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鹽地堿蓬提取物對食源性肥胖小鼠的減肥功能研究

2020-08-27 06:40:58陳曉丹黃文文陳前鋒
生物化工 2020年4期
關(guān)鍵詞:小鼠實驗模型

陳曉丹,黃文文,陳前鋒

(1.盤錦職業(yè)技術(shù)學院,遼寧盤錦 124000;2.自然資源部第三海洋研究所,福建廈門 361005;3.西南大學,重慶400700)

鹽地堿蓬(S. salsa (L) Pall)屬于藜科堿蓬屬的一年生草本植物,多生長于濱海濕地、灘涂等鹽堿地。因其顏色鮮艷,常用作觀賞植物,或作為一種野菜被農(nóng)民食用。鹽地堿蓬富含維生素C、微量元素、黃酮類化合物和不飽和脂肪酸等營養(yǎng)物質(zhì)[1],粗蛋白、粗脂肪和總糖含量較少,膳食纖維和氨基酸等成分豐富,是一種符合現(xiàn)代營養(yǎng)學健康飲食觀念的野生植物[2]。

目前,國內(nèi)外對堿蓬屬植物的研究主要集中于植物生理以及耐鹽方面,對其化學成分的研究發(fā)現(xiàn),翅堿蓬中含有黃酮類、脂肪酸類、萜類、多酚類以及脂溶性化合物[3-4]等。明代的《救荒本草》中記載堿蓬具有良好的藥效:“味咸性涼,清熱消積”;《綱目拾遺》有記載:“可清熱,瘰癘、腹脹”[5]。隨著對鹽地堿蓬研究的不斷深入,更多研究著眼于對鹽地堿蓬中的多糖[6]、色素及黃酮[7-8]等物質(zhì)及其活性進行研究。高健等[9]采用65%乙醇浸提法從鹽地堿蓬中提取總黃酮,測定了總黃酮的含量;張躍林等[10]采用水提法從鹽地堿蓬中提取黃酮類物質(zhì),進行了含量的測定與驗證;劉素華等[11]測定了鹽地堿蓬中的植物鹽成分主要為NaCl、KCl,同時含有微量的鈣、鐵、錳等元素[12]。胡博路等[13]的研究發(fā)現(xiàn),翅堿蓬主要通過清除氧自由基來達到抗氧化的作用,從而有益于健康和長壽。目前,對于鹽地堿蓬在降脂減肥方面的研究不多。張建揚等[14]研究證明鹽地堿蓬種子油具有一定的降脂和提高機體免疫的作用。因此,本文通過構(gòu)建小鼠營養(yǎng)型肥胖模型并灌胃不同劑量的鹽地堿蓬提取物,以研究鹽地堿蓬提取物的減肥、減脂功能。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗藥物

堿蓬提取物:鹽地堿蓬取自遼寧省盤錦市遼河口紅海灘濕地10—11月成熟草體,實驗室自行煎煮提取得膏狀粗提物(1 g堿蓬加10 mL水);奧利司他,浙江海正藥業(yè)股份有限公司;高脂飼料,西南大學藥學院動物中心。

1.1.2 實驗動物及飼料

SPF級昆明種小鼠,體重18~22 g,200只,雄性,西南大學藥學院采購。小鼠飼養(yǎng)于西南大學SPF小鼠大鼠養(yǎng)殖系統(tǒng)內(nèi),室溫(22±2)℃,相對濕度60%±2%?;A(chǔ)飼料由西南大學提供;高脂飼料由80%基礎(chǔ)飼料、10%豬油、10%蛋黃粉混勻制成備用。

1.1.3 儀器設備

BS-120型全自動生化儀,深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司;Micro 17R離心機,北京通世華港設備有限公司;BT224S型電子分析天平,北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 分組及給藥

以200只雄性昆明小鼠為實驗對象,隨機分籠,每籠10只,飼養(yǎng)于西南大學SPF小鼠大鼠養(yǎng)殖系統(tǒng)內(nèi)。設置空白對照組、模型對照組、堿蓬低劑量組、堿蓬中劑量組、堿蓬高劑量組和陽性對照組。空白對照組選30只,自實驗開始至結(jié)束用普通飼料喂養(yǎng),其余動物均喂養(yǎng)高脂飼料。待喂養(yǎng)高脂飼料小鼠平均體重超過對照組20%后,繼續(xù)喂養(yǎng)一周,從造模小鼠中選取已超過對照組20%的肥胖模型小鼠150只,分為5組:(1)模型對照組,每天只喂養(yǎng)高脂飼料;(2)堿蓬低、中、高劑量組,每天除喂高脂飼料外,還分別灌胃2 g/kg、4 g/kg、6 g/kg堿蓬煎煮液;(3)陽性對照藥物組除每天喂高脂飼料外,還灌胃奧司利他0.06 g/kg。同時空白對照組和模型對照組給予等容量的蒸餾水,自由采食,自由飲水,連續(xù)給藥5周,每周小鼠稱重,5周實驗后隨即脫頸椎處死。

1.3 測定指標

1.3.1 體重和Lee's指數(shù)

末次給藥后,測定小鼠體重和體長(小鼠鼻尖到肛門的長度),按照公式1計算Lee's指數(shù)。式中,體重單位為g,體長單位為cm。

1.3.2 血清生化指標

灌胃5周后,各組小鼠禁食24 h,小鼠頸部動脈取血,靜置30 min后,3 000 r/min離心10 min,分離血清,按邁瑞生化檢測試劑要求提供的方法,測定總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-CTC)的含量。

1.4 統(tǒng)計數(shù)據(jù)處理

實驗數(shù)據(jù)以±s表示,采用SPSS16.0軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計學分析和單因素方差分析。P<0.05或P<0.01表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 對小鼠體質(zhì)量變化的影響

表1實驗數(shù)據(jù)表明,用藥后各組體重變化不同,空白對照組體重增加最少,堿蓬高、中、低劑量組及陽性對照組均可以降低營養(yǎng)性肥胖小鼠體質(zhì)量,根據(jù)統(tǒng)計學分析,堿蓬高、中、低劑量組與長期喂養(yǎng)高脂飼料模型對照組比較,數(shù)據(jù)差別有顯著性意義(P<0.05),說明堿蓬高、中、低劑量組對降低小鼠體重有一定作用。

表1 鹽地堿蓬提取液對營養(yǎng)性肥胖小鼠體質(zhì)量的影響±

2.2 對小鼠Lee's指數(shù)的影響

表2實驗數(shù)據(jù)表明,與長期喂養(yǎng)高脂飼料模型對照組比較,陽性對照組和堿蓬高、中、低劑量組Lee's指數(shù)均明顯下降,統(tǒng)計學分析表明具有顯著性差異(P<0.05),說明堿蓬高、中、低劑量組對降低小鼠Lee's指數(shù)有一定作用。

表2 鹽地堿蓬提取液對營養(yǎng)性肥胖小鼠Lee's指數(shù)的影響±s

2.3 對小鼠血清生化指標的影響

表3實驗數(shù)據(jù)表明,陽性藥組和堿蓬高、中、低劑量組血清中TC、TG含量(CB溶質(zhì)的物質(zhì)的量濃度)均比模型對照組低,且統(tǒng)計學分析表明差異具有顯著性(P<0.05),說明堿蓬高、中、低劑量組具有一定的降脂作用。各給藥組HDL-CTC水平與模型對照組無統(tǒng)計學顯著差異。

3 結(jié)論

本研究以高脂飼料飼養(yǎng)小鼠,誘導小鼠肥胖,體質(zhì)量、Lee's指數(shù)和血清TC、TG和HDL-CTC含量顯著增加的特征,說明小鼠肥胖模型造模成功。對模型營養(yǎng)性肥胖小鼠以堿蓬低、中、高劑量組灌胃后,小鼠體質(zhì)量、Lee's指數(shù)和血清TC、TG含量等方面有著不同程度的改善效果,說明鹽地堿蓬具有一定的減肥和降脂效果。

鹽地堿蓬對營養(yǎng)性肥胖小鼠具有減肥和降脂作用,而作用機制仍有待進一步研究。目前,國內(nèi)鹽地堿蓬的基礎(chǔ)研究較弱,研究大多為脂溶性成分,而關(guān)于水溶性成分研究不多。本研究以水煮液為試驗藥物,其活性成分具有較好的研究價值,對其分離成分進行藥理活性篩選以尋找具有明顯生物活性的天然產(chǎn)物,為研究鹽地堿蓬在食品和藥品中的開發(fā)利用提供參考。

表3 鹽地堿蓬提取液對各組小鼠血清TC、TG和HDL-CTC含量的影響

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