(承德市中心醫(yī)院 耳鼻喉科,河北 承德 067000)
喉癌是頭頸部常見的惡性腫瘤,近年全球喉癌的發(fā)病率明顯升高[1-2]。喉癌主要采取以手術為主的綜合治療[2],盡管目前的治療手段有所改善,但是預后仍較差[3-4]。目前歐美國家非手術保喉治療已成為中晚期喉癌患者根治性治療的一種方式,而非輔助性治療[5]。單純的化療是治療中晚期喉癌的重要方法之一。順鉑作為喉癌化療的一線用藥,在腫瘤治療中有著重要作用,但耐藥的出現(xiàn)限制其應用,因此尋找能夠增敏順鉑的治療方法有重要臨床意義。近年熱療與化療聯(lián)合抗癌成為研究熱點。研究顯示熱療聯(lián)合化療在卵巢癌、食管癌、胃癌等的治療中已廣泛開展并獲得較好的臨床效果[6-8],且熱療相對安全、無毒。本研究擬在體外培養(yǎng)條件下觀察熱療聯(lián)合順鉑對喉癌Hep-2細胞增殖、遷移和侵襲力的影響,旨在為喉癌的治療提供新思路、新方法,為熱療聯(lián)合化療治療喉癌提供實驗依據(jù)。
喉癌Hep-2細胞由天津醫(yī)科大學第二醫(yī)院提供,RPMI 1640 培養(yǎng)基購自美國Gibco Invitrogen公司,胎牛血清購自天津血液學研究所,胰蛋白酶購自美國Sigma公司,順鉑購自山東齊魯制藥有限公司,MTT 購自武漢華美生物技術有限公司,Transwell 侵襲實驗用細胞外基質膠 (ECM) 購自美國Sigma公司,孔徑為8 μm的Transwell 小室購自美國Corning公司。
1.2.1 喉癌Hep-2細胞的培養(yǎng)及其對順鉑的敏感性檢測用含10%胎牛血清的RPMI 1640 培養(yǎng)基,在37℃、5%二氧化碳CO2中常規(guī)培養(yǎng)、傳代喉癌Hep-2細胞。收集處于對數(shù)生長期的細胞,實驗分6組:①陰性對照組 (培養(yǎng)基不加順鉑) ;……