丁酸梭菌對育成期水貂抗氧化及免疫功能的影響

蔡言妮， 劉忠軍， 鞠貴春， 衛功慶， 張愛武， 關軒承， 云祥鴻， 吳 旻

（吉林農業大學動物科學技術學院，吉林長春 130118）

水貂作為一種經濟價值極高的毛皮動物，以其毛絨豐富、保暖效果好等優點深受人們喜愛。貂皮是世界裘皮業支柱之一，被美譽為“軟黃金”（高秀華，2014）。與其他單胃動物相比，水貂胃容積較小，消化道較短，沒有盲腸，食物在消化道中停留的時間較短（黃永凱，2005）。丁酸梭菌能夠在動物腸道內產生B族維生素、維生素K、淀粉酶等多種物質，具有促進消化、改善動物腸道菌群平衡等多種生物學功能（趙敏孟，2018）。本研究以水貂作為試驗動物，研究丁酸梭菌對其生長性能及免疫機能的影響，以期為研究丁酸梭菌的作用機制提供理論基礎，并為丁酸梭菌在水貂養殖中的應用提供實踐依據。

1 材料與方法

1.1 試驗動物及日糧 將40只（60±5）日齡，體重相近[（1.08±0.05）kg]的健康雄性紅眼白貂，隨機分為4組，每組水貂數為10只。其中I組為對照組，飼喂水貂基礎日糧，II、III、IV組為試驗組，分別飼喂添加 0.5×108、1×108、2×108cfu/g 丁酸梭菌的水貂基礎日糧。各組水貂均單籠單只飼養，試驗期為35 d，試驗期間定時等量飼喂，自由飲水。

1.2 試驗材料 丁酸梭菌購自河南金百合生物科技有限公司 （1×1010cfu/g），T-SOD、CAT、MDA檢測試劑盒均購自南京建成生物工程研究所，IgA檢測試劑盒購自上海朗頓生物技術有限公司。

1.3 測定指標及方法

1.3.1 生長性能 試驗開始時稱取每只水貂初始體重，試驗結束后稱取每只水貂末重，計算每組水貂體重變化及平均日增重。

1.3.2 營養物質消化吸收水平 試驗開始第31天開始，采用全收糞法收集5 d的糞便，并每天收集剩余料量，將每只水貂收集的全部糞樣和剩料混勻后，各取20 g經10%的硫酸處理后，在65℃下烘干，粉碎過40目篩后測定各組水貂粗蛋白質和粗脂肪的消化率。

1.3.3 血清樣本采集 試驗結束后對水貂進行空腹采血，采血方法為使用戊巴比妥鈉麻醉后斷趾采血，血液收集完畢后止血，消毒傷口避免感染。所得血液使用3000 r/min離心10 min，收集血清進行抗氧化及免疫水平指標的測定。

1.3.4 血清抗氧化水平檢測 各組水貂血清抗氧化水平均使用試劑盒法測定，其中丙二醛（MDA）的含量采用硫代巴比妥酸（TBA）法測定，總超氧化物歧化酶 （T-SOD）活性采用黃嘌呤氧化酶法（羥胺法）測定，過氧化氫酶（CAT）活性采用鉬酸銨法測定。

1.3.5 血清IgA含量的測定 水貂血液IgA含量使用ELISA方法進行測定。

1.4 數據統計 所有試驗數據均在Excel進行初步處理，采用統計學軟件SPSS 17.0中的one-way ANOVA過程進行單因素方差分析，并使用GraphPad prism 6制圖。所有數據均以“平均值±標準差”表示，其中P＜0.05表示具有差異顯著性。

2 結果與分析

2.1 丁酸梭菌對水貂生長性能的影響 丁酸梭菌對雄性紅眼白貂生長性能的影響見表1。III、IV組水貂平均日增重較I組相比分別提高了22.4%、28.4%（P ＜ 0.05），II組與 I組相比差異不顯著（P＞0.05）。說明飼料中添加丁酸梭菌能夠提高水貂生長性能。

表1 丁酸梭菌對水貂生長性能的影響

2.2 丁酸梭菌對水貂營養物質表觀消化率的影響 丁酸梭菌對水貂飼糧中粗蛋白質、粗脂肪消化率的影響見表 2。與 I組相比，II、III、IV 水貂粗脂肪消化率分別提高了17.2%、17.3%、15.4%（P＜0.05）。各組粗蛋白質消化率與I組相比差異不顯著。說明飼料中添加丁酸梭菌能夠提高水貂脂肪消化率，對蛋白質消化率無顯著影響。

表2 丁酸梭菌對水貂粗蛋白質、粗脂肪消化率的影響%

2.3 丁酸梭菌對水貂血清抗氧化性指標的影響由圖 1可知，與 I組相比，II、III、IV水貂血清MDA含量分別降低了40.2%、49.4%、51.7%，均顯著低于對照組（P＜0.05）。由圖2可知，與對照組相比，Ⅱ組水貂血清中T-SOD活性顯著升高（P＜0.05），提高了25.3%。Ⅲ、Ⅳ組與對照組相比無明顯差異（P ＞ 0.05）。 與 I組相比，II、III、IV 水貂血清中CAT活性分別提高86.9%、36.6%、36.9%（P＜0.05）。說明飼料中添加丁酸梭菌能夠增強水貂的抗氧化性能。

2.4 丁酸梭菌對水貂血清免疫指標的影響 由圖 3可知，與 I組相比，II、III、IV 水貂血清 IgA 含量分別提高了 136.1%、383.3%、125.0%（P＜0.05），其中Ⅲ組血清中IgA含量最高。說明日糧中添加丁酸梭菌后可以提高水貂血清IgA的含量。

3 討論

3.1 丁酸梭菌對水貂生長性能的影響 丁酸梭菌能夠提高多種家畜家禽以及水產動物的生長性能。楊玲（2018）等研究表明，斷奶仔豬飼糧中添加含有丁酸梭菌的復合益生菌能夠顯著提高仔豬的生長性能。劉亭婷（2012）等研究表明，蛋用仔公雞飼料中添加1000 mg/kg的丁酸梭菌能夠顯著提高平均體重和平均日增重。賈志新（2014）研究表明，櫻桃谷肉鴨飼料中添加丁酸梭菌能夠促進其前期生長，提高平均日增重。動物飼料中添加適量的丁酸梭菌能促進其生長，原因可能是丁酸梭菌在胃腸道內分泌的一些丁酸代謝產物能夠使胃腸道的一些消化酶活性增強，從而促進動物對營養物質的消化利用，對家畜生長起促進作用。本研究結果顯示，丁酸梭菌能夠提高水貂平均日增重，與楊玲（2018）等研究結果相似。

3.2 丁酸梭菌對水貂營養物質消化率的影響丁酸梭菌能夠分泌多種酶類，對動物胃腸道內源性消化系統起輔助作用，能夠提高多種動物腸道消化機能。袁文華（2018）等研究表明，肉鴿飼料中添加 5×109cfu/kg乳酸菌和 1×108cfu/kg丁酸梭菌能夠顯著提高其十二指腸內蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性，促進肉鴿對蛋白質、脂肪和淀粉的消化吸收。史煥（2016）研究表明，育成豬飼料中添加丁酸梭菌能夠提高飼料消化性能，降低料重比，提高經濟效益。本研究結果表明，丁酸梭菌能夠提高水貂脂肪消化率，與袁文華（2018）等研究結果相似。

3.3 丁酸梭菌對水貂血清抗氧化性指標的影響丁酸梭菌具有提高動物抗氧化能力的作用。黃靈（2017）研究表明，虎龍斑幼魚飼料中添加含有丁酸梭菌的復合益生菌能夠提高其血清SOD活性。耿正穎（2018）等研究表明，斷奶仔豬飼料中添加丁酸梭菌能夠顯著增加血清T-SOD含量，說明日糧中添加丁酸梭菌可以提高斷奶仔豬抗氧化能力。李文茜等研究表明斷奶期犢牛飼糧中添加2.0×108cfu/kg丁酸梭菌能夠降低血清 MDA的含量，有效緩解犢牛的斷奶應激。本試驗在水貂日糧中添加丁酸梭菌能夠顯著提高水貂血清SOD及CAT活性，顯著降低血清MDA含量，與黃靈（2017）等研究結果相似。

3.4 丁酸梭菌對水貂血清免疫指標的影響 丁酸梭菌能夠通過改善腸道結構和屏障功能，提升動物機體免疫能力（林華林，2019）。劉磊（2018）等研究表明，獺兔日糧中添加丁酸梭菌能夠調節腸道微生態平衡，促進緊密連接蛋白表達，從而增強其機體免疫力。鄭有秀（2018）等研究表明，飼料中添加丁酸梭菌能夠改善斷奶仔豬腸道形態，顯著提高其血清中IgA、IgG濃度，從而減輕仔豬的斷奶應激反應。本研究結果表明，丁酸梭菌能夠顯著提高水貂血清IgA含量，提高水貂的免疫力。

4 結論

本試驗結果表明，日糧中添加不同水平丁酸梭菌均能提高水貂平均日增重、脂肪消化率、血清中IgA的含量及抗氧化酶活性，均能顯著降低水貂血清MDA水平。說明飼料中添加丁酸梭菌能夠提高水貂生長性能、抗氧化及免疫功能。本試驗條件下，以0.5×108cfu/g丁酸梭菌添加劑量效果最佳。