氨基化樹枝狀介孔二氧化硅固定葡萄糖氧化酶用于檢測葡萄糖

王 歡，所金泉，王春艷，王潤偉

(1.吉林大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院，長春 130021；2.吉林大學(xué)化學(xué)學(xué)院，長春130012)

葡萄糖是動植物碳水化合物的主要成分，葡萄糖的定量測定在生命科學(xué)中占有重要地位［1，2］，葡萄糖的檢測方法主要有分光光度法、安培法、高效液相色譜法、極譜法和毛細(xì)管電泳法等［3］，但多數(shù)方法存在耗時長、檢測費(fèi)用高等缺點(diǎn).酶是一類具有較高催化活性的生物催化劑，有較高的底物特異性［4～6］，葡萄糖氧化酶(GOD)可催化β-D-葡萄糖氧化生成葡萄糖酸和過氧化氫［7］，酶法檢測葡萄糖具有準(zhǔn)確快速、靈敏度高的特點(diǎn).近年來，葡萄糖氧化酶法已被廣泛用于生物化學(xué)、臨床化學(xué)及食品分析中葡萄糖的檢測［8～10］，酶在正常條件下表現(xiàn)出很高的選擇性和反應(yīng)性，但對pH 和溫度較敏感而易失活［11］，游離酶價格昂貴且使用一次后不能回收利用，增加了檢測成本.酶的固定化在很大程度上能夠解決上述問題，固定化GOD 用于檢測葡萄糖含量具有反應(yīng)時間短、保存期較長、靈敏度高及反應(yīng)快捷等優(yōu)點(diǎn)［12，13］.酶固定化方法有物理法和化學(xué)法2 大類［14］，其中物理法包括吸附法和包埋法；化學(xué)法包括共價結(jié)合法和交聯(lián)法等［15］.二氧化硅由于本身無毒，具有化學(xué)和生物惰性，而成為一種優(yōu)良的酶固定化載體.Balistreri 等［16］通過偶聯(lián)脂質(zhì)體囊泡將葡萄糖氧化酶GOD 固定在仿生二氧化硅顆粒中，用仿生硅化過程模擬細(xì)胞微環(huán)境，GOD 的回收率達(dá)到71.8%，固定化GOD 的熱穩(wěn)定性和pH 穩(wěn)定性均有所提高，也顯著改善了其耐受性……