不同包裝和貯藏條件下酸棗仁的質量比較

周海燕 鄧哲 馬國需 杜杰

摘 要 目的：確定酸棗仁適合的貯藏條件、包裝材料和包裝方式，為保障酸棗仁質量提供參考。方法：選用同一批酸棗仁樣品，分別采取塑料編織袋包裝、塑料袋包裝、塑料袋真空包裝、鋁塑復合袋包裝、鋁塑復合袋真空包裝和牛皮淋膜紙袋包裝，貯藏在陰涼庫（溫度≤20 ℃、相對濕度為45%～75%）和藥品穩定性試驗箱[溫度為（40±2） ℃、相對濕度為（75±5）%]中，以性狀及水分、黃曲霉毒素、酸棗仁皂苷A、斯皮諾素含量為考察指標，開展為期6個月的陰涼長期穩定性試驗和加速穩定性試驗研究。結果：6個月陰涼長期穩定性試驗結果顯示，不同包裝條件下酸棗仁樣品的性狀以及水分、黃曲霉毒素、酸棗仁皂苷A含量均符合2015年版《中國藥典》（一部）（后文簡稱“藥典”）酸棗仁項下規定;斯皮諾素含量均不符合藥典的規定（不低于0.080%），但其中鋁塑復合袋真空包裝樣品中斯皮諾素含量（0.079%）與藥典要求接近。6個月加速穩定性試驗結果顯示，牛皮淋膜紙袋包裝、塑料編織袋包裝樣品發霉嚴重，塑料袋包裝、塑料袋真空包裝樣品表面顏色變暗，鋁塑復合袋包裝樣品顏色稍變暗，但鋁塑復合袋真空包裝樣品外觀基本無變化;塑料編織袋包裝、牛皮淋膜紙袋包裝樣品中水分含量超過了藥典要求最高值（9.0%）;僅在貯藏2個月時，編織塑料袋包裝樣品被檢出黃曲霉毒素B1含量為 8.64 μg/kg，超出藥典規定;各包裝樣品中酸棗仁皂苷A含量雖有下降，但均滿足藥典要求;僅塑料袋真空包裝樣品中斯皮諾素含量（0.084%）滿足藥典要求，其次屬鋁塑復合袋真空包裝樣品中含量（0.071%）相對較高。結論：酸棗仁以鋁塑復合袋真空包裝后置于陰涼干燥處為宜。

關鍵詞 酸棗仁;包裝;貯藏條件;加速穩定性試驗;陰涼長期穩定性試驗

中圖分類號 R282 文獻標志碼 A 文章編號 1001-0408（2020）01-0062-05

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.01.11

ABSTRACT?OBJECTIVE： To determine the suitable storage conditions， packaging materials and packaging methods of Ziziphi Spinosae Semen， and to provide reference for guaranteeing the quality. METHODS： The same batch of Ziziphi Spinosae Semen samples were packed in plastic woven bag， plastic bag， plastic bag in vacuum， aluminum-plastic composite bag， aluminum-plastic composite bag in vacuum and kraft coated paper bag. They were stored? in a cool warehouse（temperature ≤20 ℃，relative humidity was 45%-75%）? and drug stability test box [temperature was （40±2） ℃， relative humidity was （75±5）%]. Five evaluation indexes were detected during 6-month of long-term cool stability test and accelerated stability test， including characters and the contents of moisture， aflatoxins， jujubosides A and spinosin. RESULTS： The results of 6-month long-term cool stability test showed that the character and the content of moisture， aflatoxins and jujubosides A of Ziziphi Spinosae Semen under different packaging conditions were in line with the requirements of 2015 edition of Chinese Pharmacopeia （part Ⅰ） （shorted for “pharmacopeia”）. The content of spinosin didnt meet the requirement of pharmacopeia （no less than 0.080%）， but the content of? spinosin （0.079%） of aluminum-plastic composite bag in vacuum was close to the requirements of pharmacopeia. The results of 6-month accelerated stability test showed that the sample packed in kraft coated paper bag and plastic woven bag were seriously moldy; the sample packed in plastic bag and plastic bag in vacuum were blackened; the color of the sample packed in aluminum-plastic composite bag was slightly darker; but the appearance of the sample packed in aluminum-plastic composite bag in vacuum was basically unchanged. Only when stored for 2-month，the content of aflatoxin B1 in the sample packed in plastic woven bag was 8.64 μg/kg， which exceeded the pharmacopoeia regulation. The moisture content of the sample packed in plastic woven bag and kraft coated paper bag exceeded the highest value （9.0%） required by the pharmacopoeia. Although the content of jujuboside A of samples in each package decreased， it meet the requirements of the pharmacopoeia. Only the content of spinosin （0.084%） of sample packed in plastic bag in vacuum meet the requirements of the pharmacopoeia， and the content of spinosin （0.071%） of sample packed in aluminum-plastic composite bag in vacuum was relatively high. CONCLUSIONS： Ziziphi Spinosae Semen should be stored in a cool and dry place after packed in aluminum-plastic composite bag in vacuum.

KEYWORDS?Ziziphi Spinosae Semen; Packaging; Storage condition; Accelerated stability test; Long-term cool stability test

酸棗仁為鼠李科植物酸棗[Ziziphus jujuba Mill. var.spinosa （Bunge） Hu ex H.F.Chou]的干燥成熟種子，具有養心補肝、寧心安神、斂汗、生津的功效[1]，《神農本草經》中列為上品，為養心安神要藥，是中醫治療失眠膏方中用藥頻次排列第一的藥材[2]。但在藥品監督管理部門抽檢以及科研中，時常發現酸棗仁在性狀、鑒別、總灰分、黃曲霉毒素、含量測定等項不合格的情況，常被列入不合格率較高的中藥材及飲片“黑名單”[3-5]。

酸棗仁性油而潤，極易受到溫度、濕度、光線、微生物等影響，發生走油、變色、霉變等現象，嚴重影響其品質。酸棗仁從酸棗采收到使用需要經過加工、貯藏、運輸等多個環節，其中貯藏環節短則數月，長則數年，更易受水分、溫度、濕度、氧氣、包裝方式等影響。2015年版《中國藥典》（一部）（后文簡稱“藥典”）酸棗仁貯藏項下只有較籠統的表述——“置陰涼干燥處，防蛀”[1]，無包裝要求，更無明確的保質期。而市場上酸棗仁的包裝存在很大的隨意性，大多就地取材，采用麻袋、塑料編織袋、塑料袋包裝后常溫貯藏。目前，對酸棗仁的研究報道較多，但研究方向主要集中于酸棗仁化學成分、質量評價以及藥理作用等方面[6-8]，而關于不同的包裝材料以及貯藏條件對酸棗仁質量影響的研究尚未見報道。鑒于此，本研究以酸棗仁為研究對象，以目前常用且符合藥用標準的塑料編織袋、塑料袋、鋁塑復合袋和牛皮淋膜紙袋等材料采用真空與非真空兩種方式包裝后，置于陰涼庫和溫度（40±2） ℃、相對濕度（75±5）%的兩種不同貯藏條件下進行穩定性研究，探討酸棗仁適宜的包裝材料、包裝方式和貯藏條件，以期為市場上酸棗仁的包裝、貯藏提供參考。

1 材料

1.1 儀器

e2695高效液相色譜儀（美國Waters公司）;XS205DU電子天平[梅特勒-托利多國際貿易（上海）有限公司];Milli-Q超純水儀（德國密理博公司）;KQ-500DE數控超聲清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）;Labonce-250GS穩定箱（北京蘭貝石恒溫技術有限公司）。

1.2 藥品與試劑

酸棗仁飲片（批號：20171201）購自河北邢州棗業有限公司，經河北中醫學院鄭玉光教授鑒定為真品;酸棗仁皂苷A對照品（批號：110734-201713，純度：95.4%）、斯皮諾素對照品（批號：111869-201704，純度：97.2%）、黃曲霉毒素混合對照品（批號：610001-201804，純度：≥99%）均購自中國食品藥品檢定研究院;乙腈、甲醇為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。

1.3 包裝材料

塑料編織袋（批號：20171221）、塑料袋（批號：20180314）、鋁塑復合袋（批號：20180409）、牛皮淋膜紙袋（批號：20180112）均由北京華邈藥業有限公司生產車間提供。

2 方法

將同一批檢驗合格的酸棗仁樣品（批號：20171201）分別采用塑料編織袋包裝、塑料袋包裝、塑料袋真空包裝、鋁塑復合袋包裝、鋁塑復合袋真空包裝和牛皮淋膜紙袋包裝，每袋100 g。將上述不同包裝的樣品分為兩組同時進行試驗：一組置于藥品穩定性試驗箱中[溫度（40±2） ℃、相對濕度（75±5）%]，開展加速穩定性試驗研究;另一組置于北京華邈藥業有限公司陰涼庫中（溫度≤20 ℃、相對濕度為45%～75%），開展陰涼長期穩定性試驗研究。加速穩定性試驗組分別在貯藏0、1、2、3、6個月的月末取樣，陰涼長期穩定性試驗組分別在貯藏0、3、6個月的月末取樣，取樣后均按照藥典酸棗仁項下的性狀、水分、黃曲霉毒素、酸棗仁皂苷A和斯皮諾素的含量測定要求進行檢測[1]，每個樣品平行操作3次，取其平均值。因各包裝樣品穩定性試驗開始時距包裝前樣品檢驗時間僅間隔10 d，故將包裝前檢測的數據作為0月數據使用。試驗起止時間：2018年5月-2018年11月。

3 結果

3.1 外觀性狀

3.1.1 陰涼長期穩定性試驗 6個月內6種包裝的酸棗仁樣品外觀性狀基本無明顯變化，均符合藥典要求（本品呈扁圓形或扁橢圓形，長 5～9 mm，寬5～7 mm，厚約3 mm。表面紫紅色或紫褐色，平滑有光澤，有的有裂紋。有的兩面均呈圓隆狀突起;有的一面較平坦，中間有1條隆起的縱線紋;另一面稍突起。一端凹陷，可見線形種臍;另一端有細小突起的合點。種皮較脆，胚乳白色，子葉2，淺黃色，富油性。氣微，味淡）[1]。貯藏6個月后的酸棗仁樣品見圖1。

3.1.2 加速穩定性試驗 貯藏1個月時，塑料編織袋包裝樣品表面顏色變暗;從貯藏2個月起，牛皮淋膜紙袋包裝樣品就開始出現少量發霉現象;貯藏3個月時，牛皮淋膜紙袋包裝樣品已經發霉較嚴重，其次為塑料編織袋包裝樣品，開始出現顏色變暗現象;貯藏6個月時，牛皮淋膜紙袋包裝、塑料編織袋包裝樣品發霉嚴重，塑料袋包裝、塑料袋真空包裝樣品顏色變暗，鋁塑復合袋包裝樣品顏色稍變暗，但鋁塑復合袋真空包裝樣品外觀性狀基本無變化。貯藏3、6個月后的酸棗仁樣品見圖2，統計結果見表1（發霉率根據質量計算）。

3.2 水分含量

3.2.1 陰涼長期穩定性試驗 所有酸棗仁樣品貯藏6個月時水分含量均符合藥典標準（≤9.0%）[1]。各樣品隨著貯藏時間的推進，水分含量變化較慢，在貯藏6個月時，不同包裝樣品中水分含量相近。可見在陰涼庫中，包裝方式對酸棗仁水分含量的影響較小。陰涼長期穩定性試驗中樣品水分含量測定結果見表2。

3.2.2 加速穩定性試驗 隨著貯藏時間的推進，鋁塑復合袋包裝和鋁塑復合袋真空包裝樣品中水分含量幾乎無變化，與0個月時基本保持一致;塑料編織袋包裝、牛皮淋膜紙袋包裝樣品水分含量變化較大（在0～1個月），且整個試驗過程中處于高含量狀態，在3個月時均超過了9.0%，不符合藥典標準（≤9.0%）;塑料袋包裝、 塑料袋真空包裝樣品水分含量雖然隨著貯藏時間的延長逐漸增加，但在6個月時其含量仍低于藥典標準，在合格之列。因此，從水分含量的變化分析，塑料袋包裝、塑料袋真空包裝、鋁塑復合袋包裝、鋁塑復合袋真空包裝優于塑料編織袋包裝和牛皮淋膜紙袋包裝，其中以鋁塑復合袋包裝、鋁塑復合袋真空包裝最優，能延緩酸棗仁吸收水分，延長保質期。加速穩定性試驗中樣品水分含量測定結果見表3。

3.3 黃曲霉毒素含量

3.3.1 陰涼長期穩定性試驗 0個月時，所有包裝樣品未均檢出黃曲霉毒素;貯藏2個月時，塑料袋真空包裝樣品僅檢出黃曲霉毒素B1（含量為0.8 μg/kg），其余各種包裝樣品在貯藏不同時間后均未檢出黃曲霉毒素，所有包裝樣品中黃曲霉毒素含量均符合藥典標準[黃曲霉毒素B1含量不得高于5 μg/kg，黃曲霉毒素總量（黃曲霉毒素B1、黃曲霉毒素B2、黃曲霉毒素G1、黃曲霉毒素G2含量總和）不得高于10 μg/kg][1]。

3.3.2 加速穩定性試驗 貯藏0、3、6個月后，各包裝樣品均未檢出黃曲霉毒素;僅在貯藏2個月時，編織塑料袋包裝樣品被檢出黃曲霉毒素B1的含量為 8.64 μg/kg，超出藥典標準（黃曲霉毒素B1含量不得高于5 μg/kg）。

3.4 酸棗仁皂苷A和斯皮諾素含量

3.4.1 陰涼長期穩定性試驗 （1）酸棗仁皂苷A含量：貯藏不同時間后，各包裝樣品中酸棗仁皂苷A的含量均呈下降趨勢，在貯藏0～3個月時下降較明顯，在貯藏3～6個月時下降相對緩慢，但最終含量均滿足藥典規定[按干燥品計算，含酸棗仁皂苷A（C58H94O26）不得少于0.030%][1]。（2）斯皮諾素含量：貯藏不同時間后，各包裝樣品中斯皮諾素含量整體呈下降趨勢，但鋁塑復合袋真空包裝樣品中含量下降速度明顯緩于其他包裝樣品。貯藏3個月時，6種包裝樣品中斯皮諾素含量均低于藥典規定[按干燥品計算，含斯皮諾素（C28H32O15）不得少于0.080%][1]，僅鋁塑復合袋真空包裝樣品中斯皮諾素含量（0.079%）與藥典標準相近。陰涼長期穩定性試驗樣品中酸棗仁皂苷A和斯皮諾素含量測定結果見表4。

3.4.2 加速穩定性試驗 不同包裝樣品在貯藏不同時間后，其酸棗仁皂苷A含量呈波動變化且變化較復雜，但整體呈下降趨勢，其中下降最快的為牛皮紙袋包裝樣品，但最終含量均滿足藥典規定。斯皮諾素含量同樣呈波動下降，在貯藏1個月時，除鋁塑復合袋真空包裝樣品外，其余包裝樣品中斯皮諾素含量均不符合藥典規定;在貯藏6個月時，僅塑料袋真空包裝樣品中斯皮諾素含量（0.084%）符合藥典規定，其次屬鋁塑復合袋真空包裝樣品中含量相對較高（0.071%）。加速穩定性試驗樣品中酸棗仁皂苷A和斯皮諾素含量測定結果見表5。

4 討論

4.1 貯藏條件的確定

通過本項目研究表明，酸棗仁在貯藏過程中易受到溫度、濕度的影響，不同包裝材料和包裝方式能對其質量產生影響，主要體現在性狀和水分、酸棗仁皂苷A、斯皮諾素含量上。6個月陰涼長期穩定性試驗結果顯示，不同包裝的酸棗仁樣品性狀以及水分、酸棗仁皂苷A含量均符合藥典酸棗仁項下規定;斯皮諾素含量均不符合藥典中不低于0.080%的規定，但其中鋁塑復合袋真空包裝樣品中斯皮諾素含量（0.079%）與藥典要求接近。6個月加速穩定性試驗結果顯示，牛皮紙袋包裝、塑料編織袋包裝樣品發霉嚴重，塑料袋真空包裝樣品顏色變暗，鋁塑袋包裝樣品顏色稍變暗，鋁塑袋真空包裝樣品外觀無明顯變化;不同包裝樣品中黃曲霉毒素含量均符合藥典規定;塑料編織袋包裝、牛皮淋膜紙袋包裝樣品中水分含量超過了藥典要求最高值（9.0%）;各包裝樣品中酸棗仁皂苷A含量雖有下降，但均滿足藥典要求;僅塑料袋真空包裝樣品中斯皮諾素含量（0.084%）滿足藥典規定，其次屬鋁塑復合袋包裝樣品中含量（0.071%）相對較高。結合加速穩定性試驗和長期陰涼穩定性試驗結果，本項目確定了酸棗仁適合的內包裝順序為鋁塑復合袋真空包裝>鋁塑復合袋包裝>塑料袋真空包裝>塑料袋包裝>牛皮淋膜紙袋包裝>塑料編織袋包裝。即最適宜的包裝方式為鋁塑復合袋真空包裝，然后置陰涼干燥處貯藏，防蛀。

4.2 水分含量對酸棗仁性狀的影響

水分是霉菌生長繁殖必不可少的前提條件[9]。在加速穩定性試驗中，塑料編織袋包裝和牛皮淋膜紙袋包裝樣品隨著貯藏時間的延長，水分含量增速越快，但同時其霉菌的新陳代謝作用也增強，生長繁殖速度也加快，故其樣品最先呈現吸潮-變色-發霉變化過程;而鋁塑復合袋真空包裝樣品水分含量恒定，故樣品性狀無變化。可見，控制酸棗仁中水分含量，可防止其在貯藏過程中發霉。

4.3 溫度對酸棗仁中斯皮諾素含量的影響

斯皮諾素是酸棗仁中黃酮類主要成分之一，具有鎮靜催眠、抗焦慮和增強學習記憶能力等藥理作用[10-11]。2010年版《中國藥典》（一部）首次將斯皮諾素納入酸棗仁含量測定項下[12]。本研究發現，在陰涼環境中，6種包裝樣品中斯皮諾素含量均呈相同的下降趨勢，在貯藏6個月時各包裝樣品中斯皮諾素含量均低于藥典標準。周賽男等[13]在2016、2017年采集的74份酸棗仁樣品中斯皮諾素的含量為0.052%～0.102%，其中低于0.080%的樣品達34批，可見酸棗仁中斯皮諾素含量不符合藥典標準的這種現象比較普遍。這種現象的出現是否與包裝、貯藏環節相關，值得進一步探討。本研究的陰涼長期穩定性試驗借助北京華邈藥業有限公司的陰涼庫開展，試驗開始時間為5月份，此時氣溫已逐漸升高，陰涼庫全天溫度控制在19 ℃左右。筆者推測酸棗仁中斯皮諾素含量的穩定性和溫度相關，故曾嘗試將酸棗仁樣品放在低溫庫（2～10 ℃）中貯藏，結果6個月內斯皮諾素含量相對穩定，均符合藥典標準。

4.4 酸棗仁自身基質對黃曲霉毒素污染的影響

黃曲霉毒素是主要由黃曲霉和寄生曲霉產生的一類結構相似的代謝產物，其中黃曲霉毒素B1毒性最強，且污染較普遍，屬于Ⅰ類致癌物質[14]。由于中藥材生產、加工、貯藏、運輸的過程工序多，耗時長，加之部分藥材含油脂多、含蛋白質高、含糖量大等特性，使得中藥材很容易發生霉變而污染黃曲霉毒素[15]。藥典中規定酸棗仁中黃曲霉毒素B1不得高于5 μg/kg、黃曲霉毒素總量不得高于10 μg/kg[1]。酸棗仁普遍存在黃曲霉毒素污染的問題，如文獻報道的26批酸棗仁中黃曲霉毒素的檢出率高達54%，超標率23%[16]。在本研究中涉及的兩個貯藏條件下，6種包裝樣品在0個月時均未檢出黃曲霉毒素。陰涼長期穩定性試驗進行到2個月時，塑料袋真空包裝樣品檢出黃曲霉毒素B1含量為0.8 μg/kg;加速穩定性試驗進行到2個月時，塑料編織袋包裝樣品中黃曲霉毒素B1含量為8.64 μg/kg。以上結果提示，包裝能有效阻隔酸棗仁樣品間黃曲霉毒素的相互污染，但感染了黃曲霉菌的樣品包裝后即使處于真空狀態，黃曲霉毒素積累依然存在，這可能與其自身基質密切相關。因中藥材基質是影響飲片中黃曲霉生長的關鍵性因素[15]，酸棗仁富含油脂，部分樣品在貯藏0個月時可能就感染了黃曲霉屬真菌的孢子，即使在無氧、避光條件下，也能為產毒霉菌的生長和黃曲霉毒素的產生提供養分，故出現了貯藏2個月時塑料編織袋包裝樣品中黃曲霉毒素B1含量超過藥典標準的情況，該現象與陳建茹等[17]報道的低溫、真空包裝中柏子仁仍會發生黃曲霉毒素積累的結果一致。張西梅等[16]對酸棗仁從采收、加工（堆漚、水洗去除果肉、機械破除棗核、棗仁分篩、碎棗仁水漂去殼等）、貯藏等過程中黃曲霉毒素的污染量進行測定，發現酸棗仁上黃曲霉毒素污染主要來源于加工環節。故從安全、經濟的角度考慮，筆者認為防控酸棗仁產毒真菌污染，藥材生產單位可考慮低溫貯藏，出售前機械破殼，從而減少破除棗核后的酸棗仁在失去物理屏障后的污染風險。

綜上所述，本研究確定了酸棗仁貯藏條件、包裝材料和包裝方式，從水分控制、低溫干燥處貯藏、售前機械破殼等方面提出建議，能較好地保障酸棗仁質量，同時為種子類飲片的包裝、貯藏提供研究示范。

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（收稿日期：2019-07-24 修回日期：2019-09-24）

（編輯：林 靜）