交叉反應性糖類抗原決定簇抗IgE在過敏性疾病中的應用分析*

莫燕芳，高如秀，蔡健梅，申學基，陳雄毅

肇慶市第一人民醫院檢驗科，廣東 肇慶 526060

交叉反應性碳水化合物決定簇（CCD）是許多植物和昆蟲物種細胞表面分子共有的糖基修飾部分，而哺乳動物會識別CCD為外源抗原，可產生針對它們的體液免疫應答［1］。對草和毒液過敏人群中大約20%～37%具有抗CCD的循環IgE，這些抗體通常被認為與臨床過敏癥狀無關，但由于這些共有的糖基抗原表位會造成交叉反應，anti-CCD IgE被認為是導致臨床檢測sIgE假陽性、與臨床不一致的血清變應原試驗結果的重要原因［1-2］。故本研究將對肇慶市第一人民醫院4 568例患者血清anti-CCD IgE與不同年齡段、性別、臨床診斷、過敏性疾病等進行相關性分析，旨在探索血清anti-CCDIgE對臨床診斷過敏性疾病的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

搜集2016年8月—2019年3月來肇慶市第一人民醫院就診的患者4 568例，其中女性患者2 094例，男性患者2 474例，年齡范圍是1個月～86歲，平均年齡22.96歲，按年齡大小來分組，其中兒童組（0～6歲）1 692例，少年組（7～17歲）737例，青年組（18～40歲）878例，中年組（41～59歲）422例，老年組（60歲以上）110例。按臨床診斷分鼻咽炎708例，支氣管炎579例，濕疹、蕁麻疹1 885例，胃腸炎467例。

1.2 方法

（1）試劑、儀器、過敏原種類。試劑：包被過敏原的檢測膜條（歐蒙醫學實驗診斷股份公司，吸入性及食物性過敏原特異性IgE抗體檢測試劑盒）、酶結合物、通用緩沖液、底物液；儀器：特定的溫育盤（ZD 9897-0130）、歐蒙印跡法自動操作儀(EURO BlotMaster)；過敏原種類：霉菌組合1（點青霉/分枝孢霉/煙曲霉/交鏈孢霉）ms1、樹組合2（柳樹/楊樹/榆樹）ts20、淡水魚組合1（鮭魚/鱸魚/鯉魚）fs34、羊肉f88、海魚組合1（鱈魚/龍蝦/扇貝）fs33、普通豚草w1、艾蒿w6、塵螨組合1（屋塵螨/粉塵螨）ds1、黃豆f14、屋塵h1、雞蛋白f1、貓毛e1、狗上皮e2、蟑螂i6、葎草u80、蟹f23、牛奶f2、花生f13、牛肉f27、蝦f24、交叉反應性糖類決定簇（CCD）。（2）過敏原檢測步驟。由護士采集患者手臂靜脈血4 m l于含分離膠的灰蓋管，分離血清置于2～8℃可保存14天。嚴格按照過敏原特異性IgE抗體檢測試劑盒（歐蒙印跡法）說明書進行，由歐蒙印跡法自動操作儀(EUROBlotMaster)進行檢測，檢測完成后取出膜條進行風干掃描。（3）結果判斷。軟件判斷結果請參見EUROLineScan的操作指南，條帶顏色的深淺用EAST類別0～6表示，酶過敏原吸附試驗（Enzyme-Allergen-Sorbent Test,EAST）采用的濃度等級等同于過敏原診斷公認的RAST（放射過敏原吸附）系統。anti-CCD IgE陽性分級綜合考慮患者的臨床癥狀，見表1。

1.3 統計學方法

建立2016年8月—2019年3月期間就診患者血清anti-CCD IgE陽性人數的數據庫并分類統計，應用SPSS 19.0統計分析軟件對數據進一步處理分析。血清an

ti-CCD IgE陽性分布特點主要用頻數分布和百分率表示；組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清anti-CCD IgE陽性級別的差異性分析

收集病例4 568例，其中血清anti-CCD IgE陽性有335例，陽性率是7.33%。按表1分級標準：1級249例，占74.33%，2級39例，占11.64%，3級23例，占6.87%，4級15例，占4.48%，5級8例，占2.39%，6級1例，占0.30%。采用SPSS 19.0軟件對數據進行統計分析，各陽性級別所占的比例之間差異有統計學意義（χ2=980.851，P＜0.05）。

2.2 血清sIgE陽性的項目數目和血清anti-CCD IgE的關系

anti-CCD IgE陽性的患者中，各變應原的血清sIgE陽性的項目數目為0的有33例，血清sIgE陽性的項目數目為1的有37例，血清sIgE陽性的項目數目為2～5的有128例，血清sIgE陽性的項目數目＞5的有137例，見圖1。

圖1血清s IgE陽性的項目數目和血清anti-CCD IgE的關系

2.3 性別和年齡分組患者血清anti-CCD IgE陽性率比較

女性anti-CCD IgE陽性率是74.64%，男性anti-CCD IgE陽性率是72.35%，兩組間比較差異無統計學意義，而不同年齡間anti-CCD IgE陽性率比較差異有統計學意義，中老年組患者陽性率最高為13.03%，見表2。

2.4 sIgE檢測的總體情況

anti-CCD IgE陽性中各變應原的陽性率最高的是塵螨組合1 ds1（屋塵螨/粉塵螨）（52.84%）、其次是蟑螂i6(50.45%)、普通豚草w1（41.79%）、蟹f23(41.79%)，見表3。

2.5 血清anti-CCD IgE陽性患者的吸入和食物性過敏原sIgE的陽性分布

anti-CCD IgE陽性患者中，食物性過敏原sIgE陽性99例，陽性率為29.56%，吸入性過敏原sIgE陽性56例，陽性率為16.71%，食物性和吸入性過敏原sIgE均為陽性有

表1 anti-CCD IgE陽性級別分類

表2 性別、年齡分組患者血清anti-CCD IgE陽性率比較

表3 血清anti-CCD IgE陽性患者中各過敏原陽性比較

2.6 主要過敏性疾病中血清anti-CCD IgE陽性率分析

4 568例就診患者中除去沒有明確過敏性疾病類型和其他少數類型共有3 618例，其中最高的是皮炎、蕁麻疹濕疹患者，陽性率為9.00%；各主要過敏性疾病中血清anti-CCD IgE陽性率之間比較，差異有統計學意義（χ2=85.484，P＜0.05），見表4。

表4 主要過敏性疾病中血清anti-CCD IgE陽性率情況

3 討論

本組實驗4 568例患者中有335例血清anti-CCD IgE陽性，陽性率是7.33%，表明大多數人的血清anti-CCD IgE為極低抗體滴度，但在變態反應病人群中處于較高流行率。經過上述統計，在anti-CCD IgE陽性患者中，兩項及兩項以上變應原呈陽性反應的有79.10%，隨sIgE陽性項目數增加，anti-CCDIgE陽性率有增高趨勢，即多種變應原陽性時，anti-CCDIgE抗體對sIgE檢測的干擾的可能性就越大。所以臨床上遇到多項sIgE陽性時除了考慮一是患者可能是易過敏體質，本身對多種變應原過敏；二是在過敏性疾病中，某些炎癥因子和變應原相關分子表達過于活躍［3］，還要考慮交叉反應的影響。

本研究結果顯示，女性患者anti-CCD IgE陽性率稍高于男性患者，但是不同性別陽性率之間沒有差異。另外，不同年齡間anti-CCD IgE陽性率間差異有統計學意義，中老年組患者陽性率最高為13.03%，但總體而言，隨著年齡的增加，anti-CCD IgE陽性率呈上升的趨勢，故對于臨床上有過敏性癥狀的患者，在評估變應原時，特別是中年人群，應該多加考慮anti-CCD IgE的影響。但有些文獻表示不同性別anti-CCD IgE陽性率之間有差異［2-4］，認為在臨床診斷女性患者過敏原時應該充分考慮anti-CCD IgE對診斷的影響，筆者猜測可能是所采集的資料中男女比例和年齡組有差別，研究的方法不同、地域區別等從而導致統計學結果有差異。

以上分析顯示，在anti-CCD IgE陽性中吸入性過敏原最高的為塵螨組合1（屋塵螨/粉塵螨）為52.84%，其次是蟑螂50.45%和普通豚草41.79%；食物性過敏原最高的是蟹41.79%，其次是花生34.63%和黃豆33.13%，但國內有關報道顯示anti-CCDIgE表達情況與大部分變應原(混合樹木、葎草、艾蒿、戶塵、混合塵螨、混合 霉菌、蟑螂、狗毛、貓毛)無關聯性，國外亦尚未見anti-CCDIgE表達情況與某種變應原sIgE明顯相關的報道，說明anti-CCDIgE可能與臨床引起過敏的變應原關系不大［5］。應該與接觸變應原的頻率有關，根據所調查的不同年齡階段分布情況，兒童組就診人數最高，所占比例為37.03%，兒童的免疫力相對較低，接觸到粉塵螨容易過敏［6］；我國大部分地區過敏性疾病的主要變應原是屋塵螨/粉塵螨，另外，目前隨著人們飲食習慣改變，雞蛋、蟹等高蛋白含量的食物，也逐漸成為了主要的致敏原［7］。

anti-CCDIgE可能不僅存在于吸入性變應原中，也可能存在于食物性變應原中,anti-CCDIgE抗體親和力較小、易解離，一般不引起相應的過敏癥狀［8］。anti-CCDIgE陽性患者中，食物性sIgE陽性率為29.56%，吸入性sIgE陽性率為16.71%，食物性與吸入性均為陽性的陽性率為53.73%。結果顯示anti-CCDIgE對食物性sIgE造成的交叉反應影響更大一些。anti-CCD IgE陽性患者中，過敏性疾病以濕疹、蕁麻疹占比例最高為9.00%，其次是胃腸炎8.15%和鼻咽炎8.05%。有研究報道，anti-CCDIgE陽性表達率最高的是被蜜蜂叮咬的患者，特別是被蜜蜂和黃蜂一起叮咬的患者［9-10］，本文未能分析anti-CCDIgE與具體類別的過敏性疾病的相關性，有待進一步研究。

綜上所述，變態反應機制復雜，反應類型多，過敏性疾病以I型變態反應為主，在臨床診斷過敏性疾病主要手段是結合臨床癥狀和血清特異性IgE的檢測［11］，但是由于CCD會誘導機體產生低水平的anti-CCD IgE，與多種變應原發生交叉反應，容易導致血清特異性IgE檢測結果假陽性，特別是在sIgE陽性與臨床癥狀不相符的時候，對此我們需要充分考慮到anti-CCD IgE的影響。anti-CCD IgE抗體的引入能更準確地為臨床診斷過敏性疾病提供依據，實驗過程中遇到anti-CCD IgE陽性的結果，必要時可以使用吸附劑預處理，從而等到更準確的結果。