甘蔗新品種桂柳05136組培快繁試驗

韋海球，羅晟昇，唐利球，江清梅

（廣西南亞熱帶農業科學研究所/農業部龍州熱帶作物科學觀測綜合實驗站，廣西 崇左 532415）

選育和推廣甘蔗新品種是提高我國甘蔗產量、降低蔗糖生產成本的重要手段［1-2］。目前，我國甘蔗旱坡地栽種面積已占植蔗面積的80%以上。迫切需要推廣種植強宿根抗旱甘蔗新品種，以提高我國甘蔗單產，保證蔗糖產業的穩定可持續發展。甘蔗新品種桂柳05136由桂柳縣甘蔗研究中心選育，品種來源是以CP81-1254為母本，新臺糖22號為父本的雜交后代，2014年4月通過國家作物品種審定委員會（甘蔗）鑒定。2014年6月通過廣西區農作物品種審定會的審定，經試驗和生產表證示范該品種具有強生長勢、早熟、高產、高糖、宿根好、適應性強的優良農藝性狀［3］。

1 材料和方法

1.1 材料

以廣西南亞熱帶農業科學研究所種植的甘蔗品種桂柳05136為試驗材料，取甘蔗莖頂部長約60 cm，帶回實驗室后剝去部分老葉梢，即獲得外植體。

1.2 外植體的處理和愈傷誘導

取甘蔗外植體，用75%酒精輕輕擦拭表面，放入超凈工作臺中。剝去外葉梢至甘蔗幼嫩葉片，置于已滅菌消毒的盤子內切成1 mm薄片，接種于瓶內，每瓶接種10片，放置于28℃的恒溫培養室內進行暗培養。培養基配方為改良MS+（0.5、1、1.5、2、2.5 mg/L）2,4-D+30 g/L糖+8 g/L卡拉膠。觀察記錄愈傷組織的情況。

1．3 分化誘導與增殖培養

將生長良好的愈傷組織隨機接種于分化誘導培養基中，分化培養基以改良MS為基本培養基，設置5個處理，即改良MS+（0.25、0.5、1、2、3 mg/L）6-BA+30 g/L糖+8 g/L卡拉膠，每個處理接種15瓶，每瓶接種10個。光照培養20～25 d，光照14 h，光照度為1500～2000 lx，溫度為28℃，觀察并記錄芽分化的情況。將分化培養獲得的小苗轉接到增殖培養基中，增殖培養基以改良MS為基本培養基，設置5個處理，即改良MS+（0.5、1、2、3、4 mg/L）6-BA+30 g/L糖。將分化出來的甘蔗苗切小至后5～6株一叢，每個組合接種15瓶。光照培養20～25 d后換1次培養基，增殖培養5次，光照14 h。光照度為1500～2000 lx，溫度為28℃，觀察并記錄組培苗增殖的情況。

1．4 生根培養

增殖獲得的甘蔗小苗轉接到生根培養基中，生根培養基以改良MS為基本培養基，設置5個處理，即MS+（3、4、5、6、7 mg/L）NAA+70 g/L糖，將比較大叢的甘蔗組培苗自然分離成較小的叢苗，每個組合中接種14瓶，每瓶接種10株。光照培養20～25 d，光照14 h，光照度為1500～2000 lx，溫度為28 ℃，觀察并記錄生根情況。

2 結果與分析

2.1 2,4-D濃度對愈傷的影響

2,4-D濃度對甘蔗愈傷的生長影響很大，當濃度較低時，愈傷的生長較慢，質地也比較硬；當濃度較高時，愈傷的長勢好，但是愈傷的質量較差，活性不好，難以分化，分化后容易出現變異。由表1可以看出當2,4-D濃度為2 mg/L時愈傷組織長勢好，呈淡黃色，而且質量最好。因此，最適宜桂柳05136愈傷生長的培養基為MS+2 mg/L 2,4-D。

表1 2,4-D濃度對桂柳05136甘蔗愈傷誘導的影響

2.2 6-BA濃度對愈傷組織分化的影響

從表2可以看出，隨著6-BA濃度不斷提高，分化出苗率也隨之提高，當其濃度達到2 mg/L時，出苗率最高，達到75%，隨后出苗率降低；當6-BA濃度為3 mg/L時，出苗率為58.3%，苗的長勢一般。隨著6-BA濃度不斷增加，長勢也越好，芽亦粗壯，當6-BA濃度為2 mg/L時，苗長勢最好，葉片濃綠，芽粗壯。由此可以看出，最適宜桂柳05136甘蔗愈傷組織分化出苗的培養基為改良MS+2 mg/L 6-BA。

表2 6-BA濃度對愈傷組織分化的影響

2.3 6-BA濃度對甘蔗增殖系數的影響

從表3可以看出，隨著6-BA濃度升高，甘蔗增值率不斷升高，葉色逐漸變深，在6-BA低濃度時，還有根長出。當6-BA濃度為3 mg/L時，增殖系數為3.5，苗最粗壯，葉色深綠。由此可以看出：最適宜桂柳05136增殖的培養基為改良MS+3 mg/L 6-BA，在該培養基中增殖獲得的甘蔗小苗長勢好，葉濃綠，增殖率最高。

表3 6-BA濃度對甘蔗增殖率的影響

2.4 NAA濃度對甘蔗組培苗生根的影響

從表4可以看出，NAA是影響生根的重要因素。處理中都可以生根，NAA的濃度對根的生長速度影響較大，隨著NAA濃度的升高，根的長度會隨之變化，當NAA的濃度在5 mg/L時根的誘導最快、根長最長，也最為粗壯，植株生長健壯。由此可以看出，最適宜桂柳05136的生根培養基為改良MS+5 mg/L NAA。

表4 NAA濃度對甘蔗組培苗生根的影響

3 結論

甘蔗的組織培養有一定的特性，不同品種之間存在一定的差異，特別是在愈傷誘導方面。有些品種需要較高的2,4-D濃度，而有些品種愈傷在較低濃度時生長良好。2,4-D低濃度時愈傷生長慢，長勢不好，質量不好；而濃度高時，愈傷的生長過快，活性不好，容易變異。因此，愈傷誘導時2,4-D的濃度一定要控制好。試驗結果表明：桂柳05136在2,4-D濃度為2 mg/L時，最適宜愈傷組織誘導。6-BA濃度會影響愈傷組織分化，濃度太高或太低都會抑制分化出苗，只有在適宜的濃度下，才會比較好的分化出苗，最適宜桂柳05136分化的培養基為改良MS+2 mg/L 6-BA。6-BA的濃度也影響著甘蔗增殖率，濃度太低，增殖率不理想，過高容易出現變異，最適宜桂柳05136的培養基為改良MS+3 mg/L 6-BA，在該培養基中增殖獲得的甘蔗小苗長勢好，葉濃綠，增殖率最高。NAA是影響甘蔗組培苗生根的重要因素，當NAA的濃度在5 mg/L時根的誘導最快、根長最長，也最為粗壯，植株生長健壯。