三石生新膏外敷對大鼠慢性感染性創(chuàng)面肉芽組織中VEGF 和EGF 表達及療效的影響

2020-06-15 03:20:22楊玲玲魏迎辰高翔洪利凱沈薇

世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘 2020年43期

關(guān)鍵詞：實驗

楊玲玲，魏迎辰，高翔，洪利凱，沈薇

(安徽中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院，安徽合肥)

0 引言

據(jù)文獻報道，目前我國慢性創(chuàng)面主要分為創(chuàng)傷感染(67.5%)、壓迫性潰瘍(9.2%)、靜脈性潰瘍(6.5%)、糖尿病潰瘍(4.9%)和其他(11.9%)[1-2]。這其中感染性因素占據(jù)主要因素。慢性感染性創(chuàng)面往往遷延難愈、反復(fù)發(fā)作或有癌變風(fēng)險，治療周期較長，治療成本較高。現(xiàn)今尋找安全有效的治法己成為國內(nèi)外醫(yī)學(xué)研究的熱點。中醫(yī)藥外治在體表潰瘍的治療中顯現(xiàn)了強大的優(yōu)勢，中藥外用有抑菌抗炎、祛腐生肌、促進血液循環(huán)、調(diào)節(jié)創(chuàng)面生長因子等作用。經(jīng)皮膚和創(chuàng)面用藥，直達病所，療效可靠、顯效迅速，并具有操作簡單，使用方便，經(jīng)濟實用，副作用少。我們自制三石生新膏具有消腫止痛、清熱收濕、祛腐生肌的功效，應(yīng)用臨床多年，療效顯著。本實驗通過建立慢性感染性創(chuàng)面的大鼠模型，觀察三石生新膏外敷對慢性感染性創(chuàng)面的影響，初步探討其可能的作用機制。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

SPF 級SD 雄性大鼠60 只，2 月齡，個體質(zhì)量220-250g 之間，由安徽醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供，許可證號：SCXK(皖)2011-002。置于溫度25℃±2℃飼養(yǎng)室，動物均自由飲水進食。動物實驗操作過程完全遵守國家科學(xué)技術(shù)委員會發(fā)布的《實驗動物管理條例》和衛(wèi)生部發(fā)布的《醫(yī)學(xué)實驗動物管理實施細則》以及安徽中醫(yī)藥大學(xué)動物使用和管理委員會章程的要求執(zhí)行。

1.2 實驗試劑及藥品

三石生新膏：安徽中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院自制，主要成分：制爐甘石，煅石膏，滑石，白芨，龍血竭，冰片，血珀，馬勃，紫草，當(dāng)歸等共研磨成極細末100 目篩后，用麻油調(diào)勻后再加入凡士林制成軟膏。貝復(fù)濟：重組牛堿性成纖維細胞生長因子凝膠，36000AU/15mL 液態(tài)噴灑劑，深圳億勝科技有限發(fā)展公司。生理鹽水：0.9%NACL 250mL，杭州吉諾生物醫(yī)藥技術(shù)有限公司。戊巴比妥鈉：中國醫(yī)藥集團上海化學(xué)試劑公司；大鼠檢測試劑盒：北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，批號12129A21。VEGF 抗體：北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，批號：ZS-72690 lot：K2412。EGF 抗體：北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，批號：BS3549 lot：G22121。

1.3 實驗儀器

日本Nikon80i 顯微鏡；RM-2135 石蠟切片機；FSX-10-15 圖像信號采集與分析系統(tǒng)(萊卡公司)；GHX-9270B-1 型電恒溫培養(yǎng)箱(上海福馬)；-80℃超低溫冰箱；亞光ZT-12M 組織脫水機(湖北孝感)；日本島津AUY120 電子天平。

1.4 方法

1.4.1 造模

大鼠常規(guī)飼養(yǎng)1 周后，腹腔注射10%水合氯醛(3.5mL/kg)麻醉，參照付小兵大鼠慢性皮膚潰瘍創(chuàng)面模型的制作方法[3-4]，在大鼠背部正中部位，用剃毛刀剃毛，面積約4.0cm×4.0cm，約為大鼠表面積的10%，保證皮膚完整無破損。標記造模位置，背部正中兩邊各一個，碘伏棉簽局部皮膚消毒，剪取大鼠背部全層皮膚，面積約1.0cm×1.0cm，深度達皮下深筋膜，造成皮膚缺損，將消毒膠環(huán)(內(nèi)環(huán)1cm，外環(huán)1.5cm)以3