谷氨酰胺和丙酮酸鈉對NK-92 細胞體外擴增的影響

應丹妮, 陳煥蕓, 付 巖, 蔡海波, 譚文松

(華東理工大學 生物反應器工程國家重點實驗室, 上海 200237)

1 前 言

免疫效應細胞由于其獨特的殺瘤能力和治療優勢使其在腫瘤疾病治療中備受矚目[1-2]。在治療過程中，為了獲得滿意的臨床效果，需要分離患者自體免疫效應細胞通過體外擴增技術獲得符合臨床要求的細胞數量。由于從腫瘤患者體內難以采集大量免疫效應細胞，且收獲的細胞質量受患者身體狀況影響很大，常常無法實現有效擴增，不僅使患者遭受巨大痛苦，也影響治療效果[3-4]。因此，如何提高免疫細胞體外擴增效果并維持其殺傷活性是亟待解決的問題[5-7]。

氨基酸作為哺乳動物細胞培養基中的重要成分，其不僅是細胞增殖所需生物大分子的合成原料，某些氨基酸也可作為能源物質為細胞體外擴增提供ATP，除此之外，還可以作為嘌呤、嘧啶、氨基糖和抗氧化劑合成的底物，參與其他生物合成途徑去維持細胞的完整和功能[8]。研究發現，當免疫效應細胞被激活時，抑制氨基酸轉運蛋白的表達從而阻礙氨基酸的攝取時，會抑制它的擴增和功能[9-13]。同時丙酮酸是多種氨基酸合成的起始化合物，免疫效應細胞受到刺激時會通過丙酮酸羧化酶加速丙酮酸氧化以促進免疫細胞的增殖[14]。由此可見，優化培養基中氨基酸種類和濃度是免疫細胞體外擴增過程中的關鍵環節。而有血清培養基成分復雜，現有商業化無血清培養基中的氨基酸濃度通常也是保密的，無法使用現有的培養基進行優化以適滿足細胞需求[15]。……