打破玉玲花種子休眠的方法研究初報(bào)

謝雙嶺　石俁　莊倩倩

摘 要 對(duì)比物理方法、化學(xué)方法及兩者相結(jié)合的方法，得出打破玉玲花種子休眠的最佳方法。研究結(jié)果表明，物理方法與化學(xué)方法相結(jié)合的處理?xiàng)l件下，玉玲花種子的平均發(fā)芽率高于其他方法。其中低溫層積120 d與濃度為500 mg·L-1的GA溶液處理12 h，打破玉玲花種子休眠的水平最高，發(fā)芽率為64.3%。

關(guān)鍵詞 玉玲花;種子休眠;發(fā)芽率

中圖分類號(hào)：S685.99 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2019.36.065

玉玲花（Styrax obassia Sieb & Zucc）為紫茉莉科紫茉莉?qū)伲嘈棠荆」嗄荆偁罨ㄐ颍ㄋ朴疋彛ㄏ闼匮拧⑶逄穑≈ο虏咳~較小對(duì)生，上部葉較大互生;是一個(gè)新的芳香植物源，花、葉均可以提取芳香源;又因其木材光潔細(xì)膩、質(zhì)堅(jiān)紋美，可用于加工和雕刻;其種子可用于榨油、供制肥皂及潤滑油等，具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。除此之外，玉玲花還可作為園林綠化觀賞樹種在庭院、公園和街道內(nèi)孤植、叢植，具有較大的開發(fā)利用潛力，日益受到園林綠化的重視。但由于玉玲花的種子存在休眠的生物特性，直接播種很難發(fā)芽，難以滿足現(xiàn)今市場的需求[1-3]。近年來關(guān)于玉玲花的繁殖方面研究主要集中在扦插[4]、組織培養(yǎng)及嫁接方面[5-7]，關(guān)于其育種繁殖鮮有報(bào)道。本試驗(yàn)從打破玉玲花種子萌發(fā)這一角度出發(fā)，研究促進(jìn)玉玲花種子萌發(fā)的最佳方法，為以后玉玲花種子繁殖的研究提供相關(guān)理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

玉玲花種子從姣之陽苗木有限公司購買，種子采于2018年11月，種子橢圓形或卵形，種皮具有花紋，千粒質(zhì)量為72.46 g，發(fā)芽率為3.4%。

1.2 種子預(yù)處理

種子消毒滅菌：0.5%的KMnO4泡種3 h，撈出密封

1 h，然后用無菌水沖洗干凈自然陰干，玻璃儀器及河沙使用高壓滅菌鍋滅菌20 min。

1.3 物理方法處理

1.3.1 機(jī)械處理

選取飽滿種子放入研缽內(nèi)與河沙按照1∶3的比例充分混合，研破種皮后，對(duì)種子及培養(yǎng)皿進(jìn)行消毒滅菌處理。

1.3.2 低溫層積處理

低溫層積處理又稱低溫沙藏法，在層積前先對(duì)種子、河沙及燒杯進(jìn)行消毒滅菌處理;河沙用無菌水浸濕，使河沙保持充分濕潤，無積水;將種子及河沙按照1∶3的比例在燒杯內(nèi)充分均勻混合后，上面再覆蓋一層厚5 cm左右的河沙，密封燒杯。放置在5 ℃冰箱環(huán)境中

30 d、60 d、90 d、120 d后，將種子與河沙分離，再用97%的無水乙醇進(jìn)行消毒處理后，用培養(yǎng)皿作為容器，放置在人工光照培養(yǎng)箱25 ℃的環(huán)境內(nèi)觀察其發(fā)芽情況。

1.3.3 變溫處理

利用水浴鍋將種子置于35 ℃的常溫水中3 h后，再將種子置于5 ℃的水中72 h，撈出來用97%的無水乙醇清洗一遍，再與濕潤的河沙按照1∶3的比例混合后，覆蓋一層0.5 cm左右的河沙，置于人工光照培養(yǎng)箱下進(jìn)行種子發(fā)芽試驗(yàn)。

1.4 化學(xué)方法處理

1.4.1 生長調(diào)節(jié)劑處理

將GA、6-KT、6-BA用97%的無水乙醇分別配置成100 mg·L-1、200 mg·L-1、500 mg·L-1濃度的溶液，再將消毒滅菌后的種子分別放置在不同溶液的不同濃度中浸泡

6 h、12 h、18 h和24h。

將60%乙烯利分別稀釋成20%、40%濃度，把經(jīng)消毒滅菌后的種子分別放在20%、40%、60%的濃度中浸泡

6 h、12 h、18 h和24h。

1.4.2 酸堿試劑處理

將消毒滅菌后的種子分別置于濃度為40%、60%、80%的H2SO4溶液及NaOH溶液中，浸泡30 min、60 min后，用無菌水進(jìn)行流水沖洗。

1.5 物理方法與化學(xué)方法相結(jié)合

1.5.1 低溫層積與生長調(diào)節(jié)劑處理相結(jié)合

將低溫層積120 d的種子分別置于100 mg·L-1、

200 mg·L-1、500 mg·L-1濃度的GA溶液中，20%、40%、60%濃度的ETH中，100 mg·L-1、200 mg·L-1、500 mg·L-1濃度的6-KT及6-BT中密封浸泡6 h、12 h。

1.5.2 低溫層積與酸堿試劑處理相結(jié)合

將低溫層積120 d的種子分別置于濃度為40%、60%、80%的H2SO4及NaOH溶液中，浸泡30 min、60 min后，用無菌水進(jìn)行流水沖洗。

1.5.3 打破種皮與生長調(diào)節(jié)劑處理相結(jié)合

將打破種皮的種子分別置于100 mg·L-1、200 mg·L-1、500 mg·L-1濃度的GA溶液中，20%、40%、60%濃度的ETH中，100 mg·L-1、200 mg·L-1、500 mg·L-1濃度的6-KT及6-BT中密封浸泡6 h、12 h。

1.5.4 打破種皮與化學(xué)試劑處理相結(jié)合

將打破種皮的種子分別置于濃度為40%、60%、80%的H2SO4及NaOH溶液中，浸泡0.5 h、1.0 h后，用無菌水進(jìn)行流水沖洗。

1.6 種子萌發(fā)條件及數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

每處理30粒種子，均3次重復(fù)試驗(yàn)，將經(jīng)過處理的種子分別置于培養(yǎng)皿中，人工光照培養(yǎng)箱溫度25 ℃，濕度80%，光照100%，每天光照12 h，黑暗12 h。進(jìn)行種子發(fā)芽試驗(yàn)。從第1粒種子發(fā)芽開始記錄直至種子發(fā)芽數(shù)保持不變3 d后停止記錄，重復(fù)3次，記錄整理數(shù)據(jù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 物理處理方法對(duì)發(fā)芽率的影響

由表1可知，在不同的物理方法處理下，層積處理120 d

后的玉鈴花種子發(fā)芽率最高，為41%;其次是變溫處理后的玉鈴花種子發(fā)芽率次之，發(fā)芽率為37%，發(fā)芽率最低的為打破種皮后的的玉鈴花種子，發(fā)芽率僅為4.5%。

2.2 不同化學(xué)方法處理對(duì)玉鈴花發(fā)芽率的影響

由表2可知，玉玲花種子由不同濃度的植物生長調(diào)節(jié)劑在不同的時(shí)間處理下，GA溶液對(duì)打破玉玲花種子休眠的效果最佳，6-KT、6-BA溶液的影響效果次之，ETH溶液的效果相對(duì)來說較差。其中在不同溶度不同時(shí)間的處理下，濃度500 mg·L-1的GA溶液處理玉玲花種子24 h發(fā)芽率最高，為49%。

由表3可知，玉玲花種子由不同濃度的酸堿溶液在不同的時(shí)間處理下，NaOH溶液的影響效果最佳，但在不同濃度不同時(shí)間處理下，濃度為60%的H2SO4溶液處理0.5 h效果最佳，發(fā)芽率為35.7%。

2.3 物理方法與化學(xué)方法相結(jié)合對(duì)玉玲花種子發(fā)芽率的影響

由表4可知，低溫層積120 d后的玉玲花種子在經(jīng)過植物生長調(diào)節(jié)劑的處理下，GA溶液的效果最佳，其次是6-KT溶液，6-BA溶液處理的效果相對(duì)于6-KT溶液的處理效果較差。在4種溶液不同濃度不同時(shí)間的處理下，其中以低溫層積120 d與濃度為500 mg·L-1的GA溶液處理12 h的效果最佳，發(fā)芽率為64.3%。

由表5可知，低溫層積120 d后的玉玲花種子經(jīng)過不同濃度的酸堿溶液處理，效果相近，其中以低溫層積120 d與濃度為60%的H2SO4處理1 h效果最佳，發(fā)芽率為44.3%。總體來說，與H2SO4溶液溶液相比，NaOH溶液打破玉玲花種子休眠的效果較好。

綜合比較表4和表5，以低溫層積120 d與濃度為

500 mg·L-1的GA溶液處理12 h效果最佳，發(fā)芽率為64.3%。

由表6可知，在打破種皮與不同濃度植物生長調(diào)節(jié)劑的不同時(shí)間處理?xiàng)l件下，GA溶液對(duì)玉玲花種子發(fā)芽率的影響水平最高，其中在濃度為500 mg·L-1的GA溶液中處理被打破種皮的玉玲花種子12 h，玉玲花種子的發(fā)芽率最高，高達(dá)64.3%。利用6-KT與6-BA溶液以及ETH溶液處理種子，發(fā)芽水平相差不大。

由表7可知，在打破種皮與不同濃度的酸堿溶液在不同時(shí)間的處理?xiàng)l件下，NaOH溶液的效果比H2SO4溶液打破玉玲花種子休眠的效果好。

3 討論與結(jié)論

3.1 討論

在褚澤龍[8]對(duì)玉玲花種子休眠與萌發(fā)特性研究的結(jié)論中提到，影響玉玲花種子休眠的原因有種皮限制，但這并不是主要原因，影響其休眠的主要原因可能是胚乳內(nèi)源抑制物的存在。本試驗(yàn)從不同的角度出發(fā)，試驗(yàn)各種方法得出低溫層積下與GA溶液結(jié)合是打破玉玲花種子休眠的最佳方法。在試驗(yàn)過程中，GA溶液對(duì)打破玉玲花種子休眠起著至關(guān)重要的作用，但是在查閱的文獻(xiàn)中關(guān)于GA溶液對(duì)玉玲花種子休眠的影響缺乏例證，存在多種說法，關(guān)于GA溶液是否能有效打破玉玲花種子休眠，依舊需要進(jìn)一步的研究討論。

3.2 結(jié)論

經(jīng)過3種方法試驗(yàn)對(duì)比得出打破玉玲花種子休眠的最佳方法是物理方法與化學(xué)方法相結(jié)合，在此方法下玉玲花種子的平均發(fā)芽率高于其他方法下玉玲花種子發(fā)芽率。其中最有效的試驗(yàn)方法是低溫層積120 d與濃度為

500 mg·L-1的GA溶液處理12 h，該條件下打破玉玲花種子休眠的水平最高，發(fā)芽率為64.3%。

參考文獻(xiàn)：

[1] 范川，李賢偉.林木種子的休眠與解除[J].四川林勘設(shè)計(jì)，2004（2）：14-17.

[2] 楊萬霞，洑香香，方升佐.青錢柳種子的種皮構(gòu)造及其對(duì)透水性的影響[J].南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2005，29（5）：25-28.

[3] 楊期和，葉萬輝，宋松泉，等.植物種子休眠的原因及休眠的多樣性[J].西北植物學(xué)報(bào)，2003，23（5）：837-843.

[4] 黃玉國.抑制物質(zhì)在刺楸種子休眠中的作用[J].東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1987，15（2）：18-23.

[5] 史曉華，俞仲啟，史忠禮.玉蘭種子休眠和萌發(fā)生理的研究[J].林業(yè)科學(xué)，1987（2）：77-82.

[6] 邢世巖，董雷雷，胡愛華，等.玉鈴花種苗特性研究[J].種子，2008，27（3）：60-62.

[7] 劉利，張昕祎.玉玲花實(shí)生苗繁育技術(shù)[J].遼寧林業(yè)科技，2005（6）：50-51.

[8] 褚澤龍.玉玲花種子休眠與萌發(fā)特性研究[D].泰安：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，2015.

（責(zé)任編輯：趙中正）