基質(zhì)金屬蛋白酶3在風(fēng)濕免疫性疾病診斷、療效評(píng)估中的價(jià)值

陳紅 王小超 陶麗菊

(右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，廣西 百色 533000)

風(fēng)濕免疫性疾病與機(jī)體免疫功能紊亂有密切關(guān)系，臨床主要表現(xiàn)出疼痛、發(fā)熱、晨僵、皮疹、潰瘍、關(guān)節(jié)腫脹、活動(dòng)受限、關(guān)節(jié)畸形等。風(fēng)濕免疫性疾病種類(lèi)繁多，其中以類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等最為常見(jiàn)，具有較高的致殘率。目前尚不完全清楚該類(lèi)疾病發(fā)生的確切機(jī)制，但多數(shù)流行病學(xué)和基礎(chǔ)研究結(jié)果表明該病與感染、免疫紊亂、遺傳、內(nèi)分泌和環(huán)境等具有重要關(guān)系?；|(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)主要生物學(xué)作用是降解細(xì)胞外基質(zhì)〔1〕。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)20種MMPs，根據(jù)底物不同可分為5類(lèi)，其中MMP3屬于基質(zhì)溶解素型，能夠降解介質(zhì)中的蛋白多糖、彈性纖維、層黏連蛋白等多種基質(zhì)蛋白。風(fēng)濕免疫性疾病患者中存在廣泛的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、細(xì)胞外基質(zhì)代謝紊亂、血管炎性損傷，提示MMP3在風(fēng)濕免疫性疾病發(fā)生、進(jìn)展過(guò)程中具有一定作用〔2〕。本文擬分析MMP3在風(fēng)濕免疫性疾病診斷、療效評(píng)估中的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院2017年1月至2019年6月收治的164例風(fēng)濕免疫性疾病患者(觀(guān)察組)和同期在右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院進(jìn)行健康體檢的150例健康者(對(duì)照組)。觀(guān)察組男69例，女95例；年齡44～68歲，平均(53.64±14.82)歲；病程5個(gè)月至10年，平均(4.85±1.92)年；類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎73例，強(qiáng)直性脊柱炎54例，系統(tǒng)性紅斑狼瘡37例。對(duì)照組男64例，女86例；年齡56～73歲，平均(64.24±15.37)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎或系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷標(biāo)準(zhǔn)；②符合各種疾病臨床表現(xiàn)、生化指標(biāo)和影像學(xué)改變；③在參與本研究前6個(gè)月內(nèi)未接受任何藥物治療；③僅患有一種風(fēng)濕免疫性疾病；④對(duì)研究?jī)?nèi)容知情同意，并自愿簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重臟器器質(zhì)性和功能性疾病者；②合并感染或其他免疫性疾病者。兩組年齡和性別構(gòu)成無(wú)明顯差異(P>0.05)。

1.2分組 (1)根據(jù)疾病是否處于活動(dòng)期，將觀(guān)察組分為活動(dòng)期(79例)和非活動(dòng)期(85例)2個(gè)亞組?；顒?dòng)期判斷標(biāo)準(zhǔn)：類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎者疾病活動(dòng)評(píng)分(DAS28)>3.2分，強(qiáng)直性脊柱炎者Bath強(qiáng)直性脊柱炎活動(dòng)指標(biāo)(BASDAI)評(píng)分≥6分，系統(tǒng)性紅斑狼瘡者疾病活動(dòng)指數(shù)(SLEDAI)>4分。(2)根據(jù)疾病治療效果，將觀(guān)察組分為顯效(51例)、有效(82例)和無(wú)效(31例)3個(gè)亞組。

1.3標(biāo)本采集 采集患者空腹靜脈血5 ml，3 000 r/min離心10 min后分離血清，置于-70℃冰箱保存。

1.4實(shí)驗(yàn)室檢測(cè) 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)試劑盒檢測(cè)血清MMP3水平，試劑盒由Oneogene公司提供，檢測(cè)設(shè)備為深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司RT-6300全自動(dòng)酶標(biāo)分析儀。采用免疫比濁法檢測(cè)血清C反應(yīng)蛋白(CRP)水平，由邁克生物股份有限公司提供，檢測(cè)儀器為日立LST 008全自動(dòng)生化分析儀。采用深圳市亞輝龍生物科技股份有限公司VISION Pro 全自動(dòng)動(dòng)態(tài)血沉分析儀檢測(cè)患者紅細(xì)胞沉降率(ESR)。以上操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)和儀器操作規(guī)程進(jìn)行。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS25.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)、F檢驗(yàn)、χ2檢驗(yàn)、q檢驗(yàn)及Pearson相關(guān)性分析。

2 結(jié) 果

2.1各組血清MMP3水平比較 觀(guān)察組血清MMP3水平〔(165.74±29.64)ng/ml〕明顯高于對(duì)照組〔(39.24±11.63)ng/ml,t=48.922，P=0.000〕，且類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎亞組、強(qiáng)直性脊柱炎亞組、系統(tǒng)性紅斑狼瘡亞組血清MMP3水平〔(164.27±31.75)、(169.64±28.41)、(162.94±32.95)ng/ml〕也明顯高于對(duì)照組(t=42.760、46.542、37.651，均P=0.000)。

2.2疾病活動(dòng)性與血清MMP3水平的關(guān)系 活動(dòng)期亞組(198.26±32.18)ng/ml)、非活動(dòng)期亞組〔(132.41±28.59)ng/ml〕和對(duì)照組血清MMP3水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=1 305.209,P=0.000)?；顒?dòng)期亞組和非活動(dòng)期亞組明顯高于對(duì)照組(q=70.204、40.804，均P=0.000)?；顒?dòng)期亞組明顯高于非活動(dòng)期組(q=25.468，P=0.000)。

2.3不同療效患者血清MMP3水平比較 顯效組、有效組和無(wú)效組治療后MMP3水平〔(52.36±17.64)、(89.72±23.17)、(153.82±27.03)ng/ml〕差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=156.849，P=0.000)，其中顯效組顯著低于有效組和無(wú)效亞組(q=24.871、16.912，均P=0.000)，有效組顯著高于無(wú)效組(t=13.580，P=0.000)。

2.4血清MMP3水平與炎性因子水平的相關(guān)性 血清MMP3水平與CRP和ESR水平存在明顯正相關(guān)(r=0.532、0.519，P=0.001、0.008)。

3 討 論

風(fēng)濕免疫性疾病是臨床常見(jiàn)的一組肌肉骨骼系統(tǒng)疾病，包括彌漫性結(jié)締組織病和各種原因引起的關(guān)節(jié)和關(guān)節(jié)周?chē)浗M織疾病，據(jù)統(tǒng)計(jì)我國(guó)類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等常見(jiàn)風(fēng)濕免疫性疾病的患病人數(shù)分別高達(dá)400萬(wàn)、360萬(wàn)和65萬(wàn)，這些疾病具有患病率高、致殘性強(qiáng)等特點(diǎn)，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量和勞動(dòng)能力，造成沉重的家庭和社會(huì)負(fù)擔(dān)。風(fēng)濕免疫性疾病尤其是彌漫性結(jié)締組織疾病具有以下特點(diǎn)：①與遺傳具有密切關(guān)系，強(qiáng)直性脊柱炎與人類(lèi)白細(xì)胞抗原(HLA)-B27陽(yáng)性、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎與HLA-DR4、系統(tǒng)性紅斑狼瘡與HLA-DR2和HLA-DR3有關(guān)〔3～5〕；②與免疫球蛋白升高、ESR加快、血管炎癥免疫復(fù)合物沉淀等有關(guān)；③病程上多呈慢性且遷延反復(fù)；④通過(guò)激素、免疫抑制劑等治療通?？捎幸欢ㄐЧ?。

研究表明，MMPs在風(fēng)濕免疫性疾病發(fā)生、進(jìn)展過(guò)程中具有重要作用，其中MMP3因其能夠降解纖維連接蛋白、彈性蛋白、Ⅲ～Ⅶ型膠原、層黏連蛋白等，被認(rèn)為是骨關(guān)節(jié)炎、類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎軟骨降解過(guò)程中最重要的蛋白酶類(lèi)〔6〕。MMP3主要由化膜細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等表達(dá)和分泌，其表達(dá)受到多種細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子的調(diào)控，其中腫瘤壞死因子(TNF)-α、白細(xì)胞介素(IL)-6、IL-10、IL-17、INF-α、IL-1、表皮生長(zhǎng)因子(EGF)等可誘導(dǎo)MMP3表達(dá)，而IL-4、IL-11、IL-13、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF)-β可抑制MMP3表達(dá)。MMP3能夠降解完整的基底膜，以往研究表明MMP3在腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移和侵襲過(guò)程、炎性細(xì)胞移行中具有重要作用〔7〕。風(fēng)濕免疫性疾病發(fā)病時(shí)，IL-1、TNF-α、IL-6等刺激滑膜細(xì)胞表達(dá)并分泌MMP3酶原，纖溶酶、組織蛋白酶G等可將MMP3酶原前肽切除形成具有生物學(xué)活性的MMP3，活化的MMP3還可切除MMP3酶原前肽使其激活而產(chǎn)生瀑布式放大效應(yīng)〔8〕。

CRP和ESR是臨床常用的風(fēng)濕免疫性疾病病情、療效評(píng)估的指標(biāo)，提示MMP3在風(fēng)濕免疫性疾病中發(fā)生、進(jìn)展中具有重要作用，且可作為活動(dòng)期診斷、功能療效評(píng)估的生物標(biāo)志物。

古潔若等〔9〕采用cDNA微陣列芯片檢測(cè)了強(qiáng)直性脊柱炎患者采用抗TNF-α單克隆抗體藥物治療前和治療后3個(gè)月滑膜細(xì)胞的1 176個(gè)基因表達(dá)譜，結(jié)果發(fā)現(xiàn)MMP3是治療前后表達(dá)差異最顯著的基因，體外細(xì)胞研究又發(fā)現(xiàn)MMP3能夠誘導(dǎo)單核細(xì)胞TNF-α、c-fos和c-jun等炎癥相關(guān)基因表達(dá)，通過(guò)下調(diào)MMP3表達(dá)，可使TNF-TNFR2-JNK-AP-1信號(hào)通路表達(dá)下調(diào)，進(jìn)而減少致炎因子表達(dá)和下調(diào)。馬劍達(dá)等〔10〕采用受試者工作特征(ROC)曲線(xiàn)分析了MMP3在類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎病情活動(dòng)評(píng)估中的應(yīng)用價(jià)值，結(jié)果表明單獨(dú)采用MMP3診斷類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎病情活動(dòng)的曲線(xiàn)下面積(AUC)為0.822(女性)和0.824(男性)，臨界值分別為84 μg/L(女性)和168 μg/L(男性)，而聯(lián)合CRP時(shí)的敏感度可從單獨(dú)應(yīng)用MMP3的84.7%提高至97.2%，可見(jiàn)MMP3在類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎病情活動(dòng)評(píng)估中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。

綜上，風(fēng)濕免疫性疾病患者血清MMP3水平明顯升高，該指標(biāo)可作為疾病活動(dòng)性和療效評(píng)估的指標(biāo)之一，可通過(guò)檢測(cè)MMP3水平評(píng)估患者病情活性和療效，以指導(dǎo)臨床治療。