亞甲基四氫葉酸還原酶基因多態性與食管癌易感性關系的Meta分析

續文棟 張鵬(小) 呂朋 鄭鍇 田彥超 張鵬

根據2018年全球癌癥調查，全球食管癌病人新增57.2萬例，死亡50.9萬例，分別占癌癥發病和死亡的3.2% 和5.3%，食管癌的發病率和死亡率分別位居第7位和第6位[1]。葉酸是調節DNA正常甲基化并維持其完整性的重要物質，亞甲基四氫葉酸還原酶(methylenetetrahydrofolate reductase，MTHFR)是葉酸代謝的關鍵酶[2]。食管癌的發生與葉酸缺乏和代謝紊亂有關。有研究報道了MTHFR C677T和A1298C多態性在結直腸癌和胃癌的病因學中的作用，但其與食管癌的關系仍存在爭議[3-4]。識別食管癌遺傳因素的影響風險有助于促使早期干預[5]。MTHFR C677T多態性與前列腺癌、腸癌和賁門腺癌的關系已在高危人群中得到證實[6-8]。該研究的目的是確定MTHFR C677T和A1298C多態性與食管癌的相關性。

資料與方法

一、檢索策略

計算機檢索 PMedline(PubMed)，Embase，web of Science，Cochrane，wanted，CNKI，VIP并輔以手工檢索，收集國內外發表的有關 MTHFR 多態性與食管癌關系的病例對照或隊列研究，檢索日期截止 2019年9月30日。檢索關鍵詞：葉酸，MTHFR，食管癌，rs1801131以及rs1801133。

二、選擇標準

兩位作者獨立篩選標題和摘要識別相關研究，納入當前的Meta分析標準：(1)病例對照研究;(2)評估葉酸代謝遺傳變異(A1298C及C677T)與食管腫瘤的關系;(3)有足夠的資料評估或(和)95%CI，P值。排除標準為：病例報告、信函和綜述文章;只包括個案組;重復發表的文章。

三、數據提取

兩位作者從所有符合條件的研究中獨立提取數據：(1)第一作者姓名、出版日期、國家、種族和控制來源;(2)癌癥類型、病例和對照組的頻率、涉及的基因和對照組的HWE狀況。兩位作者之間的任何分歧都是通過討論和達成協議來解決的。

四、統計分析

所有分析由STATA 14.0(STATA Corp LP，College Station，TX，USA)進行。計數資料以相對危險度(relative risk，RR)及其95% CI表示。納入研究結果的異質性采用χ2檢驗。異質性檢驗(P>0.05，I2<50%)時采用固定效應模型[9]，否則采用隨機效應模型[10]。敏感性分析通過每次去除每個合格的研究來估計結果的穩定性。潛在的發表偏倚通過Egger's和Begg's檢驗進行評估，P<0.05為差異有統計學意義[11-12]。

表1 納入本Meta分析的19項研究的基本資料

結 果

1.納入文獻的特點：通過PubMed、EMBASE、web of Science、Cochrane、Wanfang、CNKI和VIP對論文摘要、標題或內容進行了篩選，篩選出281篇可能相關的研究，最終納入19篇已發表的研究，研究選擇的流程見圖1。所有納入的研究均為病例對照研究，其中MTHFR C677T基因多態性有15篇，研究MTHFR A1298C基因多態性有7篇。食管癌病例組2011例，對照組2661例。Hardy-Weinberg遺傳平衡檢驗分析樣本具有群體代表性(P>0.001)。所納入研究的特點見表1。

圖1 文獻檢索及篩選流程圖

2.C677T多態性與食管癌易感性的關系：2641例病人和3747例對照組C677T多態性的薈萃分析顯示C677T與食管癌風險之間無顯著相關性(T vs.C：OR=1.16，95%CI=0.98～1.38;CT vs.CC：OR=1.18，95%CI=0.97～1.43;TT vs.CC：OR=1.32，95%CI=0.95～1.84;TT+CT vs.CC：OR=1.21，95%CI=0.98～1.50;TT vs.CC+CT：OR=1.21，95%CI=0.93～1.57)。見圖2，表2。

表2 C677T多態性與食管癌易感性關系的Meta分析

圖2 等位基因模型中C677T(rs 1801133)與食管癌易感性關系的森林圖

3.A1298C多態性與食管癌易感性的關系：A1298C與食管癌風險之間存在顯著相關性(C vs.A：OR=1.14，95%CI=1.01～1.29;AC vs.AA：OR=1.18，95%CI=1.04～1.33;CC+AC vs.AA：OR=1.26，95%CI=0.44～2.23)。然后我們根據種族進行亞組分析，發現A1298C與亞洲人食管癌風險之間存在顯著的相關性(C vs.A：OR=1.16，95%CI=0.99～1.34;AC vs.AA：OR=1.17，95%CI=1.01～1.35;CC+AC vs.AA：OR=1.24，95%CI=1.02～1.52)。然而，在任何遺傳模型下，白種人患食管癌的風險沒有顯著的相關性。見圖3，表3。

4.異質性和敏感性分析：研究間異質性采用Q統計進行計算。異質性檢驗P>0.05時采用固定效應模型[9];另采用隨機效應模型[10]。敏感性分析是通過每次省略每個合適的研究來進行的。A66G和A1298C對食管癌風險影響的匯總表明，該研究的結果在統計學上是穩定的(圖4)。

5.發表偏倚：Begg和Egger的檢驗均被用于評估研究的發表偏倚[11-12]。結果表明，總體上沒有明顯的發表偏倚。

表3 A1298C多態性與食管癌易感性關系的Meta分析

圖3 等位基因模型中A1298C(rs 1801131)與食管癌易感性關系的森林圖

圖4 等位基因模型中Meta分析發表偏倚檢驗的Begg漏斗圖

討 論

葉酸可以為細胞中正常的DNA甲基化和核苷酸從頭合成提供甲基基團，但它必須在體內正常細胞中代謝才能發揮這一生物學功能。葉酸缺乏或代謝紊亂可能會影響細胞DNA的合成和完整性，導致在復制過程中DNA突變率增加[13]。MTHFR基因突變可降低MTHFR活性，導致血漿同型半胱氨酸濃度升高和葉酸代謝異常，干擾DNA合成和DNA損傷修復[14]。MTHFR基因是多態的，最常見的是C677T和A1298C多態。MTHFR基因上這兩個位點的改變會顯著降低其所編碼酶的活性，從而影響葉酸的代謝，導致體內葉酸代謝紊亂。

葉酸代謝基因變異與多種癌癥的風險相關，包括頭頸部、肺、乳腺和結直腸癌[15]。MTHFR基因C677T和A1298C多態性在食管癌的發生中起著重要的作用。陳康等[16]研究顯示，MTHFR基因C677T和A1298C基因型分布和等位基因頻率比較觀察組與對照組差異無統計學意義，MTHFR基因C677T和A1298C多態性與食管癌的發生無關，不是導致食管癌發生的原因，食管癌的發生可能與哈薩克族居民的飲食和生活習慣有關。王秀梅等卻在研究中得出結論，MTHFR基因C677T多態性是哈薩克族食管癌發生的危險因素[17]。Mazzuca等[18]研究認為，MTHFR C677T基因多態性與食管癌的發生有關，攜帶 TT 等位基因的個體有更高的發病風險。黃桂玲等[19]的研究認為，MTHFR C677T基因多態性可能與食管癌易感性無關，但與食管癌癌前病變易感性存在關聯性，攜帶MTHFR C677TT基因型和 TT 等位基因的個體發生食管癌癌前病變的危險性較高。劉靜等[20]的一項Meta分析探討了MTHFR基因多態性與中國人群食管癌易感性的關系，結果顯示，中國人群MTHFR基因C677T多態性與食管癌易感性有關，MTHFR基因A1298C多態性與食管癌易感性無關。Tan等[21]Meta分析認為，MTHFR基因A1298C多態性與食管癌的發生風險有關，可能是食管癌的危險因素。有關MTHFR基因C677T和A1298C多態性與食管癌發病關系的結論，仍存在較大的差異。

該研究顯示A1298C變異顯著增加食管癌的發病幾率。當前的研究結果應該謹慎解釋。本研究納入的對象以亞裔為主，可能存在不同種群食管癌發病類型不同，食管鱗癌、腺癌發生機制的不同產生的結論差異。因此，未來的研究應納入更多不同種族的研究對象，并對食管癌病理分型進行細化。某些亞組的受試者人數相對較少。由于缺乏原始資料，我們無法根據性別、年齡、生活方式等危險因素對食管癌易感性進行估計。食管癌發生可能是多基因聯合造成的，需對更多基因進行聯合檢測[22]。需要來自大規模多中心研究的數據來驗證葉酸代謝遺傳變異(A1298C和C677T)與食管癌易感性之間的關系，才能得出更準確、更具代表性的結果。