高純氯苯甘醚含量的高效液相色譜法研究

皇甫慧君，任蕊，李叢妮,曹晨茜，2

(1.陜西省石油化工研究設計院，陜西 西安 710054；2.陜西省石油精細化學品重點實驗室,陜西 西安 710054)

氯苯甘醚(chlorphenesin，CAS 104-29-0)、化學名稱3-對氯苯氧基-1,2-丙二醇、氯苯甘油醚、氯酚醚、3-(4-氯苯氧基)-1,2-丙烷二醇、3-(4-氯苯氧基)-1,2-丙二醇[1]。一般常用作殺菌劑、防霉劑，廣泛應用于醫(yī)藥、日化、精細化工產品中。在醫(yī)藥方面，氯苯甘醚相關制劑是抑制IgE介導的組胺釋放的抗原相關的免疫抑制劑，同時氯苯甘醚也屬于抗真菌藥物，適用于抗真菌、細菌等。作為日化產品殺菌劑，常用于牙膏、洗發(fā)、護發(fā)、護膚、洗滌劑、香皂、肥皂產品中[1]。精細化工產品中也經常選用氯苯甘醚作為防霉劑使用。

氯苯甘醚制備工藝簡單，一般基于威廉姆遜醚合成方法進行[2-3]，氯苯甘醚在化妝品中的應用研究較為廣泛，分析方法多針對化妝品及日化產品中低含量組分進行研究[4-7]，對高純氯苯甘醚含量分析方法的研究較少，本文研究出一種高純氯苯甘醚含量的高效液相色譜分析方法，對氯苯甘醚原料生產廠家以及日化生產廠家的質量控制有一定指導意義。

1 實驗部分

1.1 試劑與儀器

氯苯甘醚(純度99.7%)，分析純；氯苯甘醚樣品，自制；甲醇，色譜純；純水。

WATERS 2695 HPLC UV檢測器，帶自動進樣器；METTLERTOLEDO XP504電子天平；DP-360超聲波溶解儀。

1.2 溶液的配制

1.2.1 標準儲備溶液配制 準確稱取氯苯甘醚0.100 0 g至100 mL容量瓶中，加入20 mL甲醇超聲溶解，放至室溫后定容至100 mL，搖勻，標準儲備溶液濃度為1 mg/mL。

1.2.2 系列標準溶液配制 用移液管分別量取0,2,4,6,8,10 mL標準儲備溶液于50 mL容量瓶中，甲醇定容至50 mL，搖勻。配制標準溶液濃度分別為0,0.04,0.08，0.12,0.16,0.2 mg/mL。

1.2.3 樣品溶液配制 稱取氯苯甘醚樣品0.100 0 g至100 mL 容量瓶中，加入20 mL甲醇溶液超聲溶解，放至室溫后定容至100 mL,搖勻。

1.3 色譜條件

UV檢測器，230 nm；色譜柱為waters C18(5 μm,4.6 mm×150 mm);流動相為CH3OH∶H2O=60∶40(v/v)，流速1.0 mL/min,柱溫35 ℃，進樣量2 μL。

2 結果與討論

2.1 實驗條件優(yōu)化與選擇[8]

2.1.1 檢測器及檢測波長的選擇 通過用紫外檢測器對氯苯苷醚溶液進行掃描，在230,280 nm均出現(xiàn)明顯吸收峰，230 nm響應值高于280 nm響應值，故選擇230 nm作為檢測波長。

2.1.2 流動相的選擇 選取常用極性溶液甲醇和水作為流動相，分別選取CH3OH∶H2O比例70∶30,60∶40,50∶50,40∶60,30∶70進行進樣分析。結果表明，在流動相CH3OH∶H2O比例為60∶40和50∶50時，峰型較尖銳，峰寬較窄，峰型較好，但60∶40時保留時間較短，出峰較快(見圖1)。為提高檢測效率，故選擇CH3OH∶H2O比例為60∶40作為流動相。

圖1 氯苯甘醚液相色譜圖

2.1.3 柱溫和流速的選擇 在UV檢測器，230 nm,CH3OH∶H2O=60∶40條件下，分別選取柱溫25,35,45 ℃對樣品進樣，所得圖形峰型變化不大，保留時間變化不大。以節(jié)能為原則，考慮到環(huán)境溫度的影響，故選取35 ℃作為測量柱溫。

流速1.0 mL/min時，氯苯甘醚即可較快出峰，保留時間較短，峰型較好，故選取流速1.0 mL/min。

2.2 方法驗證

2.2.1 線性相關性 以濃度分別為0,0.04,0.08，0.12,0.16,0.20 mg/mL的系列標準溶液在上述色譜條件下進樣，分別以標準溶液濃度和所測峰面積為x軸和y軸，繪制標準曲線，見圖2。

由圖2 可知，所得線性回歸方程為y=3E+07x-65 117,R2=0.995 3。且在0～0.2 mg/mL濃度范圍內，氯苯甘醚峰面積與濃度線性關系良好。

圖2 線性關系曲線

2.2.2 加標回收率 取氯苯甘醚樣品溶液6份，分別加入氯苯甘醚濃度為1.029 mg/mL的標準液0.5，1,2,3,4,5,6 mL，按前述色譜條件，對各加標溶液進樣，按照式(1)計算加標回收率，結果見表1。

表1 加標回收率

×100%

(1)

式中c2——加標后所測試樣濃度，mg/mL；

v0——加標液體積,mL；

c1——試樣濃度，mg/mL；

m0——加標量,mg。

由表1可知，各試樣加標回收率均在95%～105%內，符合加標回收率誤差范圍，準確度較高。

2.2.3 精密度 依據上述標準曲線測氯苯甘醚樣品純度，利用樣品純度計算標準偏差與相對標準偏差[9]，結果見表2。

表2 精密度測定結果

(2)

(3)

由表2可知，標準偏差為0.032 13，相對標準偏差為0.324‰，相對標準偏差較小，表明該方法精密度較高。

3 結論

使用高效液相色譜對高純氯苯甘醚進行含量分析時，在UV檢測器，230 nm，C18色譜柱，流動相為CH3OH∶H2O=60∶40，流速1.0 mL/min,柱溫35 ℃條件時，氯苯甘醚濃度在0～0.2 mg/mL范圍內，線性關系良好，加標回收率在95%～105%范圍內,相對標準偏差在0.324‰，對氯苯甘醚進行分析準確度較高，精密度較好。