脂肪酸轉運體蛋白FATP4、CD36、FABP1在妊娠期肝內膽汁淤積胎盤中表達研究

陳韻潔 張晨 譚娟

[摘要] 目的 對脂肪酸轉運體蛋白FATP4、CD36以及FABP1在妊娠期肝內膽汁淤積癥孕婦胎盤中的表達進行研究。方法 選取該院2018年1—12月收治的40例孕婦，根據其是否合并妊娠期肝內膽汁淤積癥分成兩組，每組各20例。其中，觀察組為合并妊娠期肝內膽汁淤積孕婦，對照組為正常妊娠孕婦，對兩組孕婦的脂肪酸轉運體蛋白FATP4、CD36以及FABP1在胎盤上的表達水平進行檢測對比。結果 觀察組孕婦胎盤組織中脂肪酸轉運體蛋白FATP4、CD36以及FABP1的表達水平檢測結果分別為（20.7±2.1）（30.2±0.3）（29.3±0.4），與對照組相比（25.6±1.4）（16.8±0.2）（20.7±0.3），FATP4表達水平明顯降低，而CD36以及FABP1的表達水平則明顯增加（t=2.876，7.954，4.673， P<0.05）。結論 妊娠期肝內膽汁淤積孕婦的胎盤組織中脂肪酸轉運體蛋白FATP4、CD36以及FABP1表達水平均存在明顯變化，與其妊娠期肝內膽汁淤積導致胎盤組織脂肪酸運輸能力降低以及脂肪酸氧化代償性增高有一定的關系。

[關鍵詞] 脂肪酸轉運體蛋白; 妊娠期; 肝內膽汁淤積; 胎盤;表達水平

[Abstract] Objective To study the expression of fatty acid transporter proteins FATP4， CD36 and FABP1 in the placenta of pregnant women with intrahepatic cholestasis of pregnancy. Methods 40 pregnant women who were admitted to our hospital from January to December 2018 were selected. They were divided into two groups according to whether they were complicated with intrahepatic cholestasis during pregnancy， with 20 cases in each group. Among them， the observation group was pregnant women with intrahepatic cholestasis during pregnancy， and the control group was pregnant women with normal pregnancy. The expression levels of fatty acid transporter proteins FATP4， CD36 and FABP1 on the placenta were compared between the two groups of pregnant women. Results The detection results of the expression levels of fatty acid transporter proteins FATP4， CD36 and FABP1 in the placental tissues of pregnant women in the observation group were （20.7±2.1） （30.2±0.3） （29.3±0.4）， compared with the control group （25.6±1.4） （16.8±0.2） （20.7±0.3），the expression level of FATP4 decreased significantly， while the expression level of CD36 and FABP1 increased significantly（t=2.876，7.954， 4.673， P<0.05）. Conclusion There are significant changes in the expression levels of fatty acid transporter proteins FATP4， CD36 and FABP1 in the placental tissue of pregnant women with intrahepatic cholestasis during pregnancy， which is associated with reduced placental tissue fatty acid transport capacity and increased fatty acid oxidative substitutability due to intrahepatic bile siltation during pregnancy.

[Key words] Fatty acid transporter protein; Pregnancy; Intrahepatic cholestasis; Placenta; Expression level

臨床中，妊娠期肝內膽汁淤積癥是一種較為常見的妊娠期并發癥，可能導致胎兒早產或者是宮內窘迫、死胎等多種嚴重的不良妊娠結局發生。有研究顯示[1]，妊娠期肝內膽汁淤積癥引起的圍產兒死亡發生率約為11%～13%之間，其中，國外有研究報道顯示因不明原因導致的妊娠期孕產婦死胎以及死產情況中，由妊娠期肝內膽汁淤積癥造成的情況比率約在50%左右。以該院2018年1—12月收治的20例孕婦為例，對其胎盤組織中脂肪酸轉運體蛋白FATP4、CD36以及FABP1的表達水平進行檢測分析。

1? 資料與方法

1.1? 一般資料

選取該院收治的40例孕婦作為研究對象，根據其是否合并妊娠期肝內膽汁淤積癥分成兩組，每組各20例。其中，觀察組為合并妊娠期肝內膽汁淤積癥孕婦，其年齡在23～39歲之間，平均為（28.4±3.2）歲，孕產次在1～3次不等，平均為（2.4±1.2）次，生產孕周為36～41周，平均為（39.2±1.1）周，新生兒出生體重為2 680～3 850 g，平均為（3 260±250）g;對照組為正常妊娠孕婦，其年齡在22～39歲之間，平均為（28.2±3.5）歲，孕產次在1～3次不等，平均為（2.3±1.1）次，生產孕周為36～41周，平均為（39.1±1.2）周，新生兒出生體重為2 680～3 850 g，平均為（3 250±260）g。兩組孕婦在年齡、生產孕周以及孕產次等一般資料上差異無統計學意義（P>0.05），具有比較意義。

1.2? 病例選取標準

所選取孕婦均為單胎妊娠，且無其他妊娠期合并癥與并發癥情況，其中，對所選取妊娠期肝內膽汁淤積癥孕婦疾病均符合有關疾病診斷標準[2]。排除存在妊娠期病毒性肝炎以及脂肪肝、腎炎、膽管炎等肝、膽、腎部疾病孕婦;排除存在巨細胞病毒感染及免疫性疾病的孕婦;排除不同意該次研究的情況。該次研究經醫院倫理委員會批準， 征得受試對象知情同意。

1.3? 方法

臨床中，在兩組孕婦分娩生產時，在胎盤娩出30 min內，收集胎盤靠近母體面的中央絨毛區組織約10 g進行檢測分析，進行胎盤組織收集過程中注意避開鈣化與梗死部分。對收集胎盤組織放置在4℃溫度環境下，使用生理鹽水進行沖洗3次后防置在液氮下置于溫度為-80℃的冰箱中保存，以待檢測分析。同時注意提取同樣部位與體積大小的新鮮組織，放置在含有4%的多聚甲醛溶液中進行免疫組化實驗分析使用。檢測使用儀器和試劑為：免疫組化實驗分析采用abcam 廠家提供的FATP4抗體，Leica novocastra NovoLink聚合物檢測系統，RE7280-K檢測試劑盒等;定量PCR檢測采用Invitrogen公司的SYBR Green qPCR SuperMix，定量PCR儀為ABI PRISM 7500 Sequence Detection System。此外，應用免疫組化方法對兩組胎盤組織的長鏈脂肪酸轉運蛋白定性和定量檢測;運用實時聚合酶鏈式反應（RT-PCR）Western印跡法檢測胎盤組織中脂肪酸轉位酶/白細胞分化抗原36（FAT/CD36）和跨膜脂肪酸結合蛋白（FABP1）的表達水平，并對兩組孕婦胎盤組織中的脂肪酸轉運蛋白FATP4、CD36以及FABP1表達水平檢測結果進行觀察對比。

1.4? 統計方法

采用SPSS 21.0統計學軟件對上述數據資料進行統計分析，計量資料采用t檢驗，以均數±標準差（x±s）表示，P<0.05為差異有統計學意義。

2? 結果

病例組胎盤組織中FATP4表達水平與對照組FATP4水平比較，差異有統計學意義。見圖1。

觀察組孕婦胎盤組織中脂肪酸轉運體蛋白FATP4、CD36以及FABP1的表達水平檢測結果與對照組對比，差異有統計學意義（P<0.05），如表1所示。

3? 討論

妊娠期母體對胎兒的各種營養物質傳遞和支持是通過胎盤實現的[3]。有研究顯示，母體通過胎盤為胎兒提供營養物質時，除單純的擴散作用外，還能夠通過胎盤組織的細胞膜中載體蛋白進行胎兒生長發育所需的營養物質協助轉運[4]。其中，協助長鏈脂肪酸轉運蛋白家族（FATPs）、脂肪酸轉運酶（FAT/CD36）、跨膜脂肪酸結合蛋白（FABPpm），都是實現妊娠期通過胎盤從母體向胎兒提供營養物質轉運及代謝過程中具有協助作用的載體蛋白類型。其中，有研究顯示[5]，通過建立高脂飼料喂養肥胖孕鼠模型，并對其胎盤組織中的脂肪酸轉運體蛋白表達水平進行檢測分析顯示，其胎盤組織中的脂肪酸轉運體蛋白FATP1參與脂肪酸轉運，而FATP4和CD36則與脂肪酸氧化有關。并且對該表達變化分析得出可能與孕鼠模型合并肝內膽汁淤積的發生有關。該研究中還指出，孕鼠模型的胎盤組織中脂肪酸跨膜轉運不僅具有單純擴散作用，而且還能夠利用長鏈脂肪酸轉運蛋白結合進行脂肪酸轉運，其中，脂肪酸轉運蛋白表達水平能夠反映出不同的脂肪酸運輸與代謝能力[6]。

上文中，對該院收治的40例合并肝內膽汁淤積與未合并肝內膽汁淤積孕婦的胎盤組織中脂肪酸轉運體蛋白FATP4、CD36以及FABP1表達水平進行檢測對比顯示，觀察組孕婦FATP4表達水平與對照組相比明顯降低，而CD36以及FABP1的表達水平與對照組相比則明顯增加，由此可見，妊娠期肝內膽汁淤積導致胎盤組織脂肪酸運輸能力降低以及脂肪酸氧化代償性增高，從而引起孕婦胎盤組織中的有關脂肪酸轉運體蛋白表達水平變化。這是由于脂肪酸作為機體內的最大能量儲存，能夠通過β一氧化途徑在應激反應時對能量生成及其提供產生作用影響，而脂肪酸的分解代謝完全是氧化的，胎兒大量的能量需求使母體代謝轉向酮體生成，胎兒利用母體酮體生成脂肪并作為能量產物[7-8]。因此，對母體胎盤組織中脂肪酸轉運體蛋白表達的檢測，與對其脂肪酸轉運能力判斷，從而對其妊娠結局進行合理預測并加強干預，以確保母嬰安全，具有十分積極的作用和意義[9]。

綜上所述，妊娠期肝內膽汁淤積孕婦的胎盤組織中脂肪酸轉運體蛋白FATP4、CD36以及FABP1表達水平均存在明顯變化，與其妊娠期肝內膽汁淤積導致胎盤組織脂肪酸運輸能力降低以及脂肪酸氧化代償性增高有一定的關系。

[參考文獻]

[1]? 徐珊，宋麗華，張小菜，等.護肝利膽湯加減聯合熊去氧膽酸治療妊娠期肝內膽汁淤積癥療效觀察[J].海南醫學，2019，30（15）：1924-1927.

[2]? 徐鋒，陳鈺，孟西娜，等.妊娠期肝內膽汁淤積癥患者胎盤ERp29、PRDX6表達及臨床意義[J].中國婦幼保健，2019，34（4）：916-918.

[3]? 陳芳，趙愛民，肖海望，等.妊娠期肝內膽汁淤積癥與母體免疫失衡的相關性[J].山西醫藥雜志，2017，46（13）：1621-1623.

[4]? 葉云飛，蒙文霞，陳瀅，等.STAT3在妊娠期肝內膽汁淤積癥孕婦胎盤中的表達及意義[J].重慶醫學，2019，48（11）：1866-1869.

[5]? 李曉林.妊娠期肝內膽汁淤積癥孕婦胎盤組織NF-κB、IL-17和TLR4表達與妊娠結局的關系研究[J].中國婦幼保健，2018，33（22）：5092-5096.

[6]? 倪惠華，曉霄，李娟，等.S-腺苷蛋氨酸聯合利膽藥對妊娠期肝內膽汁淤積癥的療效分析[J].中國現代醫學雜志，2018，28（26）：100-103.

[7]? 楊麗娟，葛靜，潘華，等.HLA-F在ICP患者胎盤組織中的表達及意義[J].河北醫藥，2017，39（23）：3539-3541.

[8]? 闞延婷，楊永峰.膽汁淤積性肝病相關基因及其在妊娠期肝內膽汁淤積癥中的作用[J].臨床肝膽病雜志，2019，35（7）：1439-1443.

[9]? 劉莉娜，武偉琦.妊娠期肝內膽汁淤積癥孕婦臨床特點及妊娠結局分析[J].中國臨床新醫學，2017，10（7）：668-671.

（收稿日期：2020-02-20）