牛羊布魯氏菌病臨床樣品采集技術(shù)要點

動物疫病監(jiān)測是動物防疫的重要組成部分，它不僅涉及重大動物疫病的預(yù)防和控制、公共衛(wèi)生安全和畜牧業(yè)的發(fā)展，還涉及消費者的健康。收集動物疾病材料是進(jìn)行動物疾病監(jiān)測的前提。動物病料的采樣方法、采樣點、采樣量和樣品保存質(zhì)量直接決定了檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和科學(xué)結(jié)論，對動物疾病診斷、流行病學(xué)調(diào)查、免疫監(jiān)測、動物疫病防治等有重要影響。因此，動物疫病病料的收集和保存是基層防疫人員必須掌握的一項實用技術(shù)。

1 ?采樣前準(zhǔn)備工作

1.1 ?采樣人員

抽樣人員應(yīng)具備相關(guān)的專業(yè)知識和熟練的抽樣技能，并能正確使用采樣工具，準(zhǔn)確掌握取樣目的，樣品類型和數(shù)量。

1.2 ?采樣物品與器具

一次性PE手套、乳膠手套、防護(hù)帽、護(hù)目鏡、防護(hù)口罩、防護(hù)服、橡膠靴等。10毫升一次性采血針、75%酒精棉球、碘棉、試管架、剃毛器等。10毫升滅菌試管或離心管，試管架、新潔爾滅消毒劑。采取流產(chǎn)胎兒和流產(chǎn)病料時，準(zhǔn)備無菌鑷子、剪刀、手術(shù)刀、無菌盤、無菌棉簽、75%酒精和棉球、酒精燈等。準(zhǔn)備采樣清單、簽字筆、記號筆、保溫箱或保溫瓶，易于密封的樣品袋、塑料包裝、膠帶、密封膜、密封圈、冰袋、貼紙等，將采樣物品裝備齊全，避免采樣時手忙腳亂。

2 ?病料采集原則

嚴(yán)禁對疑似炭疽病的動物進(jìn)行尸檢。對于血液凝固不良和天然口出血的病（死）動物，應(yīng)收集來自耳尖的血液，以確認(rèn)動物是否盡患有炭疽，加以診斷。取樣時需要無菌操作，以免外源性污染和樣品交叉感染。在解剖取樣過程中，應(yīng)首先從胸腔到腹腔收集實質(zhì)器官，然后收集容易污染的組織和器官，如腔腸組織及其內(nèi)容物。收集的牛羊布魯氏菌病料必須具有代表性。收集的動物器官和組織應(yīng)該是有明顯病變的部位，應(yīng)根據(jù)不同的疾病（或檢查目的）收集相應(yīng)的血液樣本，新鮮組織、器官、腸內(nèi)容物、分泌物、排泄物或其他物質(zhì)。當(dāng)無法確定發(fā)病原因時，應(yīng)系統(tǒng)地收集相關(guān)病料數(shù)據(jù)。牛羊布魯氏菌病料的采集最好在使用治療藥物之前進(jìn)行。藥物使用將影響樣品中病原微生物的檢測。死亡動物的內(nèi)臟病變材料的收集應(yīng)在死亡后立即進(jìn)行，不遲于6小時。在采集血樣前，一般要求牛羊禁食8小時。應(yīng)根據(jù)血液樣本采集血樣，確定血液采集方法和位置。取樣時應(yīng)考慮采樣人員自身防護(hù)，環(huán)境消毒和病死牛羊無害化處理，以防止人畜共患感染。

3 ?不同樣品的采集

3.1 全血樣品的采集

從頸靜脈或尾靜脈收集血液。用無菌注射器抽取0.5～1毫升的5%枸櫞酸鈉溶液（0.1毫升檸檬酸鈉溶液可以抗1毫升血液凝結(jié)）并將其注入滅菌的離心管中。將5～10毫升無菌血液加入離心管中并充分混合，將離心管緊緊蓋住并貼上標(biāo)簽。

3.2 ?血清樣品的采集

用頸部靜脈或尾靜脈無菌收集血液，用10毫升一次性注射器抽取3～5毫升。將無菌試管置于傾斜表面上，并在完全凝固后豎立血液。在血清完全分離或離心后，用無菌注射器吸取血清并注入無菌離心管中。

3.3 ?乳汁樣品的采集

采集前使用消毒劑徹底消毒雙手，同時，消毒劑消毒整體乳房及乳頭部位。首先，丟棄最初擠出的奶樣，然后，無菌采取10～20毫升奶樣，注入滅菌管或離心管中進(jìn)行標(biāo)記。奶樣品無須冷凍，加熱或劇烈搖動。

4 ?采樣單及標(biāo)簽的填寫

逐項填寫取樣清單和樣品標(biāo)簽，將取樣列表放入塑料袋中，然后將樣品送到獸醫(yī)實驗室。樣品采集后，樣品編號應(yīng)標(biāo)在包裝袋上，以免混淆不同的樣品。 客戶應(yīng)認(rèn)真準(zhǔn)確地填寫“客戶樣品登記表”或“樣品檢驗表”。標(biāo)明被檢查單位的信息，如農(nóng)場名稱，被檢查人員姓名，動物種類，年齡和數(shù)量等，并明確動物的臨床表現(xiàn)，如發(fā)病率、死亡率、臨床表現(xiàn)、病理變化、免疫程序和藥物使用等。登記文件將與患病材料一起送到實驗室，進(jìn)行檢測。

作者簡介：胡世欣（1968-），男，獸醫(yī)師。主要從事動物疫病防控和畜牧發(fā)展工作。