葡萄籽原花青素提取物對鯉血清生化指標的影響

賈申宗， 陳延娜， 林夢君， 馮世坤， 盧榮華， 聶國興

（河南師范大學水產學院， 河南 新鄉453007）

近年來，在我國水產養殖業集約化迅猛發展的同時，養殖魚類出現脂質過度蓄積和免疫力下降的狀況卻不斷增加。葡萄籽原花青素提取物（Grape seed proanthocyanidins extract，GSPE）是從葡萄籽中提取的一類多酚類化合物[1]，已有研究發現GSPE能夠調節脂質代謝[2-4]；在斑馬魚[5]、金魚[6]、吉富羅非魚[7]、龍膽石斑魚[8]、湘江金鯽[9]和星洲紅魚[10]等魚類中的研究也發現，在飼料中適量添加GSPE可有效降低餌料系數，減輕肝臟脂質的蓄積，并提高機體免疫力和抗氧化能力，從而促進魚體健康生長。本試驗通過灌喂的方式將葡萄籽原花青素短時間作用于鯉，檢測鯉血清生化指標的變化，探討短時間內葡萄籽原花青素對鯉脂代謝等的作用，為GSPE在魚類上的進一步開發利用提供理論依據。

1 試驗材料與方法

1.1 試驗用魚

試驗所用鯉為河南師范大學水產學院實訓養殖基地提供，挑選其中體格健壯、生長良好的試驗用魚80尾，初始體質量為100 g±1.26 g。

1.2 試驗試劑

葡萄籽原花青素提取物（GSPE）由天津市尖峰天然產物研究開發有限公司饋贈；0.65%生理鹽水自行配置。

1.3 試驗方法

將試驗魚隨機分為3組，空白對照組、生理鹽水灌喂組和GSPE灌喂組，使用商品飼料暫養一周后進行灌喂試驗，灌喂劑量為250 mg/kg*尾。灌喂過程使用灌胃針從魚口腔進入，緩慢灌喂對應試劑。每個試驗組25條魚，分別進行空白處理、灌喂生理鹽水（2 ml）和GSPE（2 ml）組，分別在灌喂后的0 h、1 h和3 h進行抽血，血液在室溫下靜置2 h后，使用4 ℃離心機以3000 rpm離心15 min，吸取上清至1.5 ml無菌無酶EP管中，做好標記后用全自動生化分析儀檢測各項血清生化指標。

1.4 數據分析

血清生化相關指標檢測包括甘油三酯（TG）、總膽固醇（CHOL）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、葡萄糖（GLU）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、谷丙轉氨酶（ALT）和谷草轉氨酶（AST）。使用Microsoft Excel 2016和SPSS 22.0軟件對各項生化指標均值進行統計和差異顯著性分析（P＜0.05表示差異顯著，P＞0.05表示差異不顯著）。

2 試驗結果

灌喂處理后各時間段的檢測結果如圖1-3所示。

由圖1可知，灌喂GSPE 0 h 時，各項血清生化指標均未出現顯著性差異。

由圖2可知，灌喂GSPE處理1 h后，血清各項生化指標中，與空白對照組、生理鹽水組相比，灌喂GSPE組的甘油三酯水平明顯下降，具有顯著性差異（P＜0.05）；低密度脂蛋白水平明顯降低，具有顯著性差異（P＜0.05）；白蛋白水平和球蛋白水平明顯上升，差異顯著（P＜0.05）。其余指標均未發生顯著性變化。

由圖3可知，灌喂GSPE 3 h后，GSPE組與空白對照組、生理鹽水組相比，低密度脂蛋白水平顯著降低（P＜0.05）；白蛋白水平和球蛋白水平明顯升高，具有顯著性差異（P＜0.05）。其余指標均未發生顯著性變化。

3 討論

血清生化指標可以反映機體的營養水平和健康狀況[11]。以往的研究表明，GSPE可以通過減弱氧化應激的不利影響來保護動物的肝臟健康[12]。本試驗中，與對照組相比，灌喂GSPE組血清中的葡萄糖含量無顯著性變化，白蛋白和球蛋白水平在短期內顯著提高。表明GSPE可能通過提高免疫力，對鯉的機體起到一定的保護作用。這與Nader[13]等發現在日糧中添加葡萄籽可以提高鯉魚免疫指標的結果相似。血清中的谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶是魚類肝臟中脂質代謝的重要酶，通常情況下，它們在體內的含量較低且相對穩定，當肝臟受損后會導致它們的含量升高[14]。有研究顯示，GSPE具有抗氧化和抗應激的功效[15-16]，本試驗中，與對照組相比，灌喂GSPE組血清中谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶含量無顯著性變化，表明GSPE不會對鯉的肝臟造成損傷。血清中總膽固醇和甘油三酯是血液中脂類的主要組成成分，高密度脂蛋白和低密度脂蛋白是魚類脂類代謝中轉運膽固醇的重要物質，二者含量的高低變化可反映肝臟的功能情況[17-18]。本試驗中，與對照組相比，灌喂GSPE組在短期內能顯著降低鯉血清中甘油三酯和低密度脂蛋白含量，這與盧俊姣等[19]研究GSPE對吉富羅非魚血清生化指標的影響結果一致。閆少芳等[20]的研究表明GSPE具有降低血清和肝臟中膽固醇與甘油三酯的功能，也有研究發現原花青素可以通過抑制膽固醇合成關鍵酶的活性，減少低密度脂蛋白在血管中的停留時間來降低小鼠血清中甘油三酯和低密度脂蛋白水平從而促進脂代謝[21-22]。對鯉灌喂GSPE后甘油三酯和低密度脂蛋白指標的變化機制可能與之相似。但黃光中等[23]研究葡萄籽提取物對黃鱔血液生化指標的影響結果與本試驗不同，分析原因可能是由于所用試驗動物的種屬不同，對受試物的反應不同或所用GSPE劑量不同或者施用藥物的方式不同所致，具體原因有待于進一步探索。

4 結論

綜上所述，GSPE可以改善鯉脂代謝，從而保護鯉肝臟健康，是一種安全穩定對機體有益的化合物，對研發魚類綠色、安全的飼料添加劑具有一定的參考價值。關于GSPE調節鯉脂代謝的具體機制，還需要更深入的研究。