2016-2019年攀枝花市高致病性H5亞型禽流感免疫抗體檢測與分析

張昕彤，熊 杰，蒲楊柳，蔣成偉，陳富忠，胡生富

（攀枝花市動物疫病預防控制中心，四川 攀枝花617000）

禽流感（AI）是由正黏病毒科流感病毒屬的A 型流感病毒（AIV）所引起的一種禽類烈性傳染病。在AIV 不同的亞型中，只有部分H5 和H7 亞型毒株可引起高致病性禽流感（HPAI），該病會給家禽養殖業造成巨大的經濟損失，并對公共健康造成持續性威脅，被世界動物衛生組織規定為必須報告的動物疫病，我國將其列為一類動物疫病。高致病性禽流感是我國強制免疫的主要病種之一，免疫接種是目前預防和控制的重要手段。為掌握攀枝花市H5 亞型禽流感免疫效果情況，在2016-2019 年春秋兩季集中免疫結束后，對各縣（區）養殖場和散養戶禽類進行隨機抽樣，共采集血清樣品2 057 份，用血凝抑制試驗進行免疫抗體檢測。

1 材料與方法

1.1 血清樣品及來源（見表1）

表1 血清樣品來源

2016-2019 年春秋兩季集中免疫結束后，隨機抽取全市各縣（區）內規模場和散養戶禽類血清樣品共2 057份，其中散養戶1 770 份，規模場287 份，雞血清1 719 份，水禽血清338 份。采集的血液樣品待血清析出后進行離心，取上層血清倒入干凈的離心管中，置于-20℃冰箱中保存備檢。

1.2 試劑

禽流感病毒H5 亞型血凝抑制試驗抗原、禽流感病毒H5亞型陽性血清，均購自哈爾濱維科生物技術開發公司。

1.3 檢測方法與結果判定

根據GB/T 18936－2003《高致病性禽流感診斷技術》的規定，采用血凝（HA）和血凝抑制（HI）試驗進行免疫抗體檢測。

結果判定：HI 效價≥4log2 為陽性，判定為免疫合格；HI效價＜4log2為陰性，判定為免疫不合格。判定標準：免疫抗體合格數占抽檢總數的70%以上為免疫合格。

2 檢測結果與分析

2.1 2016-2019年全市H5亞型禽流感免疫抗體總體情況

2016-2019 年全市共檢測2 057 份樣品，合格1 957份，合格率95.14%，其中2016 年-2019 年H5 亞型禽流感免疫抗體合格率分別為95.79%、96.92%、98.14%、89.44%，均達到國家規定要求，說明強制免疫工作較理想，能夠對家禽起到一定的保護作用。其中免疫抗體水平在2016-2018年呈上升趨勢且合格率都在95%以上，但2019年下降到90%以下，下降原因主要是2019 年春秋防鹽邊縣免疫抗體只有70%左右，進而拉低了總體合格率。可能與以下因素有關：一是村級防疫員操作不熟練、技術不規范導致免疫效果不佳；二是鹽邊縣地域較廣，散養戶居住分散，“跑山雞”比例較大，白天散養在山林，村級防疫員只能晚上上門免疫，個別農戶受風俗習慣影響，不愿意或不配合免疫，造成免疫難度加大，存在漏免的情況；三是個別村級防疫員隨身攜帶的疫苗冷藏箱由于保溫效果不良導致疫苗失效。

2.2 2016-2019年全市散養戶和養殖場H5亞型禽流感免疫抗體情況（詳見表2）

2016-2019 年全市共檢測散養戶1 770 份，合格1 679份，合格率94.86%，檢測養殖場287 份，合格278 份，合格率96.86%，其中養殖場抗體合格率略高于散養戶，其原因可能是因為養殖場的管理技術、生物安全水平和防疫水平均高于散養戶。散養戶2016-2018 年合格率逐年上升，可能與攀枝花市開展培訓宣傳及農戶防控意識提高有關。養殖場2019 年合格率有所下降，主要因為個別養殖場管理人員思想松懈、更換疫苗和調整免疫程序等因素有關。

表2 2016-2019年全市H5亞型禽流感免疫抗體結果

2.3 2016-2019年全市雞和水禽H5亞型禽流感免疫抗體情況（詳見表3）

表3 2016-2019年全市雞和水禽H5亞型禽流感免疫抗體情況

2016-2019 年全市共檢測雞血清1 719 份，合格1 643份，合格率95.58%，檢測水禽血清338 份，合格319 份，合格率94.38%，可以看出，雞的總體抗體水平略高于水禽。其中2016、2017 年雞的免疫抗體合格率均高于水禽，而2018、2019 年水禽的免疫抗體合格率則高于雞并達到100%，且水禽的抗體水平呈逐步上升趨勢，說明近兩年來水禽的免疫抗體水平有較大提高，起到了較好的保護作用，雞的抗體合格率除2019年外，總體較平穩且抗體水平較高。

3 討論與小結

一直以來，國內外對禽流感的防控均高度重視，2004 年1 月23 日，我國發生第一起高致病性禽流感（H5N1），從2004 年起，全國開始實施強制免疫政策。隨著養殖業的發展，病毒也在不斷發生變異，其中使用疫苗免疫方法防止禽流感的暴發是現目前最有效的防控手段，我國對禽流感的免疫要求是高致病性禽流感群體免疫密度應常年保持在90%以上，其中應免畜禽免疫密度應達到100%，免疫抗體合格率應常年保持在70%以上，采取春秋兩季集中免疫與定期補免相結合的方式進行。

從檢測結果看，2016-2019 年這4 年間，H5 亞型禽流感免疫抗體均達標準，說明我市高致病性H5亞型禽流感的免疫情況總體上較好。由于H5 亞型禽流感病毒目前仍是威脅我國養禽業的重要亞型，所以養殖者對其重視程度較高，但仍有個別縣（區）散養戶和養殖場血清樣品的抗體水平有高有低，這可能與免疫過程中操作不規范有關，存在漏免或注射疫苗時漏到體外，導致免疫失敗，使群體免疫密度降低和免疫抗體不均衡。因此，要加強對防疫人員免疫技術和免疫操作技能培訓，提高免疫質量。

綜合看來，攀枝花市免疫效果較好，對預防高致病性禽流感能夠起到一定的抗體保護作用，但免疫效果的持續監測仍是當前高致病性禽流感免疫防控工作中的重點，所以在家禽養殖中長期對禽流感進行血清學監測是十分必要的，這對疫苗的選擇、免疫效果的考察、免疫計劃的執行是十分有用的。禽流感防控是一項長期持久的工作，要加強強制免疫，認真做好免疫抗體的監測，通過培訓宣傳，提高防控意識，做到防患于未然，保證養禽業的健康發展。