散養雞馬立克氏病的診斷

張夢琳，段淇凡，陳立保，丁 芳，常建光，陳立功?，王學靜?，劉聚祥，樊寶良，王麗娟

（1.河北農業大學動物醫學院 071001；2.河北省畜牧獸醫研究所 071000；3.河北農業大學動物科技學院 071001；4.河北省農業農村廳 050000）

馬立克氏病（Marek，s disease，MD）是雞的一種常見的淋巴細胞增生性疾病， 病原為α 皰疹病毒亞科Mardivirus 屬的馬立克氏病病毒（Marek，s disease virus，MDV）[1]，該病的病理特征為多種組織器官發生淋巴性瘤細胞浸潤和形成腫瘤[2]。 20 世紀70年代我國雞群發現該病，由CVI988 株、FC126 等毒株生產的MD疫苗投入生產以后， 該病在集約化養雞場的流行得到了有效地控制。 近年來，散養雞群發生MD 或白血病等腫瘤性疾病相對較多，給散養雞養殖造成了較大的經濟損失。

2019 年10 月，河北某地散養的公雞，自80 日齡開始發病，病雞表現采食量下降、消瘦、零星死亡，主要病理變化特征為腺胃、肝臟、脾臟等內臟器官腫大或有結節出現。 根據病理學診斷及PCR 檢測結果，綜合診斷送檢病雞為內臟型MD，該結果為雞場盡早采取相應措施提供了參考依據。

1 發病情況

主訴該批散養公雞共3000 只，購入時為6 周齡，飼養至80日齡時開始發病，主要表現采食量下降、消瘦、零星死亡。 發病后曾先后找基層獸醫就診， 按大腸桿菌病和傳染性腺胃炎等疾病進行治療，結果均未見明顯療效，至送檢時已淘汰300 只左右。

2 臨床癥狀觀察

病雞多表現精神萎靡，不喜活動，雞冠發育不良，個體瘦弱。

3 病理學診斷

3.1 病理剖檢變化

外部檢查后，對送檢雞進行內部檢查，觀察、記錄體表及內部器官的肉眼病變。 送檢病雞體重偏小、胸肌菲薄。 腺胃體積明顯變大，腺胃壁增厚、質地變硬、腺胃乳頭腫大或黏膜見出血和潰瘍（2/5）；肝臟體積增大，表面和切面散在小米大至粟粒大小、灰白色結節（3/5）；脾臟明顯腫大，表面和切面見大小不一灰白色組織浸潤（3/5）；腎臟腫大，局部呈灰白色（2/5）；胸腺萎縮。 眼睛、皮膚、坐骨神經及其他內臟無肉眼可見病變。

3.2 組織學變化

采集送檢雞的心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腺胃、腎臟等器官，經3.7%甲醛溶液固定24h 以上，上述器官按常規制作石蠟切片，H.E 染色，用光學顯微鏡觀察組織學變化。 鏡檢可見腺胃、肝臟、脾臟和腎臟中有腫瘤細胞浸潤，腫瘤細胞為大、中、小淋巴樣細胞、 成淋巴細胞及馬立克氏病細胞。 心臟等器官未見組織學變化。

4 PCR 檢測

無菌操作采取送檢病雞肝臟、脾臟等，加入適量滅菌生理鹽水經研磨、勻漿、離心取上清液，按常規進行病毒核酸(DNA 和RNA) 的提取。 按照文獻方法分別進行MDV 和禽白血病病毒的PCR 檢測。 電泳結果顯示，送檢雞僅為MDV 陽性（圖1）。

5 小結與討論

圖1 MDV PCR 產物電泳結果

臨床上，MD 有神經型、內臟型、眼型和皮膚型4 種致病型。MDV 多侵害坐骨神經等外周神經，引發神經型MD，病雞多呈“劈叉”姿勢，有時表現為翅膀下垂等。 內臟型MD 病雞主要表現為心臟、肝臟、脾臟、腎臟等的腫瘤病灶。 眼型MD 病雞主要表現為瞳孔縮小，甚至呈針尖大小，虹膜呈斑點狀或者環狀，且邊緣不整齊，逐漸從正常的桔紅色變成彌漫性的灰白色，如同“魚眼狀”。 皮膚型MD 病雞可見皮膚毛囊的小結節或者瘤狀物。 MD腫瘤細胞在組織學上有其特有的形態， 即大小不等的淋巴樣細胞和變性的成淋巴細胞。 因此，通過病理組織學觀察，腫瘤細胞符合上述描述特點，即可明確診斷。 根據病理學診斷和PCR 檢測結果，可判定送檢散養公雞屬于內臟型MD 病例。

據養殖戶反映， 該批次公雞出殼時未接種MDV 疫苗。 因此， 建議散養雞養殖過程中應購買已接種MD 疫苗的雞只。 此外， 養殖過程中還要注意接種MD 疫苗雞只仍可能出現免疫失敗。 MD 免疫失敗的原因包括：MDV 早期感染；傳染性法氏囊病病毒、雞傳染性貧血病毒等引發的免疫抑制；超強毒力MDV 感染；疫苗方面因素，如疫苗運輸、保藏和使用不當等。 目前，必須采取規范使用疫苗、加強生物安全管理等綜合性措施，才能減少該病的發生。