兩種方法測定飼料中水溶性氯化物比較與分析

張馨月，宇 凌

（1.山東省單縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，山東 單縣 273700；2.山東省菏澤市動物疫病預(yù)防控制中心，山東 菏澤 274000）

GB/T 6439-2007 測定飼料中水溶性氯化物的原理是：將試樣中的氯離子溶解于水溶液中，硝酸稍加酸化，加入硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液使氯化銀沉淀，過量硝酸銀溶液用硫氰酸銨或硫氰酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定[1]。但實際工作中，待測飼料溶于水后溶液很難澄清，此過程繁瑣且耗時，給實際檢測工作造成諸多不便。筆者參照GB/T6439-2007，將此法稍作改進(jìn)，并多次在實際檢測工作中比對分析，認(rèn)為GB/T6439-2007改良法可以用來測定飼料中水溶性氯化物，用山東省計量認(rèn)證專家組提供的盲樣飼料，同一時間用兩種方法檢測飼料中水溶性氯化物，并將檢驗結(jié)果做比較與分析，以期為飼料檢測標(biāo)準(zhǔn)修改與新標(biāo)準(zhǔn)制定提供參考。

1 試驗材料

1.1 試驗儀器與器材

1.1.1 試驗儀器

電子分析天平/DT-100（上海科精生產(chǎn)，精確至0.001 g）、回旋振蕩器/HZQ-F160AC（深圳市賽亞泰科生產(chǎn)，35～40 r·min-1）、小型電動粉碎機(jī)、KQ3200DB超聲波清洗機(jī)（浙江溫州生產(chǎn)）、L-530A低速大容量離心機(jī)等。

1.1.2 試驗器材

燒杯、稱量瓶、稱樣匙、樣品篩（1 mm 篩孔）、500 mL 量筒、500 mL 容量瓶、50 mL 移液管，玻璃漏斗、10 mL 滴定管、玻棒、橡膠吸耳球、膠頭滴管、100 mL 三角燒瓶、燒杯、中速定量濾紙、100 mL具塞離心管等。

1.2 試劑

三級水（GB/T 6682）、正己烷、丙酮；

硝酸：ρ20（HNO3）=1.38 g·mL-1；

硫酸鐵銨飽和溶液：用硫酸鐵銨[NH4Fe(SO4)2·12H2O]制備；

硫氰酸氨標(biāo)準(zhǔn)溶液：ct（NH4SCN）=0.1 mol·L-1；

硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液：cs（AgNO3）=0.1025 mol·L-1。

1.3 試驗用飼料

由山東省技術(shù)監(jiān)督局計量認(rèn)證專家小組提供飼料盲樣。

2 試驗方法

2.1 國標(biāo)法與推薦法試樣制備

按GB/T 20195制備飼料樣品。

取飼料盲樣約500 g，用小型粉碎機(jī)粉碎，直至全部可通過樣品篩，混勻既為待測樣品。

2.2 試樣稱取

按GB/T 6439-2007 中8.2 不含有機(jī)物試樣試液的制備方法。稱取4 份待測樣品分別為7.509 5、7.739 2 與7.500 7、7.486 8 g，用漏斗轉(zhuǎn)移至500 mL容量瓶中，加入400 mL約20 ℃的水，邊加水邊用水緩緩沖洗漏斗，把漏斗中殘存的試樣粉末完全沖入容量瓶中，拿掉漏斗，蓋緊容量瓶塞后振搖容量瓶使試樣與水充分混勻。

2.3 試樣試液的混勻與過濾

2.3.1 國標(biāo)法試液混勻與過濾

再次確認(rèn)容量瓶塞塞緊后將容量瓶放至回旋振蕩器中振蕩30 min，用水稀釋至刻度（Vi），蓋緊瓶塞，混勻，避光靜置5 h。

用漏斗加中速定量分析濾紙過濾。過濾無法進(jìn)行時小心取下原濾紙，換新濾紙繼續(xù)過濾，直至燒杯內(nèi)濾液量足夠試驗用量（因試樣試液過稠，需要更換濾紙，且過濾速度極慢，此過程較耗時）。

2.3.2 推薦法試液混勻與過濾

再次確認(rèn)容量瓶塞塞緊后將容量瓶放至超聲波清洗機(jī)中振蕩5 min，用水稀釋至刻度（Vi），蓋緊瓶塞，顛倒混勻，再超聲1 min使其充分混勻。

分次取適量混濁試液至100 mL 具塞離心管，蓋緊塞子，離心機(jī)上離心數(shù)分鐘，取上清液于潔凈燒杯中，直至燒杯內(nèi)上清液足夠試驗用量。用超聲波處理30 s，使其充分混勻，待測。

2.4 滴定

分別用待測濾液沖洗3次移液管后，吸取50 mL（Va）濾液于三角燒瓶中，分別加入5 mL硝酸和2 mL硫酸鐵銨飽和溶液，再分別從加滿硫氰酸氨標(biāo)準(zhǔn)溶液至0 刻度的滴定管中滴加2 滴硫氰酸氨標(biāo)準(zhǔn)溶液。用另1支有硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液至0刻度的滴定管滴定，直至紅棕色消失，記錄滴定體積（Vs1）。

再加入5 mL 過量的硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液，劇烈搖動使深沉淀凝聚（必要時可加入5 mL正己烷助沉淀凝聚）。用硫氰酸氨標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定過量的硝酸銀溶液，直至產(chǎn)生紅棕色且保持30s不褪色。

2.5 空白試驗

兩法測定平行樣同時分別做空白較正：吸取50 mL 水于三角燒瓶中，分別加入5 mL 硝酸和2 mL 硫酸鐵銨飽和溶液，與滴定試樣同法操作。AgNO3空白（Vs0）為0.030 mL，NH4SCN 空白（Vt0）為5.250 mL。

2.6 滴定結(jié)果

2.6.1 國標(biāo)法滴定結(jié)果

硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定體積（Vs1）分別為2.425 與2.100 mL。硫氰酸氨標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定體積（Vt1）分別為6.300與5.940 mL。

2.6.2 推薦法滴定結(jié)果

硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定體積（Vs1）分別為2.440 mL與2.455 mL。硫氰酸氨標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定體積（Vt1）分別為6.320 mL與6.335 mL。

3 計算方法

3.1 計算公式

試樣中水溶性氯貨物的含量Wwc（以氯化鈉計），數(shù)值以%表示，按以下公式計算：

其中M 為氯化鈉物質(zhì)的量，M=58.44 mol·L-1；?為稀釋因子，?=2。

3.2 結(jié)果表述

結(jié)果表示為質(zhì)量百分?jǐn)?shù)（%），當(dāng)水溶性氯化物含量<1.5%時，結(jié)果精確至0.05%；水溶性氯化物含量≥1.5%時，精確至0.10%。

3.3 重復(fù)性

在同一實驗室同一操作人員，用同樣的方法和儀器設(shè)備，對同一樣品測定獲得的兩次獨立測試結(jié)果的絕對差值，大于（2）式計算得到的重復(fù)性限（r）的概率≤5%。

3.4 檢測結(jié)果

3.4.1 國標(biāo)法

分別將試驗數(shù)據(jù)代入公式（1），求得試樣兩平行樣檢驗結(jié)果，Wwc1（%）=2.187，Wwc2（%）=2.162，平均（%）=2.17。

3.4.2 推薦法

分別將試驗數(shù)據(jù)代入公式（1），求得試樣兩平行樣檢驗結(jié)果分別為：Wwc1（%）=2.179，Wwc2（%）=2.187，平均（%）=2.18。

3.5 結(jié)果分析

3.5.1 國標(biāo)法

絕對值差=2.187－2.162=0.025；重復(fù)性限（%）

因此測定結(jié)果符合重復(fù)性限規(guī)定。

3.5.2 推薦法

絕對值差=2.187-2.179=0.008；重復(fù)性限（%）

因此測定結(jié)果符合重復(fù)性限規(guī)定。

4 討論與結(jié)論

用GB/T 6439-2007 法測定飼料中水溶性氯化物時，需回旋式振蕩器振蕩30 min，此過程慢且試液易泄露，影響試驗準(zhǔn)確性；定容后靜置數(shù)小時才能過濾，消耗時間長，影響試驗進(jìn)度，過濾過程中更換濾紙，可能影響檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。

改良法參照GB/T6439-2007，用超聲波來代替回旋振蕩器，超聲處理數(shù)分鐘即可，不僅時間短且不易外溢，超聲波振蕩器是利用超聲波的發(fā)出的高頻聲波產(chǎn)生振蕩，可對溶液進(jìn)行高頻機(jī)械振蕩，從而對液體充分?jǐn)嚢瑁s短攪拌時間。用大容量離心機(jī)來代替過濾，不必再靜置數(shù)小時，也不需更換濾紙，可得到足夠試驗用量上清液，縮短試驗時間。缺點是超聲波處理可能會把待測試樣的細(xì)胞壁打碎，將飼料原料細(xì)胞中氯化物成分打碎，使其溶解在試液中，致使試樣水溶性氯化物含量偏高，影響檢測結(jié)果。因此超聲波振蕩時間需嚴(yán)格控制，不宜超過5 min。

同一種飼料，同時用GB/T 6439-2007法和GB/T 6439-2007 改良法兩種方法測定其水溶性氯化物含量，前者測得Wˉwc（%）=2.17，后者測得Wˉwc（%）=2.18。兩次獨立測試結(jié)果的絕對差值僅為0.01，相對偏差僅為0.23%，符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。

由兩種方法檢測的結(jié)果來看，GB/T 6439-2007改良法可以作為GB/T 6439-2007 測定飼料中水溶性氯化物含量的替代方法。