復(fù)方雙丁散浸提液對(duì)奶牛乳房炎病原菌藥敏試驗(yàn)

（河南省新鄉(xiāng)市人民公園 453000）

中獸醫(yī)認(rèn)為乳房炎即奶腫、奶黃、乳癰，是痰、濕、氣、血郁結(jié)不散，化而為炎。與肝胃兩經(jīng)有關(guān)，因飼養(yǎng)管理不善，久臥濕熱之地，濕熱毒氣上蒸，侵害乳房。或患牛拒絕擠奶，使乳汁停滯，乳房脹滿等原因?qū)е卤静1]。因此，中藥方劑的組方應(yīng)以清熱解毒、抗菌消炎、通經(jīng)活血、消腫止痛、活絡(luò)通乳為原則。常用清熱解毒藥、活血祛瘀藥、解表藥和利濕藥，同時(shí)輔以補(bǔ)益、理氣等藥物，以補(bǔ)氣升陽、扶正祛邪，從而達(dá)到治療奶牛乳房炎的目的[2]。

1 材料與方法

1.1 病原菌分離培養(yǎng)及鑒定

用接種環(huán)取病料于鮮血肉湯中培養(yǎng)24h，挑取典型菌落涂片，革蘭氏染色，鏡檢。根據(jù)菌體形態(tài)、溶血情況及革蘭氏染色特性初步判定細(xì)菌類屬[3]。并將其進(jìn)一步純化培養(yǎng)，純培養(yǎng)后鏡檢無雜菌者保存于試管斜面培養(yǎng)基內(nèi)。

1.2 復(fù)方雙丁散浸提液的制備

按配方中一定比例取中藥蒲公英、二花、連翹、紫花地丁、王不留行、絲瓜絡(luò)、通草、木通、黃連、赤芍、穿山甲、皂角刺共340g，加90%濃度的酒精2000ml 浸泡72h。

用蒸餾瓶、冷凝管、水浴鍋、皮管等將裝置安裝好，將浸泡的中藥放入蒸餾瓶中進(jìn)行85℃水浴加熱3h 使中藥有效成分充分溶解。

用高壓過濾器將浸泡的中藥充分過濾，取濾液。

用蒸餾瓶、冷凝管、水浴鍋、皮管等將裝置安裝好，將濾液放入蒸餾瓶中進(jìn)行85℃水浴加熱，直至藥液中酒精完全分離出來。將剩余藥液配成340ml。

此時(shí)藥液濃度為1g/ml，分別取80、40、20 藥液，將其濃縮成10ml 藥液，制成8 倍、4 倍、2 倍藥液待用。

1.3 藥敏試驗(yàn)

1.3.1 細(xì)菌計(jì)數(shù)

培養(yǎng)24h 后應(yīng)立即計(jì)數(shù)每個(gè)平板上的菌落數(shù)。按30～300 個(gè)菌落計(jì)數(shù)規(guī)則計(jì)算平板的菌落數(shù)。不同稀釋濃度細(xì)菌計(jì)數(shù)結(jié)果。

表1 細(xì)菌計(jì)數(shù)結(jié)果

由表1 可知，于37℃溫箱中培養(yǎng)24h 后，菌液計(jì)數(shù)結(jié)果大致為5.0×107個(gè)/ml。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 分離培養(yǎng)鑒定結(jié)果

經(jīng)革蘭氏染色鏡檢，細(xì)菌的形態(tài)觀察從中成功分離培養(yǎng)出葡萄球菌2 株、鏈球菌1 株、大腸桿菌3 株。

2.2 藥敏試驗(yàn)

各菌株藥敏試驗(yàn)結(jié)果，見表2。

培養(yǎng)24h 后觀察，青、鏈霉素抑菌效果明顯，且多為高敏，而復(fù)方雙丁散多為高敏、中敏效果；在培養(yǎng)48h 觀察后，鏈霉素抑菌圈中長(zhǎng)有新的菌落，而復(fù)方雙丁散不同濃度的抑菌效果均有增加。

表2 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

3 復(fù)方雙丁散功效分析

本試驗(yàn)根據(jù)奶牛乳房炎的發(fā)病機(jī)理和中藥藥性選取具有清熱解毒、抗菌消炎、活血化瘀、消腫散結(jié)的12 種中藥材組成復(fù)方制劑。

主藥蒲公英和紫花地丁性味甘平、微苦寒，具有清熱解毒、尿通淋、消腫散結(jié)的功效，是治乳癰之要藥；金銀花性味甘寒、疏散風(fēng)熱、連翹性苦微寒、消癰散結(jié)。這3 種藥物結(jié)合在一起可以增強(qiáng)整個(gè)組方的療效。此外，本組方中還配上具有解毒消癰、排膿止痛作用的皂角刺、穿山甲等，及具有軟堅(jiān)散結(jié)、通乳作用的木通和王不留行等，再加上其他抗菌止痛、通經(jīng)活絡(luò)的藥物，諸藥配合使各種成分之間可以相互協(xié)調(diào)、補(bǔ)充。通過本試驗(yàn)可以看出，蒲公英、連翹和金銀花可作為防治奶牛乳房炎的主藥，這與王新等[4]報(bào)道相同。由此可見，采用中藥制劑防治奶牛乳房炎是一個(gè)研究方向。