吡蚜酮、丁醚脲QuECheRs 方法的優化分析

吳琳

梧州市食品藥品檢驗所 廣西梧州 543000

經查文獻，吡蚜酮的分子結構的平面化程度比較高（含有環狀平面結構），凈化過程中具有平面層狀結構的GCB 對平面化合物具有吸附作用，凈化劑中含有GCB 對吡蚜酮有吸附作用，進而造成加標回收不理想，因此設計實驗方案時，應做凈化劑是否含GCB 的比對；丁醚脲易水解、見光易分解，會生成丁醚脲-酰胺、丁醚脲- 脲和丁醚脲-甲酰胺3 種分解產物，在預實驗中加入丁醚脲的降解產物丁醚脲- 脲和丁醚脲-甲酰胺離子進行監測，在ADD 中都發現丁醚脲- 脲和丁醚脲-甲酰胺的存在；因此實驗過程中應避光，盡可能簡化實驗步驟[1]。

1 實驗過程

1.1 實驗設計

設置了①2．5g NaCl、②2．5g MgSO、③2．5g MgSO4+0.5g NaCl3 種提取鹽包，A（150mg MgSO4+50mgPSA）、B（150mg MgSO4+50mgPSA+50mg GCB）2 種凈化劑；然后分別對鹽包加凈化劑進行了六組實驗。

1.2 實驗步驟

1．00g 茶葉樣品→+5mL 超純水+10mL 乙腈→旋渦振蕩3min →加入提取鹽包→旋渦2min，9500r/min 離心5min →取上清液1．00mL 到凈化管中→旋渦振蕩1min，15000r/min 離心4min →移取上清液0．50mL+0．50mL 水，混合均勻，過濾，上機。

對照S 用空白樣品按以上步驟提取所得基質配制，上機濃度為100ng/mL；加標回收實驗，將配制好的丁醚脲、吡蚜酮儲備液加入到空白樣品中，同樣按照上述步驟進行操作[2]。

1.3 實驗結果

（1）加入GCB 吸附劑效果圖如下，茶葉中的色素基本上被吸附了。

（2）未加GCB 吸附劑的效果圖，葉綠色未被吸附

（3）回收率實驗結果如下：

項目 加標回收率結果/%①+A ②+A ③+A ①+B ②+B ③+B吡蚜酮 10.38 66.63 24.47 0.83 4.04 2.09 10.26 68.31 24.26 1.08 4.11 2.03丁醚脲 69.99 72.78 97.64 97.05 75.20 67.72 67.52 74.63 98.14 96.47 76.25 65.93

1.4 結果討論

通 過 以 上 結 果 可 看 出， 凈 化 劑B（150mg MgSO4+50mgPSA+50mg GCB）中含有GCB，吡蚜酮的回收率為0．95%-4．07%，回收率非常低，說明GCB 對具有平面結構的吡蚜酮確實有吸附作用，凈化劑A（150mg MgSO4+50mgPSA）中未含GCB，回收率有較大提升，其中②+A（以2．5g MgSO4 提取，用150mg MgSO4+50mgPSA 凈化）回收率：67．47%較為理想；

丁 醚脲在這6 種提取 方法的回收 率：66．83%-97．89%，其 中 ③+A（ 以2．5g MgSO4+0．5g NaCl 提 取， 用150mg MgSO4+50mgPSA 凈 化）、 ①+B（ 以2．5g NaCl 提 取， 用150mg MgSO4+50mgPSA+50mgGCB 凈化）的提取方法較為理想，均有95%以上。

2 吡蚜酮實驗再優化

2.1 優化過程

根據以上實驗，GCB 吸附劑對吡蚜酮有吸附作用，那在凈化劑中加入C18 是否會對吡蚜酮的加標回收率有影響，以及實驗最后一步凈化液與水1：1 稀釋是否存在基質效應對實驗結果有影響[3]。在前面優化好的提取條件（以2．5g MgS04 鹽包提取）基礎上，加入C18 對吡蚜酮回收率進行考察，同時最后一步分別以凈化液與水（1:1）、（1:4）稀釋，混合均勻，上機，考察方案如下：

A：1 5 0 m g M g S O 4+5 0 m g P S A；B 1 5 0 m g MgSO4+50mgPSA+50mg C18

最后一步取凈化液+水稀釋比例：

（1）（1:1）取上清液500μL+500μL 水混合均勻；

（2）（1:4）取上清液200μL+800μL 水混合均勻。

2.2 考察結果

項目 加標回收率結果/%A（1:1） B（1:1） A（1:4） B（1:4）吡蚜酮 50.03 66.67 67.89 81.12 51.20 69.12 65.70 80.36

2.3 結果討論

根 據 以 上 實 驗 結 果， 凈 化 劑B（150mg MgSO4+50mgPSA+50mg C18）組的回收率更優于凈化劑組A（150mg MgSO4+50mg PSA），加 入C18 對 吡 蚜 酮 的 回 收率有所提升；最后一步的稀釋（1:4）較（1:1）的稀釋比例更優，即B（1:4）方 案（以2．5g MgS04 鹽 包 提 取，用150mg MgSO4+50mgPSA+50mg C18 凈化，取凈化液200μL+800μL水混合均勻，上機）回收率達到80．7%。

3 結語

吡蚜酮實驗，GCB 吸附劑會對平面結構物質有吸附作用，所以在凈化劑中不能加入GCB 吸附劑，最后一步稀釋過程選擇用（1：4）取上清液200μL+800μL 水混合均勻，上機，盡可能減少基質效應。