加味黃連解毒湯抗大鼠炎癥性發(fā)熱的實(shí)驗(yàn)研究

高天妹 孫靜 佟欣 司御臣 張兵儒 馮彤 張璐瑤 曹金燦 呂金夢 張海潮

【摘 要】 目的：觀察加味黃連解毒湯水煎劑對(duì)炎癥性發(fā)熱大鼠指標(biāo)的影響。方法：以LPS建立大鼠炎癥性發(fā)熱模型，并同時(shí)灌胃給予加味黃連解毒湯水煎劑高、中、低劑量，并與灌胃純凈水組（稱常模組）進(jìn)行對(duì)比，檢測大鼠血常規(guī)，肛溫，白細(xì)胞介素1指標(biāo)，并對(duì)各組大鼠進(jìn)行血液流變學(xué)指標(biāo)檢測，同時(shí)檢測各組大鼠NO水平。結(jié)果：與常模組比較，加味黃連解毒湯各組與成藥組檢測大鼠血清指標(biāo)均低于常模組，高劑量組更明顯，加味黃連解毒湯各組的血清一氧化氮檢查均優(yōu)于成藥組。結(jié)論：加味黃連解毒湯水煎劑能有效地治療大鼠炎癥性發(fā)熱。

【關(guān)鍵詞】 加味黃連解毒湯 炎癥性發(fā)熱 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

加味黃連解毒湯由黃芩、黃連、黃柏、梔子、大黃5味藥物組成，為清熱解毒代表方劑，用于治療實(shí)熱火毒，三焦熱盛引起的大熱煩渴，口燥咽干之證。現(xiàn)代常用本方治療細(xì)菌感染性疾病所致的高熱、煩渴等癥[1]。本實(shí)驗(yàn)擬建立炎癥性發(fā)熱大鼠模型，并以加味黃連解毒湯水煎劑干預(yù)，研究其解熱抗炎作用，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 ?材料與方法

1.1 ?動(dòng)物 ?健康清潔級(jí)SD大鼠52只，雌雄各半，體重180-220g，購自河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心。合格證編號(hào)為1504031，發(fā)證單位為河北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

1.2 ?試劑 ?LPS試劑、碘[125]白細(xì)胞介素1β放射免疫分析試劑盒（北京中生北控生物科技股份有限公司，批號(hào)201406）、一氧化氮（NO）試劑盒（南京建成生物工程研究所，貨號(hào)A012）。

1.3 ?儀器 ?TDL-5-A型離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）、TGL-16G冷凍離心機(jī)和常溫臺(tái)式離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）、FA2004型上皿電子天平（上海精科天平儀器廠）、獸用血液細(xì)胞分析儀、灌胃器。

1.4 ?藥物 ?加味黃連解毒湯：大黃6g、黃連9g、黃芩6g、黃柏6g、梔子9g，購自石家莊樂仁堂藥店。加味黃連解毒湯水煎，一煎加10倍水浸泡半小時(shí)后，進(jìn)行煎煮，共計(jì)30min過濾煎液;二煎加8倍水，煎煮30min，過濾煎液，合并兩次煎液，按1：1比例濃縮后，用蒸餾水配置成所需濃度。

1.5 ?造模 ?SD大鼠60只，適應(yīng)性喂養(yǎng)3天，每日早晚各一次對(duì)大鼠施行適應(yīng)性測量肛溫操作，實(shí)驗(yàn)前 6 h 禁食不禁水。測大鼠基礎(chǔ)體溫并篩選出體溫波動(dòng)較小的50只大鼠，均腹腔注射脂多糖 100 ug/kg，篩選出體溫相似的發(fā)熱大鼠40只。

1.6 ?分組及給藥 ?將發(fā)熱大鼠隨機(jī)分為4組，每組10只，空白組，加味黃連解毒湯低、中、高劑量組，同時(shí)LPS（100μg/Kg）注射，加味黃連解毒湯100%濃度水煎液、加味黃連解毒湯50%濃度水煎液、加味黃連解毒湯25%濃度水煎液進(jìn)行灌胃。

1.7 ?觀察指標(biāo) ?檢測血液NO，白細(xì)胞介素1，體溫，血常規(guī)。

1.8 ?統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 ?以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩樣本間比較采用t檢驗(yàn)，多樣本兩兩比較采用方差分析。統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 22.0進(jìn)行處理。

2 ?結(jié) 果

2.1 ?各組白細(xì)胞介素1含量變化比較

加味高組白細(xì)胞介素1含量明顯低于空白組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），加味低組白細(xì)胞介素1含量并未有所下降，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），加味中組白細(xì)胞介素1含量也是低于空白組，但高于加味高組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

2.2 ?各組一氧化氮（NO）含量變化比較

加味高、中、低組一氧化氮含量均低于空白組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），其中加味高組一氧化氮含量水平明顯低于空白組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。

2.3 ?體溫變化

與空白組比較，加味高、中、低組最大體溫上升高度無明顯差異，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P >0. 05），三組體溫均呈顯著性降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），與加味低組比較，加味中、高組體溫下降更顯著。

3 ?討 論

中醫(yī)火熱證與西醫(yī)炎癥發(fā)熱病理過程基本類同，或大同小異 [2]。作為清熱藥物最重要的活性應(yīng)當(dāng)是 “清熱”，其中，解熱作用是最為主要的[3] 。已有研究表明黃連解毒湯具有較好的解熱、抗菌、抗炎等作用 [4]。本課題加味大黃，大黃具有清熱瀉火、涼血解毒的作用，可加強(qiáng)黃連解毒湯的解熱抗炎作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，加味黃連解毒湯高濃度能明顯降低白細(xì)胞介素1、一氧化氮含量，顯著抑制發(fā)熱的產(chǎn)生，為其臨床用于治療感染性疾病提供了一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

【參考文獻(xiàn)】

[1] 趙保勝，劉永剛，王秀麗.黃連解毒湯解熱抗炎作用研究[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2009，15（11）：55-57.

[2] 周立東.中醫(yī)火熱證與炎癥發(fā)熱的比較研究[A]. 中國中西醫(yī)結(jié)合基礎(chǔ)理論專業(yè)委員會(huì).全國中西醫(yī)結(jié)合基礎(chǔ)理論學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C].中國中西醫(yī)結(jié)合基礎(chǔ)理論專業(yè)委員會(huì)：2004：2.

[3] 宋建華.金銀花解熱抗炎作用的實(shí)驗(yàn)[J].研究重慶醫(yī)學(xué)，2011; 40（25）∶2552-2553.

[4] 張麗美.李貴海.黃連解毒湯的藥理及臨床研究進(jìn)展[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥，2007，18（7）：1635-1637.

作者簡介：高天妹（1994-），女，漢族，河北滄州市人，研究生在讀，醫(yī)師，單位：華北理工大學(xué)中醫(yī)學(xué)院，研究方向：中醫(yī)治療內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病。