急性腦出血患者血清CD40、ICAM-1水平變化及臨床意義

全宏娟 夏明萬 張圣岸

[摘要] 目的 研究急性腦出血患者血清CD40、細胞間黏附分子-1（ICAM-1）表達變化及臨床意義。 方法 選取2017年1月～2019年1月湖南省郴州市第一人民醫院（以下簡稱“我院”）診治的153例急性腦出血患者作為病例組，選擇我院健康體檢者60名作為對照組。根據不同預后將病例組患者分為死亡亞組40例、預后良好亞組68例和預后不良亞組45例。應用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢測兩組血清中CD40及ICAM-1表達，分析組間表達差異及兩指標與臨床特征和預后的關系。 結果 病例組血清CD40、ICAM-1高于對照組，差異有統計學意義（P < 0.05）。病例組血清CD40與ICAM-1呈顯著正相關（r = 0.679，P = 0.000）。病例組不同腦出血量、神經缺損嚴重程度患者血清CD40及ICAM-1差異有統計學意義（P < 0.05）。 死亡亞組患者血清CD40、ICAM-1表達明顯高于預后良好亞組及預后不良亞組，預后不良亞組血清CD40、ICAM-1表達高于預后良好亞組，差異有統計學意義（P < 0.05）。 結論 急性腦出血患者血清中CD40及ICAM-1表達升高，與患者神經功能及預后密切有關，監測兩指標有助于判斷急性腦出血患者病情及預后。

[關鍵詞] 急性腦出血;CD40;細胞間黏附分子-1;預后

[中圖分類號] R743.74 ? ? ? ? ?[文獻標識碼] A ? ? ? ? ?[文章編號] 1673-7210（2020）07（b）-0013-05

[Abstract] Objective To study the changes and clinical significance of serum CD40 and intercellular adhesion molecule-1 （ICAM-1） expression in patients with acute cerebral hemorrhage. Methods From January 2017 to January 2019， a total of 153 patients with acute cerebral hemorrhage diagnosed and treated in Chenzhou First People′s Hospital， Hu′nan Province （hereinafter referred to as “our hospital”） were selected as the case group， and 60 healthy physical examinees in our hospital were selected as the control group. According to different prognosis， patients in the case group were divided into 40 cases in death subgroups， 68 cases in good prognosis subgroups and 45 cases in poor prognosis subgroups. CD40 and ICAM-1 expression in serum of two groups were detected by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）. The expression difference between groups and the relationship between the two indexes and clinical characteristics and prognosis were analyzed. Results The expressions of serum CD40 and ICAM-1 in the case group were higher than those in the control group， and the differences were statistically significant （P < 0.05）. The expressions of serum CD40 and ICAM-1 in the case group were significantly positively correlated （r = 0.679， P = 0.000）. There were significant differences in serum CD40 and ICAM-1 in patients with different cerebral hemorrhage volume and severity of nerve defect （P < 0.05）. The expressions of CD40 and ICAM-1 in the death subgroup were significantly higher than those in the good and poor prognosis subgroups， the expressions of serum CD40 and ICAM-1 in the poor prognosis subgroup were significantly higher than those in the good prognosis subgroup， and the differences were statistically significant （P < 0.05）. Conclusion The expressions of CD40 and ICAM-1 in the serum of patients with acute cerebral hemorrhage are elevated， they are closely related to the neurological function and prognosis of patients. Monitoring the two indexes is helpful to judge the condition and prognosis of patients with acute cerebral hemorrhage.

[Key words] Acute cerebral hemorrhage; CD40; Intercellular adhesion molecule-1; Prognosis

急性腦出血是腦實質中自發性、非創傷性出血。急性腦出血占所有腦血管事件的10%～20%，是腦卒中最致命的類型，其1個月死亡率可高達40%，80%的幸存者中遺留嚴重殘疾[1]。急性腦出血的治療包括應用止血藥、脫水藥及手術治療等，但目前治療方案中仍缺少顯著改善患者預后的治療。因此，有必要研究腦出血后腦損傷的機制，尋找能夠判斷患者病變嚴重程度及預后的血清標志物[2]。研究發現，腦出血后血腫周圍的組織炎性反應與腦損傷程度有關，如炎細胞浸潤、大量活性氧及炎性因子的產生均加重血腫周圍腦組織的損傷[3]。CD40基因位于20q13.12，是腫瘤壞死因子（TNF）受體超家族的成員。編碼的蛋白質是免疫系統抗原呈遞細胞上的受體，可介導多種免疫和炎性反應。據報道，急性腦出血時，細胞表面的CD40與相應的配體CD40L結合后，促使細胞炎性反應的發生，與患者不良預后有關[4]。細胞間黏附分子-1（ICAM-1）基因位于19p13.2，該基因編碼的糖蛋白通常在內皮細胞和免疫系統細胞表面。研究發現，急性腦出血時，ICAM-1能與CD11a/CD18或CD11b/CD18類型的整合素結合，介導白細胞與血管內皮細胞的結合，白細胞穿過內皮細胞引起組織中大量炎癥細胞浸潤，釋放大量炎癥因子，加重腦組織損傷[5]。本研究通過檢測急性腦出血患者血清CD40及ICAM-1表達，探討兩者臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月～2019年1月湖南省郴州市第一人民醫院（以下簡稱“我院”）診治的急性腦出血患者153例為病例組。納入標準：①所有急性腦出血患者診斷均符合自發性腦出血處理指南標準[6]。②首次發作，發病時間為3 d內。③既往無嚴重的心肺等臟器功能不全。④患者及家屬知情同意并簽字。排除標準：①其他因腦血管疾病、腫瘤等導致的腦出血。②既往有腦卒中病史。③合并嚴重感染或自身免疫性疾病。④既往有神經功能殘疾或精神障礙患者。病例組患者，其中男80例，女73例;年齡47～78歲，平均（65.1±5.2）歲;選取同期于我院健康體檢者60名為對照組，其中男34例，女26例;年齡46～80歲，平均（66.3±5.6）歲。既往無心腦血管疾病病史、無神經系統疾病或自身免疫性疾病病史。兩組年齡、性別比較，差異無統計學意義（P > 0.05），具有可比性。本研究經我院醫學倫理委員會審核批準通過。

1.2 檢測方法

取病例組患者發病48 h內及對照組人群清晨空腹靜脈血約5 mL，1200 r/min，離心10 min，離心半徑10 cm，取上清置于-80℃保存待測。應用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）雙抗體夾心法檢測血清中CD40及ICAM-1水平，實驗步驟嚴格按照試劑盒說明書進行，CD40及ICAM-1試劑盒購自abcam公司，貨號：ab210 970、ab175445，批號：lot100718515、lot101418211。CD40正常值范圍為31.25～2000.00 pg/mL，ICAM-1正常值范圍為150～20 000 pg/mL。

1.3 觀察指標及隨訪

收集并記錄病例組患者年齡、性別、出血部位、腦出血量、神經缺損嚴重程度及有無高血壓史、糖尿病史等臨床資料。自出院之日起對所有急性腦出血患者進行隨訪，每1個月隨訪1次，隨訪以門診方式進行，隨訪6個月，隨訪截至2019年7月。隨訪內容為患者生存情況。隨訪結束時死亡的患者為死亡亞組，對存活的急性腦出血患者進行改良Rankin評分（modified rankin scale，mRS），以評價療效，分為預后良好亞組（mRS評分≤3分）和預后不良亞組（mRS評分≥4分）[8]。

1.4 統計學方法

采用SPSS 18.0統計軟件進行數據分析。計量資料采用均數±標準差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗，多組間均數比較采用單因素方差分析，進一步兩兩比較采用LSD-t檢驗，計數資料采用率表示，組間比較采用卡方檢驗，患者血清中CD40與ICAM-1的相關性采用Pearson線性相關分析。以P < 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組血清CD40及ICAM-1表達比較

病例組血清CD40及ICAM-1表達明顯高于對照組（P < 0.05）。見表1。

2.2 病例組血清CD40、ICAM-1表達與臨床特征的關系

病例組患者不同腦出血量、神經缺損嚴重程度患者血清CD40及ICAM-1差異均有統計學意義（均P < 0.05），而不同年齡、性別、出血部位及有無高血壓史、糖尿病史患者血清CD40及ICAM-1差異無統計學意義（P > 0.05）。大量出血、重度神經功能缺損的急性腦出血患者血清中CD40、ICAM-1表達分別明顯高于小、中量出血，輕、中度神經功能缺損患者（均P < 0.05）。見表2。

2.3 病例組患者血清CD40與ICAM-1表達的相關性

Pearson線性相關分析結果顯示，病例組血清中CD40表達水平與ICAM-1表達水平呈顯著正相關（r = 0.679，P = 0.000）。

2.4 病例組患者血清CD40、ICAM-1表達與預后的關系

本研究中，隨訪6個月時，死亡40例（26.1%），存活113例（73.9%）;存活患者中，預后較好68例（60.2%），預后較差45例（39.8%）。死亡亞組、預后不良亞組及預后良好亞組之間在年齡、性別、高血壓、糖尿病、腦出血量及評估神經功能缺損程度的NIHSS評分比較，差異均無統計學意義（均P > 0.05）。死亡亞組患者血清CD40、ICAM-1表達明顯高于預后不良亞組及預后良好亞組患者（均P < 0.05），預后不良亞組患者血清CD40、ICAM-1表達明顯高于預后良好亞組患者（均P < 0.05）。見表3。

3 討論

急性腦出血是臨床常見的腦血管疾病，其具有較高的發病率、致殘率及致死率，嚴重威脅我國人民健康[9-12]。目前急性腦出血的治療中尚缺少顯著改善患者預后的治療措施，因此，深入研究急性腦出血后腦損傷機制具有重要的臨床價值。研究表明，急性腦出血后除血腫對腦組織的機械性損傷外，血腫周圍的組織炎性反應在腦白質損傷過程中發揮重要的作用[13]。血腫周圍大量炎癥細胞浸潤，伴有大量細胞因子及趨化因子的釋放，導致血腦屏障的損害、軸突損傷及髓鞘損傷[14]。神經細胞及血管內皮細胞表面分子、信號通路的分子如過氧化物酶體增殖劑激活受體、天冬氨酸受體等表達失常，進一步加重對神經細胞的損傷，影響神經細胞的功能[15]。

CD40是TNF家族的成員之一。大量證據表明，細胞表面受體CD40與CD40L結合激活血管緊張素-Ⅱ依賴性的血栓形成和炎性反應，發揮促炎作用及白細胞募集[16]。以往在急性冠狀動脈綜合征、缺血性中風等疾病中均發現循環血清CD40水平升高的現象[17]。因此，血清CD40亦有可能作為急性腦出血的潛在生物標志物。本研究中，急性腦出血患者血清CD40表達水平明顯高于對照組，提示急性腦出血患者的血清CD40表達水平升高，其機制可能是腦出血后血腫周圍組織炎癥細胞大量浸潤，如中性粒細胞等能產生干擾素-γ等細胞因子，促進神經細胞表達CD40表達水平升高[18]。此外，病例組患者血清CD40表達水平與腦出血量、神經功能缺損程度有關，出血量越大、神經功能缺損程度越重的急性腦出血患者血清中CD40表達水平較高，提示血清CD40有助于反映急性腦出血患者神經功能缺損程度情況。目前CD40在急性腦出血中的作用機制尚不清楚，可能是單核細胞、血管內皮細胞等細胞表面的CD40與其配體結合后，激活下游核因子κB信號通路，在促進細胞表達促炎細胞因子的同時，還能促進單核細胞與血管內皮細胞的黏附、聚集，加重血腫周圍組織炎癥，加重腦組織的損傷，導致神經功能缺損程度加重[19]。本研究隨訪6個月時，死亡亞組患者血清CD40明顯高于預后不良亞組，而預后不良亞組高于預后良好亞組，提示血清CD40水平有可能成為評價急性腦出血患者不良預后的指標。

ICAM-1也稱為CD54，是免疫球蛋白超家族的重要黏附分子。作為一種跨膜蛋白，主要表達于白細胞、內皮細胞及血小板表面，能夠介導白細胞與內皮細胞的黏附。研究表明，血管內皮細胞中ICAM-1的異常表達能夠招募循環血中單核細胞等，參與動脈粥樣硬化、缺血性卒中等血管性疾病的的發生發展[20]。其ICAM-1在急性腦出血中的作用和預后中的作用報道較少。本研究中，急性腦出血患者血清ICAM-1表達水平明顯較對照組高，提示急性腦出血患者的血清ICAM-1表達水平升高，可能是急性腦出血時，血腫周圍組織中炎細胞產生大量TNF-α，通過促進的ERK信號通路的磷酸化，促進血管內皮細胞ICAM-1表達[21]。此外，病例組患者血清ICAM-1表達與腦出血量、神經功能缺損程度有關，顯示血清ICAM-1有可能成為反映患者神經功能缺損程度的指標。其原因可能是內皮細胞表達ICAM-1招募中性粒細胞，中性粒細胞釋放基質金屬蛋白酶-9，破壞血腦屏障的完整性，加重急性腦出血患者血腫周圍腦組織的損傷[22]。本研究中，病例組患者血清CD40表達水平與ICAM-1表達呈顯著正相關，其機制可能是CD40結合相應的配體后，激活JNK信號通路的傳導，促進ICAM-1基因的表達[23-24]，但兩者之間的具體作用機制有待深入研究。

綜上所述，急性腦出血時患者血清CD40及ICAM-1表達升高，與出血量、神經功能缺損程度及預后有關，有望成為新的判斷急性腦出血患者病情及預后的標志物。

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（收稿日期：2020-03-02）