嚴(yán)重冷凝集標(biāo)本對(duì)血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果的影響分析

安立斌

（沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院，遼寧 沈陽(yáng) 110000）

血常規(guī)為臨床最為基本的一種血液檢驗(yàn)方法，液體與有形細(xì)胞組成血液，采取血常規(guī)檢驗(yàn)?zāi)軌驅(qū)ρ寒?dāng)中的細(xì)胞成分進(jìn)行檢驗(yàn)，與此同時(shí)在血液當(dāng)中存在三種功能存在差異的細(xì)胞，即：紅細(xì)胞、白細(xì)胞以及血小板。通過(guò)血常規(guī)檢測(cè)，進(jìn)一步對(duì)血液細(xì)胞的數(shù)量變化及形態(tài)分布情況，對(duì)疾病進(jìn)行分析判斷[1]。在臨床診療工作中，血常規(guī)檢查是常規(guī)檢測(cè)手段，能夠?yàn)榛颊呦嚓P(guān)疾病患者的病情提供客觀、科學(xué)的有效依據(jù)。近年來(lái)，臨床研究表明：在臨床血常規(guī)檢測(cè)過(guò)程中，容易受到冷凝集干擾因素的影響。對(duì)于冷凝集素來(lái)說(shuō)，屬抗紅細(xì)胞抗原的IgM抗體；當(dāng)冷凝集素處于0～5 ℃條件下，會(huì)和人紅細(xì)胞產(chǎn)生凝集作用，通過(guò)加溫處理在超過(guò)25 ℃的情況下凝集會(huì)消除，當(dāng)溫度降低則凝集會(huì)再次出現(xiàn)，對(duì)患者的自身血清與紅細(xì)胞根據(jù)比例混合之后，基于0～5 ℃的條件下，能夠觀察到凝集現(xiàn)象[2]。此外，國(guó)內(nèi)有學(xué)者經(jīng)研究表明，嚴(yán)重冷凝集標(biāo)本會(huì)對(duì)血常規(guī)檢測(cè)的結(jié)果產(chǎn)生很大程度的影響，因此便有必要采取有效處理方法，確保血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確率[3]。鑒于此，本課題針對(duì)本次將我院于2017年1月至2018年1月收集的嚴(yán)重冷凝集血常規(guī)標(biāo)本36份作為研究的對(duì)象（來(lái)自36例患者），其目的是分析探討嚴(yán)重冷凝集標(biāo)本對(duì)血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果的影響，具體研究成果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：本次將我院于2017年1月至2018年1月收集的嚴(yán)重冷凝集血常規(guī)標(biāo)本36份作為研究的對(duì)象（來(lái)自36例患者），均知情簽署相關(guān)診療同意書(shū)，且均經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批通過(guò)；其中，男性20例、女性16例；年齡9～72歲，平均為（46.8±1.3）歲；疾病類型為：8例為肺炎支原體感染患者、8例為肝硬化患者、10例為自身免疫性溶血性貧血患者、7例為系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者、3例為白血病患者。首次進(jìn)血常規(guī)檢測(cè)，結(jié)果顯示存在顯著異常的問(wèn)題，儀器顯示紅細(xì)胞凝集，且獲得血涂片證明。此外，因?yàn)閲?yán)重冷凝集標(biāo)本發(fā)生較少，所收集的標(biāo)本在時(shí)間上存在差異，難以集中進(jìn)行處理，所以在臨床工作過(guò)程中針對(duì)這些嚴(yán)重冷凝集標(biāo)本采取了及時(shí)檢測(cè)的方法，并進(jìn)一步對(duì)檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行詳細(xì)記錄。

1.2 方法：針對(duì)本次36份嚴(yán)重冷凝集血常規(guī)標(biāo)本，考慮到擇優(yōu)選擇處理方法，因此采取了四種方法進(jìn)行處理，起到對(duì)比的作用，包括：直接上機(jī)法，37 ℃水浴法，血漿置換法，預(yù)稀釋法。具體檢測(cè)方法步驟如下：①儀器及試劑的選取：本次在全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀方面，選擇由日本SYSMEX公司生產(chǎn)的XN-1000型號(hào)全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀，同時(shí)配套相應(yīng)的試劑及質(zhì)控品。針對(duì)儀器需每天進(jìn)行常規(guī)維護(hù)保養(yǎng)處理措施，對(duì)于高、中、低質(zhì)控結(jié)果都在可控范圍內(nèi)。此外，選擇使用珠海貝索生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的瑞氏染液，并使用美國(guó)BD公司生產(chǎn)的真空采血管。②初步處理：于清晨空腹?fàn)顟B(tài)，抽取患者外周靜脈血2 mL，采血過(guò)程選擇使用乙二胺四乙酸二鉀抗凝真空采血管，進(jìn)一步進(jìn)行完全混勻處理；對(duì)每1例患者分別采集標(biāo)本2管，然后選擇上述提到的四種方法進(jìn)行分別處理。③直接上機(jī)處理法：對(duì)每1例患者的2管標(biāo)本采取直接上機(jī)檢測(cè)，最終檢測(cè)結(jié)果以平均值為標(biāo)準(zhǔn)。④37 ℃水浴處理法：選擇當(dāng)中的1管血標(biāo)本，置入37 ℃水浴箱當(dāng)中，0.5 h之后及時(shí)進(jìn)行上機(jī)檢測(cè)。

此外，采取上述方法對(duì)嚴(yán)重冷凝集標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)處理過(guò)程中，還需進(jìn)行血涂片的制作，然后使用瑞氏染色后鏡檢，對(duì)血細(xì)胞凝集有無(wú)徹底解除進(jìn)行觀察判斷。

1.3 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：比較四種處理方法的血常規(guī)指標(biāo)水平情況，包括：①紅細(xì)胞；②血紅蛋白；③白細(xì)胞；④血小板；⑤紅細(xì)胞壓積（HCT）；⑥平均紅細(xì)胞體積（MCV）；⑦紅細(xì)胞平均血紅蛋白量（MCH）；⑧紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度（MCHC）[4]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：本次使用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS21.0處理本次涉及的計(jì)量數(shù)據(jù)，計(jì)量數(shù)據(jù)使用（）表示，并用t檢驗(yàn)，P＜0.05表示兩組數(shù)據(jù)具備明顯差異，具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 直接上機(jī)檢測(cè)結(jié)果分析：對(duì)于嚴(yán)重冷凝集標(biāo)本，在沒(méi)有通過(guò)任何處理的情況下，采取直接上機(jī)檢測(cè)方法，出現(xiàn)儀器提示紅細(xì)胞凝集報(bào)警信號(hào)，其中紅細(xì)胞直方圖存在異常的大紅細(xì)胞波峰。與37 ℃水浴法、血漿置換法、預(yù)稀釋法比較，在紅細(xì)胞與HCT兩項(xiàng)指標(biāo)方面均明顯更低（P＜0.05）；紅細(xì)胞與血紅蛋白之間的比重存在顯著差異，即判斷為異常（P＜0.05）；對(duì)于MCV、MCH、MCHC三項(xiàng)指標(biāo)，和其他三種處理方法比較則明顯更高（P＜0.05）。此外，在鏡下進(jìn)行觀測(cè)，發(fā)現(xiàn)血涂片存在大量紅細(xì)胞顯著聚集成團(tuán)狀，在標(biāo)本管內(nèi)壁經(jīng)肉眼能夠看到凝集顆粒，呈粗沙樣。見(jiàn)表1、表2。

2.2 37 ℃水浴處理方法檢測(cè)結(jié)果分析：血常規(guī)標(biāo)本通過(guò)37實(shí)施的水浴處理方法在0.5 h之后進(jìn)行及時(shí)上機(jī)檢測(cè)，結(jié)果顯示：儀器未發(fā)出警報(bào)信號(hào)，紅細(xì)胞與HCT結(jié)果接近正常水平，但是MCH與MCHC兩項(xiàng)指標(biāo)水平與血漿置換法、預(yù)稀釋法比較均顯著更高（P＜0.05）。通過(guò)處理之后的血常規(guī)標(biāo)本，經(jīng)圖片染色之后，通過(guò)鏡檢發(fā)現(xiàn)依然存在少量的紅細(xì)胞聚集，在血常規(guī)標(biāo)本管內(nèi)壁，存在少量的凝集顆粒，呈現(xiàn)細(xì)沙樣。見(jiàn)表1、表2。

2.3 血漿置換法與預(yù)稀釋法結(jié)果對(duì)比分析：通過(guò)血漿置換法與預(yù)稀釋法處理之后的標(biāo)本，在紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象方面徹底消除，紅細(xì)胞、血紅蛋白、白細(xì)胞、HCT、MCV、MC、MCHC均接近正常水平；但是，血漿置換法基于操作期間有血小板丟失的ent存在，致使檢測(cè)結(jié)果與預(yù)稀釋法比較顯著更低，兩組數(shù)據(jù)差異具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1、下表2。

表1 四種方法的紅細(xì)胞、血紅蛋白、白細(xì)胞、血小板指標(biāo)水平情況對(duì)比（，n＝36）

表1 四種方法的紅細(xì)胞、血紅蛋白、白細(xì)胞、血小板指標(biāo)水平情況對(duì)比（，n＝36）

表2 四種方法的HCT、MCV、MC、MCHC指標(biāo)水平情況對(duì)比（，n＝36）

表2 四種方法的HCT、MCV、MC、MCHC指標(biāo)水平情況對(duì)比（，n＝36）

3 討論

對(duì)于冷凝集素綜合征來(lái)說(shuō)，指的是因自身反應(yīng)性紅細(xì)胞在凝集的作用，同時(shí)受到外部溫度下降等原因的影響，進(jìn)一步誘發(fā)的以慢性溶血性貧血疾病為主要特征的疾病，或以微循環(huán)栓塞為主要特征的疾病[5-6]。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，大部分人的血清當(dāng)中均具備冷凝集素，在效價(jià)上偏低，通常不會(huì)導(dǎo)致自身紅細(xì)胞的凝集[7]。然而，基于特定病理?xiàng)l件下，如自身免疫性溶血性貧血或者多發(fā)性骨髓瘤等病理作用下，冷凝集素的效價(jià)便會(huì)呈現(xiàn)劇烈上升的現(xiàn)象，進(jìn)而導(dǎo)致病灶的出現(xiàn)。值得注意的是，對(duì)于冷凝集素，如果具備比較高的效價(jià)，其血液在離體之后隨著溫度的下降，冷凝集素和紅細(xì)胞抗原之間發(fā)生作用，會(huì)導(dǎo)致紅細(xì)胞自身產(chǎn)生凝集反應(yīng)，且此類凝集存在可逆的特點(diǎn)；如果溫度上升到一定的高度，所凝集的紅細(xì)胞便會(huì)發(fā)生自動(dòng)解聚的現(xiàn)象。然而，如果冷凝集素的效價(jià)偏高，血常規(guī)標(biāo)本就算處于37 ℃的水浴，然后經(jīng)過(guò)半小時(shí)的處理，還是會(huì)存在紅細(xì)胞平均血紅蛋白量（MCH）和紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度（MCHC）水平偏離正常水平的情況，使血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)結(jié)果受到很大程度的影響；此次得出了與之較為相似的研究成果[8-9]。

近年來(lái)，國(guó)內(nèi)有學(xué)者對(duì)嚴(yán)重冷凝集標(biāo)本對(duì)血常規(guī)檢測(cè)的結(jié)果影響進(jìn)行分析，除直接上機(jī)進(jìn)行血常規(guī)分析以外，還納入了三種處理方法，即37 ℃水浴法和血漿置換法還有預(yù)稀釋法，結(jié)果顯示，37 ℃水浴法的效果不理想，但是血漿置換法和預(yù)稀釋法的效果更為理想；最后，通過(guò)對(duì)比分析發(fā)現(xiàn)，血漿置換法和預(yù)稀釋法比較，血漿置換法存在血小板丟失的問(wèn)題，因此綜合考慮選擇預(yù)稀釋法，從而使嚴(yán)重冷凝集標(biāo)本得到有效處理，進(jìn)一步使血常規(guī)檢測(cè)的質(zhì)量得到有效提高[10]。

在此次研究過(guò)程中，37 ℃水浴法、血漿置換法、預(yù)稀釋法比較，預(yù)稀釋法最優(yōu)，該方法需在1：7預(yù)稀釋條件下及時(shí)進(jìn)行檢測(cè)處理，結(jié)果顯示能夠很好地解決血漿置換法血小板丟失的問(wèn)題，從而保證后續(xù)血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果的質(zhì)量水平。綜上所述：在臨床中，針對(duì)嚴(yán)重冷凝集標(biāo)本血常規(guī)檢測(cè)方法較多，相對(duì)于直接上機(jī)法、37 ℃水浴法以及血漿置換法，預(yù)稀釋法在操作上更為便捷，進(jìn)一步更能確保血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確率；因此，可擇優(yōu)選擇預(yù)稀釋法。