GC法測定二益丸中乙酸龍腦酯的鑒別方法研究＊

丁 輝，朱仁愿，邱國玉，李 巖，姬良亮，劉興國

（蘭州市食品藥品檢驗所，甘肅 蘭州 730050）

二益丸是國家中藥保護品種，其處方砂仁等22味中藥加工制成；具調經止帶，溫暖子宮之效；臨床用于經脈不調，行經腹痛，淤血癆癥，下元虛寒，腰膝酸痛，赤白帶下。二益丸收載于衛生部標準中藥成方制劑第一冊，質量控制內容僅包括制劑通則、性狀檢查、顯微鑒別和丁香酚的薄層鑒別，無法充分保證制劑的安全有效。本研究根據《中國藥典》《中藥新藥質量標準研究的技術要求》等文件要求，對二益丸的質量標準進行提高研究，旨在為二益丸建立簡便可控的質量標準，確保藥品的安全有效，為企業制定制劑質量的內部控制標準，同時為上升國家標準提供參考。

砂仁屬名貴中藥材，《中國藥典》2015年版[1]中通過測定乙酸龍腦酯的含量對其質量進行控制。二益丸處方中亦有砂仁，本研究采用氣相色譜法，通過大量實驗摸索，確定了乙酸龍腦酯鑒別方法，保證了二益丸的質量。

1 儀器及試藥

日本島津GC-2010plus型氣相色譜儀；德國賽多利斯BSA224S-CW型萬分之一電子分析天平，瑞士梅特勒MS105DU型十萬分之一電子分析天平；寧波新芝生物科技SBL-10DT型超聲清洗儀（功率300W，頻率 50kHz）。

乙酸龍腦酯對照品（110759-201105，純度：99.6%），購自中國食品藥品檢定研究院；無水乙醇為分析純。二益丸：規格為4g/丸；生產廠家為蘭州佛慈制藥股份有限公司；批號分別為17H5、17H6、17H7、17H8、18A1、18A2、18A3、18A4、18A5、18F9。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱：安捷倫DB-1毛細管柱（柱長為30m，內徑為0.25mm，膜厚度為0.25μm）；載氣和尾吹氣均為氮氣；色譜柱流量：3.00mL·min-1；柱溫為程序升溫（見表 1）；進樣口溫度 230℃，檢測器（FID）溫度250℃，氫氣和尾吹氣流量：40mL·min-1，空氣流量：400mL·min-1；不分流模式；進樣量：1μL；理論塔板數按乙酸龍腦酯峰計不低于10000，分離度大于1.5。

表1 程序升溫模式

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品溶液

稱取乙酸龍腦酯對照品適量，精密稱定，加無水乙醇制成每lmL含0.3mg的溶液。

2.2.2 供試品溶液

取二益丸供試品，剪碎，混勻，取約2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入無水乙醇20mL，密塞，超聲處理30min，放冷，搖勻，濾過，取續濾液既得。

2.2.3 陰性對照溶液

按處方量配制缺砂仁藥材的陰性對照樣品，按2.2.2項下方法制備陰性對照溶液。

2.2.4 全藥材對照溶液

按處方量稱取22味藥材粉末配制全藥材對照樣品，按2.2.2項下方法制備全藥材對照溶液。

2.2.5 砂仁（鹽炙）對照藥材溶液

稱取砂仁（鹽炙）藥材0.1g，按2.2.2項下方法制備砂仁（鹽炙）對照藥材溶液。

2.2.6 空白溶液

取無水乙醇按2.2.2項下方法制備空白溶液。

2.3 溶液測定

取“2.2”項下制備的對照品溶液、全藥材對照溶液、砂仁（鹽炙）對照藥材溶液、供試品溶液、陰性對照溶液和空白溶液按照“2.1”項下色譜條件進行測定，測定結果如圖1所示。

圖1 各溶液GC色譜圖

2.4 樣品測定

取10批次二益丸供試品按照“2.2.2”項下方法制備供試品溶液，并按“2.1”項下色譜條件進行測定，測定結果如圖2所示。

圖2 供試品溶液GC色譜圖

3 討論

二益丸處方包含22味中藥材，其中砂仁屬于較為名貴的中藥材，但是現行質量標準較為簡單，沒有針對砂仁的相關控制項目，無法有效保障藥品質量。本研究采用氣相色譜法對處方中砂仁的指標性成分乙酸龍腦酯進行定性鑒別，處理方法操作簡單，結果可靠，適于二益丸的質量控制。

二益丸因處方中藥味較多，化學組分復雜，采用GC方法對砂仁中乙酸龍腦酯進行定性鑒別時，考慮到分離度因素，故柱溫采用程序升溫模式。通過大量實驗，不斷優化，最終確定為：初始溫度50℃，保留5min，然后以2℃每min的速率升溫至130℃，保留5min；在該色譜條件下，基線平穩，各組分分離度較好。

測定結果顯示，對照品溶液、全藥材對照溶液、砂仁（鹽炙）對照藥材溶液和供試品溶液中，在28.330min位置處均有相應的色譜峰，即乙酸龍腦酯色譜峰；而陰性對照溶液和空白溶液在該位置無色譜峰，表明該方法結果準確。