紅花注射液配伍穩定性研究

丁艷譜，李響明*，楊 琴，孫勝斌，2，姜國志，劉 鑫

(1.神威藥業集團有限公司，河北 石家莊 051430；2.中藥注射劑新藥技術開發國家地方聯合 工程實驗室，河北 石家莊 051430；3.河北省中藥注射劑工程技術研究中心，河北 石家莊 051430)

紅花注射液由紅花水提，再經2次醇沉、水沉、熱處理等精制工藝制得的滅菌水溶液。現代藥理研究顯示紅花注射液有抗凝血、抑制血栓形成、抗血小板聚集與黏附、改善血液流變學、改善微循環的作用[1]。臨床上用于治療閉塞性腦血管疾病、冠心病、脈管炎[2-3]。

紅花注射液的化學成分包括黃酮類化合物、聚乙炔類化合物、5-羥色胺類化合物、甾體類化合物、木質素類化合物、烷基二醇類化合物、有機酸類化合物和色素成分，其中總黃酮類化合物是該產品中最主要的化學成分，具有較好的臨床療效，應用廣泛，而關于紅花注射液臨床應用的配伍研究報道較少[4-5]。因此，本研究參照紅花注射液現行質量標準[6]中【用法與用量】在室溫環境中模擬配伍考察其穩定性，以期為指導紅花注射液的臨床應用提供參考。

1 試藥和儀器

1.1 試藥

紅花注射液(神威藥業集團有限公司)；5%、10%葡萄糖注射液(石家莊四藥有限公司)；羥基紅花黃色素A對照品(111637-201810，93.1%)；山奈酚對照品(1110861-201812，93.8%)，以上對照品均購自中國食品藥品檢定研究院。乙腈，色譜純；三乙胺、冰醋酸、甲醇、三氯化鋁均為分析純。

1.2 儀器

U3000高效液相色譜儀(戴安公司)；CPA225D 電子天平(Sartorius)；FE20酸度計(梅特勒-托利多)；不溶性微粒測定儀(天津市天大天發科技有限公司)；紫外可見分光光度計(日本島津公司)；電熱恒溫水浴鍋(北京科偉永興儀器有限公司)；滲透壓摩爾濃度測定儀(天津天河醫療器械有限公司)。

2 方法

2.1 配伍方法

紅花注射液現行質量標準【用法與用量】中已明確“治療閉塞性腦血管疾病，靜脈滴注，一次15 mL，用10%葡萄糖注射液250～500 mL稀釋后使用，每日1次，15～20次為1個療程。治療冠心病，靜脈滴注，每次5～20 mL，用5%～10%葡萄糖注射液250～500 mL稀釋后應用，每日1次，10～14次為1個療程，療程間隔為7～10日。治療脈管炎，肌內注射，每次2.5～5 mL，每日1～2次[6]。”為了提高滴注的順應性，降低疼痛反應的發生率，我公司在產品說明書中“建議滴速小于40滴/min，一般控制在15～30滴/min”。

因此本研究確定紅花注射液的稀釋液為5%、10%葡萄糖注射液，分別考察最小濃度、最大濃度時的配伍穩定性。結合滴速，可計算出最長滴注時間為11.2 h。綜上，本研究分別取5 mL紅花注射液與500 mL的5%、10%葡萄糖注射液在超凈臺下配伍；取20 mL紅花注射液與250 mL的5%、10%葡萄糖注射液在超凈臺下配伍，配伍后在室溫下靜置12 h，分別在0 h、1 h、2 h、4 h、6 h、12 h觀察配伍液的性狀，測定配伍液的pH值、不溶性微粒、摩爾滲透壓比、吸光度。有文獻[7]指出羥基紅花黃色素A、總黃酮是紅花注射液的有效成分，在配伍后0、12 h時測定配伍液的有效成分含量，確認臨床用藥中有效成分的穩定性。

2.2 檢測方法

2.2.1 性狀 目視，觀察配伍液的顏色，是否有氣體產生，有無渾濁或沉淀。

2.2.2 pH值 取配伍液，按中國藥典2015版四部通則0631測定pH值。

2.2.3 不溶性微粒 取配伍液，按中國藥典2015版四部通則0903測定不溶性微粒。

2.2.4 滲透壓摩爾濃度 取配伍液，按中國藥典2015版四部通則0631測定滲透壓摩爾濃度比。

2.2.5 吸光度 精密量取低濃度配伍液5 mL置25 mL量瓶中，加水至刻度搖勻；精密量取高濃度配伍液2.5 mL置100 mL量瓶中，加水至刻度搖勻。照紫外-可見分光光度法(中國藥典2015年版四部通則0401)，取相應濃度的葡萄糖注射液稀釋相同的倍數后為空白，在250～350 nm波長范圍內掃描。

2.2.6 羥基紅花黃色素A 參照紅花注射液現行質量標準(WS3-B-3825-98-2012)中【含量測定】羥基紅花黃色素A的方法測定。

供試品溶液的制備：取紅花注射液按“2.1”項下方法配伍后，即得。

測定法：精密吸取低濃度配伍方式的供試品溶液100 μL注入液相色譜儀；精密吸取高濃度配伍方式的供試品溶液10 μL，注入液相色譜儀。

2.2.7 總黃酮 參照紅花注射液現行質量標準(WS3-B-3825-98-2012)中【含量測定】總黃酮的方法測定。

供試品溶液的制備：取紅花注射液，按低濃度配伍方式配伍，精密量取10 mL配伍液，水浴蒸至近干，用甲醇轉移定容至10 mL量瓶中，搖勻，作為供試品溶液。取紅花注射液，按高濃度配伍方式配伍，精密量取15 mL配伍液置100 mL量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，作為供試品溶液。分別精密吸取2 mL供試品溶液置10 mL具塞試管中，照標準曲線制備項下的方法，自“加0.1 mol/L三氯化鋁溶液1.0 mL”起，依法測定吸光度。同時精密量取供試品溶液2 mL，置10 mL具塞試管中，加甲醇3.0 mL，置40 ℃水浴中，其余同上操作，作為空白溶液。從標準曲線上讀出供試品溶液中相當于山奈酚的量，計算，即得。

3 結果

根據“2.1”項下方法配伍后，分別再放置0 h、1 h、2 h、4 h、6 h、12 h按“2.2”項下方法檢測，得出試驗結果，見表1-表3。

表1 配伍液的性狀及pH值變化

表2 配伍液的不溶性微粒及滲透壓摩爾濃度的變化

表3 配伍液的吸光度、羥基紅花黃色素A及總黃酮的變化

續表3

從以上3個表中的數據可知，將紅花注射液分別與5%、10%葡萄糖注射液配伍成兩種濃度后，在超凈臺下室溫連續放置12 h，配伍液未發生變色、產氣、渾濁或沉淀的現象，配伍液始終呈黃色的澄明液體；pH值、摩爾滲透壓比穩定，幾乎無變化。與5%、10%葡萄糖注射液配伍后，配伍液的pH值、摩爾滲透壓比有差異，這與所用的葡萄糖注射液濃度有關。不溶性微粒數目主要取決于葡萄糖注射液中不溶性微粒的水平，放置過程中配伍液不溶性微粒數目無顯著變化。配伍液在250～350 nm波長范圍內掃描，發現在(266±2)nm處有最大吸收，在12 h內吸收度值穩定。本研究還測定了配伍液中有效成分的含量，放置12 h后羥基紅花黃色素A、總黃酮含量相對穩定。本次研究表明紅花注射液與5%、10%葡萄糖注射液配伍穩定。

4 討論

隨著紅花注射液的臨床廣泛應用，其不良反應也時有報道，目前已知的不良反應涉及中樞及外周神經系統、心血管系統、呼吸系統、胃腸系統、泌尿系統、皮膚及附件、全身性損害等，臨床表現主要有瘙癢、皮疹、惡心、嘔吐、頭暈頭痛、氣短氣促、呼吸困難、心悸、心律失常、血尿、排尿困難、發熱、寒戰等，嚴重者出現過敏性休克[8-10]。

紅花注射液不良反應的發生主要與兩方面有關，其一是患者自身的年齡[11]、基礎疾病、聯合用藥[12]，其二是中藥制劑藥效成分復雜，在工業生產中大分子蛋白類成分[13]、脂溶性成分[14-15]的殘留可能增加患者使用后不良反應的發生率。上述這些物質在使用后進入人體，均有可能參與人體的免疫反應，直接或間接吸附于血管壁上，降低小動脈、毛細血管的通透性，增強血管脆性，最終誘發各種疾病[16]。

中藥制劑引起不良反應的原因很多，可以從以下幾點努力，降低不良反應的發生率：①加強基礎研究，明確與之配伍有禁忌的、不適宜配伍的制劑，從理論指導臨床聯合用藥；②提高臨床醫患、醫護的防范意識，根據患者的自身疾病、生理、心理的差異制定科學、合理、有效的治療方案，使用前仔細詢問患者的用藥史、過敏史，必要時做皮膚過敏試驗等降低風險，使用后密切觀察用藥反應[17]；③制劑生產企業在說明書中增加警示語、用藥注意事項等安全性信息，持續優化生產工藝，降低致敏風險，提高產品質量。