基于TH1/TH2 細胞因子網絡調控探討補肺活血膠囊對II 期塵肺病干預作用研究＊

陳怡文，龔享文，劉典英

（1.江西省贛州市第三人民醫院,贛州 341000；2.江西省贛州市第五人民醫院,贛州 341000）

塵肺病是指長期在職業活動中吸入生產性塵粉且潴留在肺內而導致肺部發生進行性纖維化為主的全身性疾病，該病一旦發生呈進行性發展，隨著病情的發展，各種并發癥也逐漸增加，且各種并發癥與塵肺可相互促進，對患者的生命健康造成嚴重的威脅，甚者可導致患者死亡[1,2]。因此，需及時有效的防治措施，以緩解患者的臨床癥狀，提高患者的生命質量。 但臨床并無治療塵肺的特效藥物，常采用藥物治療、肺灌洗治療及對癥治療等，但均具有一定的局限性，不利于臨床的推廣應用，故采取何種有效的治療措施是臨床研究的重點課題之一。 隨著中醫藥的不斷發展，中醫藥治療塵肺主要集中在中藥單一成分或單味中藥、 復方制劑及自擬處方的研究，且取得了不錯的進展。 基于此，本研究以60 例II 期塵肺病患者為研究對象，觀察了基于TH1/TH2 細胞因子網絡調控探討補肺活血膠囊對II 期塵肺病干預作用研究， 以期為臨床提供借鑒。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 以 2018 年 4 月-2018 年 4 月于我院醫院診治的60 例II 期塵肺病患者為研究對象，隨機將其分為研究組和對照組各30 例，所有患者均住院治療。研究組：男22 例，女8 例；年齡為33-75 歲，平均年齡為（54.83±9.21）歲。 對照組：男 23例，女 7 例，年齡為 32-76 歲，平均年齡為（55.03±9.87）歲。兩組患者一般資料比較P>0.05，具有可比性。 本研究方案經我院醫學倫理委員會審核批準。

納入標準：所有患者均符合塵肺病診斷標準，且均為II 期塵肺者； 所有患者及其家屬均自愿參與研究并簽署知情同意書。 排除標準：對本研究所用藥物藥物過敏者；伴有造血系統、肝及腎等嚴重原發病； 治療前一周內使用過影響血小板功能藥物者；塵肺病患者合并嚴重的并發癥；經檢查證實由腫瘤、結核、真菌等因素所致的咳喘；合并精神病；合并其他慢性消耗性疾病。 剔除標準：入選后無任何實驗數據者；入選后沒用使用試驗藥物者；盲態審核后不符合方案要求者。

1.3 治療方法 對照組： 給予基礎治療包括止咳、抗感染、化痰等。 研究組：在基礎治療的同時給予補肺活血膠囊治療（生產企業：廣東雷允上藥業有限公司， 國藥準字：Z20030063）,3 粒/次，3 次/d，連續治療6 個月。

1.4 觀察指標 統計治療前及治療6 個月后兩組患者肺功能、免疫功能（CD4＋、CD8＋；CD4＋/CD8＋）、TH1/TH2 細胞因子及生命質量的變化情況。

肺功能： 肺功能檢測選用德國耶格大型肺功能儀進行以下肺功能監測： 實測值/預測值%[最大通氣量（MVV）、一氧化碳彌散(DLco)、第一秒時間肺活量（FEV1）、用力肺活量(FVC)、第一秒時間肺活量/用力肺活量(FEV1/FVC)、最大用力呼氣峰流量(PEF)]。

免疫功能及TH1/TH2 細胞因子: 分別在治療前后抽取所用患者空腹8h 以上靜脈血3-5ml，離心后將其置于-20°C 凍存。采用酶聯免疫吸附法對TH1/TH2 平衡的細胞因子網絡進行測定 IL-1β、IL-8、IFN-γ、IL-6、 IL-10 的含量； 采用 CD3+、CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋均采用流式細胞儀監測，上述所有試劑盒均由上海朗頓生物技術有限公司提供，需嚴格按試劑盒說明書檢測。

生命質量：采用國際通用的ST. George's 呼吸問卷表[3]對生命質量進行評估，該量表共包括呼吸癥狀、活動受限及疾病影響等三個能區，得分范圍為0-100 分，得分越高表示患者生命質量越差，反之則相反。

1.5 統計學方法 本研究所有數據均應用SPSS21.0 軟件分析。 以()表示肺功能、計量資料，免疫功能及TH1/TH2 細胞因子等各組數據整體比較采用重復測量方差分析， 組間及組內數據的兩兩比較采用t 檢驗；以率（%）表示計數資料，采用卡方χ2檢驗進行比較。 以P<0.05 為差異顯著。

2 結果

2.1 兩組治療前后肺功能比較 治療前，2 組FVC、FEV1、FEV1/FVC、PEF、MVV 及 DLco 相比 P＞0.05;治療后，2 組 FVC、FEV1、FEV1/FVC、PEF、MVV 及DLco 均較治療前有所改善， 其中研究組FVC、FEV1、FEV1/FVC、PEF、MVV 及 DLco 均高于對照組（P＜0.05）。 見表 1。

2.2 兩組免疫功能比較 治療前， 兩組患者CD3＋、CD4＋、CD8＋及 CD4＋/CD8＋相比 P＞0.05；治療后，兩組患者 CD3＋、CD4＋、CD8＋及 CD4＋/CD8＋均有所改善，其中研究組 CD3＋、CD4＋、CD8＋及 CD4＋/CD8＋均優于對照組（P＜0.05）。 見表 2。

2.3 兩組TH1/TH2 細胞因子比較 治療前，兩組患者 IL-1β、IL-8、IFN-γ、IL-6、 IL-10 相比 P＞0.05；治療后， 兩組患者 IL-1β、IL-8、IFN-γ、IL-6、 IL-10 均有所改善， 其中研究組 IL-1β、IL-8、IFN-γ、IL-6、 IL-10 均優于對照組（P＜0.05）。 見表 3。

2.4 兩組生命質量比較 治療前，兩組患者生命質量相比P＞0.05；治療后，兩組患者生命質量均有所改善,其中研究組生命質量均優于對照組(P＜0.05)。見表4。

3 討論

II 期塵肺病是我國最嚴重的職業病之一，被稱為“中國頭號職業病殺手”，該病發病率極高，極難治愈，其主要臨床癥狀為咳嗽、咳痰、胸痛及呼吸困難，對呼吸系統造成嚴重的危險，可累及消化系統， 對患者的身體健康及生命質量造成嚴重的影響[4]。 該病發病機制較為復雜，塵粒引發肺部病變而引發塵肺，其病理過程極為復雜，涉及多種細胞和生物活性物質，其中以免疫反應、細胞和組織的結構損傷與修復等表現反應出來， 是多種因素相互作用及制約的結果，多呈進行性反應。 面對當前塵肺病的流行現狀，對其防治已刻不容緩，但時至今日，塵肺病的治療仍無特效的治療方法和藥物，對其理想的治療方案正在孜孜以求地尋找之中，因此， 積極對塵肺病的有效治療方案及機理探索就顯得非常迫切、意義重大。

表1 兩組治療前后肺功能比較（）

表1 兩組治療前后肺功能比較（）

注：t 值、P 值為治療前后 2 組間相比；t 值 #、P 值 # 為治療前 2 組相比；t 值 *、P 值 * 為治療后 2 組相比

組別（n） 時間 FVC(%) FEV1(%) PEF(L/min) FEV1/FVC(%)研究組（30） 治療前治療后t 值P 值對照組（30） 治療前治療后t 值P 值t 值#P 值#t 值*P 值*56.87±3.54 66.17±0.29-14.341＜0.001 56.82±0.51 59.36±0.82-14.407＜0.001 0.077 0.939 42.885＜0.001 58.74±8.73 67.89±9.73-3.834＜0.001 58.92±9.01 60.98±8.73-0.899 0.372-0.079 0.937 2.895 0.005 2.85±0.46 5.31±0.82-14.331＜0.001 2.92±0.55 6.96±1.11-17.863＜0.001-0.535 0.595-6.549＜0.001 55.78±3.81 69.98±5.01-12.357＜0.001 55.63±3.52 61.71±5.45-5.133＜0.001 0.158 0.875 6.097＜0.001 MVV(%)60.34±1.89 70.08±2.39-17.508＜0.001 60.42±2.01 64.39±2.76-6.369＜0.001-0.159 0.874 8.536＜0.001 DLco（%）52.08±9.87 66.87±7.65-6.487＜0.001 52.36±9.76 59.87±7.10-3.423＜0.001-0.110 0.913 3.695＜0.001

表2 兩組患者免疫功能比較（）

表2 兩組患者免疫功能比較（）

注：t 值、P 值為治療前后 2 組間相比；t 值 #、P 值 # 為治療前 2 組相比；t 值 *、P 值 * 為治療后 2 組相比

組別 時間 CD3＋（%） CD4＋（%） CD8＋（%） CD4＋/CD8＋研究組（n=30）t 值P 值對照組（n=30）t 值P 值t 值#P 值#t 值*P 值*治療前治療后治療前治療后63.82±8.72 60.93±0.42 1.813 0.075 63.63±5.52 59.87±3.48 3.156 0.003 0.101 0.920 1.656 3.156 35.01±1.76 31.87±3.17 4.743＜0.001 34.94±2.76 30.76±3.92 4.776＜0.001 0.117 0.907 1.206 4.776 28.96±2.18 27.01±2.17 3.472 0.001 28.86±0.62 28.09±2.64 1.555 0.125 0.242 0.810-1.731 1.555 1.26±0.27 1.02±0.02 4.855＜0.001 1.30±0.25 1.16±0.04 3.029 0.005-0.595 0.554-17.146 3.029

表3 兩組患者TH1/TH2細胞因子比較(，pg/ml)

表3 兩組患者TH1/TH2細胞因子比較(，pg/ml)

注：t 值、P 值為治療前后 2 組間相比；t 值 #、P 值 # 為治療前 2 組相比；t 值 *、P 值 * 為治療后 2 組相比

組別 時間 IL-1β IL-8 IFN-γ IL-10研究組（n=30） 治療前治療后t 值P 值對照組（n=30） 治療前治療后t 值P 值t 值#P 值#t 值*P 值*1198.87±132.09 1138.76±89.74 2.062 0.044 1197.98±131.08 1178.98±90.98 0.652 0.517 0.026 0.979-1.724 0.090 1721.87±93.29 1021.81±76.93 31.711＜0.001 1718.93±76.45 1342.87±65.38 20.492＜0.001 0.134＜0.001-17.418＜0.001 899.08±28.76 602.83±23.21 43.905＜0.001 891.73±27.69 801.83±19.87 14.448＜0.001 1.008 0.318-35.674＜0.001 728.76±88.73 519.87±89.83 9.062＜0.001 725.48±83.87 549.08±77.98 8.437＜0.001 0.147 0.884-1.207 0.232

表4 兩組生命質量比較(，分)

表4 兩組生命質量比較(，分)

注：t 值、P 值為治療前后 2 組間相比；t 值 #、P 值 # 為治療前 2 組相比；t 值 *、P 值 * 為治療后 2 組相比

組別 時間 呼吸癥狀 活動受限 疾病影響 總分研究組（n=30）t 值P 值對照組（n=30）t 值P 值t 值#P 值#t 值*P 值*治療前治療后治療前治療后12.38±1.38 22.83±2.01-23.476＜0.001 12.42±1.65 15.49±1.98-6.524＜0.001-0.102 0.919 14.249＜0.001 17.84±1.54 23.37±2.08-11.703＜0.001 17.91±1.62 19.83±2.11-3.953＜0.001-0.172 0.864 6.544＜0.001 18.94±1.63 28.93±2.36-19.41＜0.001 18.87±1.73 22.39±2.26-6.774＜0.001 0.161 0.873 10.963＜0.001 49.16±4.55 75.13±6.45-18.021＜0.001 49.20±5.00 57.71±6.35-5.767＜0.001-0.032 0.975 10.541＜0.001

中醫將塵肺列為“肺痹”、“肺痿”的范疇，其主要病因病機為外感金石燥毒侵入人體后， 損傷肺絡，肺失宣降，肺司呼吸功能受損，出現胸悶氣短，主氣功能失常則氣機阻滯，氣阻日久，血脈瘀滯，肺通調水道功能失常，則水濕停聚成痰，痰阻更加重了氣滯血瘀，燥邪最易傷津耗氣，日久必然氣陰虧虛，脾助肺通調水道，腎助肺主氣司呼吸，肺病日久，必損傷脾腎，肺脾腎三臟俱損，則先后天俱損，無以化生氣血，反過來又加重了氣陰虧虛，水停氣滯血瘀之證，陰虛日久傷及腎陽，終至腎陰腎陽具虛，后期腎不納氣則喘息，呼吸困難，氣陰虧虛，瘀血阻絡貫穿始終[6]。 故治則為益氣活血，補肺固腎。 田立巖等[7]研究表明，采用補肺活血膠囊治療塵肺病，可有效改善患者的肺功能；孫世超[8]等研究表明， 補肺活血膠囊聯合穴位天灸治療痰瘀阻肺型矽肺Ⅰ期有其獨特優勢, 可改善患者胸悶、喘息、咳嗽、咳痰等臨床癥狀,減少半年內感冒次數,通過內外同治調和經絡氣血,提高抵御外邪能力,治療效果明顯,降低毒副作用。 本研究結果提示，治療后，2 組 FVC、FVC1、FEV1/FVC、PEF、MVV及DLco 均較治療前有所改善， 其中研究組FVC、FVC1、FEV1/FVC、PEF、MVV 及 DLco 均高于對照組（P＜0.05），提示補肺活血膠囊可有效改善 II 期塵肺病患者的肺功能， 這可能是由于補肺活血膠囊中黃芪具有補氣升陽、益衛固表之功效[9]；赤芍具有活血化瘀，涼血止血，清熱解毒，柔肝止痛之功效[10]；補骨脂具有補腎助陽、納氣平喘之功效，諸藥合用共達益氣活血，補肺固腎之功效[11]。

當肺部發生免疫反應或炎癥時， 為控制和增強肺部反應能力肺巨噬細胞會釋放多種介質[12]。肺巨噬細胞可間接或直接的發揮調節T 輔助淋巴細胞(Th)淋巴亞群(Th1，Th2)的增殖分化[13]，這一過程主要通過多種細胞介質的異常釋放，從而增強ThZ細胞的免疫調節能力,促使B 淋巴細胞和ThZ 細胞激活， 以促使B 細胞增殖分化成熟為抗體分泌漿細胞，且可對Thl 細胞的免疫調節功能起到仰制作用。Th 細胞根據其所分泌的細胞因子主要分為Thl和Th2 兩個亞群。 Thl 細胞分泌的細胞因子包括IL-2、IFN-γ 等,ThZ 細胞分泌的細胞因子包括 IL-13、IL-10、IL-4 等, 兩類細胞主要通過產生的細胞因子相互調節和制約, 從而維持其在體內的平衡。Tc 細胞也相應的分為Tcl 和Tc2。 有研究發現Thl/Th2 失衡存在于小鼠矽肺模型[14]。 Thl/Th2 失衡存在于多種呼吸系統疾病中， 但其是否也存在于塵肺病中，在塵肺病中起到何種作用機理，是否能夠成為藥物的作用靶點以及作用的途徑， 有待于進一步研究。 本研究結果顯示，治療后，兩組患者IL-1β、IL-8、IFN-γ、IL-6、IL-10 均有所改善， 其中研究組 IL-1β、IL-8、IFN-γ、IL-6、IL-10 均優于對照組（P＜0.05），提示補肺活血膠囊可有效改善 II 期塵肺病患者TH1/TH2 細胞因子水平， 但其具體機制尚不清楚，需后期進一步探索。

II 期塵肺患者在大量吸收生產性粉塵的過程中會引發肺部持續炎癥， 進而發展成為彌漫性肺纖維化，在粉塵介導的慢性炎癥及纖維化過程中T淋巴細胞、 中性粒細胞及上皮細胞等均可充分發揮重要作用[15]。CD3+T 細胞為成熟的 T 細胞；CD4+T細胞是輔助性T 淋巴細胞,其具有增強吞噬細胞介導的抗感染作用， 可對B 細胞介導的體液免疫應答具有增強作用；CD8+T 細胞是抑制/殺傷性T 淋巴細胞，具有特異性直接殺傷靶細胞的作用。 本研究結果提示，治療后，兩組患者 CD3＋、CD4＋、CD8＋及CD4＋/CD8＋均有所改善， 其中研究組 CD3＋、CD4＋、CD8＋及 CD4＋/CD8＋均優于對照組（P＜0.05），提示補肺活血膠囊可有效改善II 期塵肺病患者免疫功能。 時嬋等研究[16]表明，補肺活血膠囊能夠改善塵肺合并COPD 患者的肺功能以及生命質量。 本研究結果提示，治療后，兩組患者生命質量均有所改善，其中研究組生命質量均優于對照組（P＜0.05），提示補肺活血膠囊可有效提高II 期塵肺病患者的生命質量。

綜上所述， 補肺活血膠囊可有效改善II 期塵肺病患者的肺功能，同時可改善患者的免疫功能，可調節TH1/TH2 細胞因子水平， 且可提高生命質量，值得臨床推廣。 但由于本研究所納入樣本量較少， 且為對補肺活血膠囊改善II 期塵肺病患者TH1/TH2 細胞因子水平的具體機制尚不清楚，需后期進一步探索。