紅拂玫瑰外植體的最佳消毒時間

趙映潔，馬金鳳，周玉蓉，魏家旺，韓正蘭

(蘭州新區(qū)現(xiàn)代農(nóng)業(yè)發(fā)展研究院有限公司，甘肅 蘭州 730300)

玫瑰屬薔薇科薔薇屬小灌木，對環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng)，喜溫暖涼爽的氣候和充裕的陽光，耐寒、耐旱[1]。玫瑰含有豐富的香茅醇等香味物質(zhì)和大量維生素、色素，可作為食品、化妝品、香料、色素及藥物的原料[2]。研究玫瑰的植物組織培養(yǎng)技術(shù)為其快速繁殖和新品種的選育提供了新途徑，能產(chǎn)生較高的經(jīng)濟(jì)價值[3]。紅拂是目前市場上最為流行的紅玫瑰品種之一，廣泛應(yīng)用于慶典、婚禮等場地。因此，建立紅拂玫瑰枝條消毒體系，為建立其以枝條為外植體的離體再生體系奠定基礎(chǔ)，對紅拂玫瑰快速繁殖，滿足市場需求有重要現(xiàn)實意義。

1 材料與方法

1.1 紅拂玫瑰枝條

采自蘭州新區(qū)現(xiàn)代農(nóng)業(yè)示范園紅拂玫瑰當(dāng)年生、長相健壯的幼嫩枝條。

1.2 枝條培養(yǎng)基

試驗用枝條培養(yǎng)基為在MS培養(yǎng)基中加瓊脂7.2 g/L，2%蔗糖，pH為5.8，121℃高壓蒸汽滅菌20 min，備用。

1.3 枝條消毒處理

枝條剪成2～3 cm的短枝，保證每個短枝至少有1個側(cè)芽，自來水流動沖洗2 h，無菌水沖洗3次，75%酒精浸泡30 s，然后置于10% NaClO分別處理5 min、10 min和15 min，迅速倒掉消毒液，無菌水浸泡6次，每次浸泡1 min，放在已滅菌的濾紙上吸干水分，然后置于MS培養(yǎng)基上，暗培養(yǎng)7 d后統(tǒng)計污染率。每個處理重復(fù)3次。

1.4 數(shù)據(jù)處理

利用Microsoft Excel 2013進(jìn)行數(shù)據(jù)處理與圖表制作。

2 結(jié)果與分析

由圖1可見，枝條污染率隨消毒時間延長而降低，當(dāng)消毒時長為5 min時污染率最高，為31%；消毒時間為10 min時，污染率為9%；消毒時間為15 min時，污染率最低，僅5%。枝條生長狀態(tài)隨消毒時間延長而表現(xiàn)變差，特別是當(dāng)消毒時間延長至15 min時，對枝條傷害最大，褐化最嚴(yán)重。

3 小結(jié)與討論

前人研究表明，消毒液濃度越高，消毒時間越長，污染率越低[4-6]，消毒時間越長對外植體造成的傷害越大。試驗發(fā)現(xiàn)，消毒液濃度一定時，消毒時間越長，污染率越低，但對枝條的傷害越大，這與前人

的研究結(jié)果一致[7]。認(rèn)為紅拂玫瑰枝條用10% NaClO消毒10 min，消毒效果最佳，外植體生長狀態(tài)最好。