與自身免疫性疾病相關。Tim-4 基因是近年來發現的Tim家族成員，是新型免疫調節分子，主要表達于巨噬細胞等抗原提呈細胞中，特別是成熟巨噬細胞和樹突狀細胞表面。Tim-4 分子由378個氨基酸組成，在T細胞增殖和存活方面發揮重要作用。協同共刺激是近年來免疫學研究的熱點，主要來自于免疫細胞表面分子的調節表達及其信號傳導，在T細胞活化過程中具有重要作用[10]。研究發現，Tim-4 包含獨特的Tim家族成員所缺少的Arg-Gly-Asp 序列，表面Tim-4表達可能與細胞遷移和黏附有關[11]。免疫球蛋白為協同刺激分子主要家族，包括B7-1/CD28 和CTLA 等，可通過刺激信號在免疫應答中調節應答持續時間和程度，以達到T細胞活化的調節平衡。PD-L1是協同抑制因子，屬于B7/CD28 超家族成員，其表達于活化T細胞、B 細胞、單核細胞等多種細胞，可介導T細胞抑制信號，減弱機體抗腫瘤免疫反應，使腫瘤發生免疫逃逸并促進惡性腫瘤的發生、發展，阻斷PD-L1 結合可加強并維持內源性抗腫瘤效應，進而控制腫瘤[12，13]。同時相關報道顯示，宮頸癌患者血清SCC-Ag 水平高于CIN 患者[14]。本研究結果顯示，宮頸癌組血清SCC-Ag、Tim-4、PD-L1水平均顯著高于CIN組和對照組，提示血清SCC-Ag、Tim-4、PD-L1水平可作為早期鑒別宮頸癌和CIN 的有效指標，且CIN組血清PD-L1水平高于對照組，提示血清PD-L1水平可作為早期篩查CIN 的指標，但CIN組和對照組血清SCC-Ag、Tim-4水平比較差異無統計學意義，分析其原因可能與納入病例數較少有關。

本研究進一步分析了血清SCC-Ag、Tim-4、PD-L1水平與臨床病理特征的關系。結果顯示，Ⅱa、Ⅱb分期、病理G3分期、浸潤深度＞1/2肌層、淋巴結轉移及脈管浸潤的宮頸癌患者血清SCC-Ag、Tim-4、PD-L1水平增高，說明SCC-Ag、Tim-4、PD-L1 參與宮頸癌的發生、發展，可能與腫瘤淋巴結轉移有關。腫瘤的發生發展是多因素和基因共同作用的過程，而腫瘤細胞的侵襲和轉移是影響腫瘤發生、發展的重要因素。既往研究表明，淋巴結轉移是宮頸癌預后影響因子，無淋巴結轉移的宮頸癌患者5年生存率高達90%，而淋巴結轉移患者5年生存率為65%[15]。經COX回歸分析顯示，臨床分期、病理分級、浸潤深度、淋巴結轉移、SCC-Ag、Tim-4及PD-L1為宮頸癌患者預后不良的獨立危險因素，宮頸癌預后不良患者血清SCC-Ag、Tim-4、PD-L1水平升高，對診斷、病情監測和療效判斷具有一定的臨床價值。由于高表達的SCC-Ag、Tim-4及PD-L1與受體相互作用后抑制腫瘤抗原特異性T淋巴細胞增殖和活化，進而誘導并維持T淋巴細胞對宮頸癌細胞免疫耐受，從而使癌細胞逃避機體免疫殺傷，得不到有效控制，致使增長甚至轉移，故導致宮頸癌患者預后較差[16，17]。

綜上所述，臨床分期、病理分級、浸潤深度、淋巴結轉移、SCC-Ag、Tim-4及PD-L1 陽性表達是宮頸癌預后不良的危險因素，故監測血清SCC-Ag、Tim-4及PD-L1水平有利于判斷患者預后，為治療提供參考。但本研究納入例數較少，對結果產生一定影響，下一步將擴大樣本量并延長隨訪時間，進行前瞻性研究。