凱氏定氮法測定豆類粗蛋白含量的消解條件探究

顏常盛

（核工業二七〇研究所，南昌330200）

已報道的蛋白質測定方法很多， 如凱氏定氮法、 雙縮脲法、 酚試劑法和紫外吸收法等［1-5］，主要可分為間接法和直接法兩類，較為經典的間接法為凱氏定氮法。 利用凱氏定氮法測量蛋白質含量時， 催化劑和濃硫酸使蛋白質中的碳氫化合物被氧化， 生成二氧化碳和水而逸出， 氮元素則轉化為氨根， 與硫酸根結合形成硫酸銨，存于消解液當中［6-7］。在強堿環境中， 對消解液進行蒸汽加熱， 使硫酸銨分解， 生成的氨氣隨水蒸氣蒸餾出來被過量的硼酸液吸收， 最后用鹽酸標準溶液或硫酸標準溶液進行滴定， 測定試樣中的氮含量，通過系數折算出蛋白質含量。

豆類是一類高蛋白、 高脂肪、 高碳水化合物的農作物， 主要可分為兩大類： 粗蛋白含量較高的豆類， 如黃豆和黑豆； 碳水化合物含量較高的豆類，如紅豆、赤豆和綠豆等。目前對于豆類粗蛋白含量的分析， 僅停留在對大豆和大豆制品的蛋白含量研究層面， 而對于其他豆類粗蛋白的分析測定基本上為空白。 全自動凱氏定氮儀的興起， 使各類領域內的分析人員， 在如何精準、 快速測定物質蛋白質含量的技術上做各種條件優化試驗，為大批量、 高效率地測定蛋白含量， 提供了有力的技術指導［8-9］。

本試驗以大豆、 黑豆、 赤豆和綠豆4 種常見的豆類為例， 利用全自動凱氏定氮儀較為全面地分析影響豆類粗蛋白含量測定的因素。 以樣品質量、 硫酸添加量、 消化溫度和消解時間為試驗變量， 通過單一變量試驗和正交試驗， 建立不同種類豆類粗蛋白的最優分析試驗模型， 為豆類蛋白質的測定， 提供既高效又精準的技術支撐。……