表沒食子兒茶素沒食子酸酯對(duì)柔紅霉素與人血清白蛋白相互作用影響的光譜學(xué)及細(xì)胞毒性研究

郭慶英，劉 敏,*，趙燕娜，吳玉姝，孫 彬，劉 杰，韓 軍

1.聊城大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院，山東 聊城 252059 2.聊城大學(xué)生物制藥研究院，山東 聊城 252059

引 言

柔紅霉素[Daunomycin，DNR，圖1(a)]為第一個(gè)臨床應(yīng)用的抗腫瘤抗生素[1]。但其在臨床化療中的不良反應(yīng)，尤其是心臟毒性，使其應(yīng)用受到了限制[2]。微生物藥物學(xué)和腫瘤藥理學(xué)家甄永蘇院士指出：茶多酚與抗腫瘤藥物聯(lián)用具有增效、減毒以及逆轉(zhuǎn)耐藥性的作用，可作為生化調(diào)節(jié)劑應(yīng)用于臨床[3]。兒茶素類化合物為茶多酚的主要成分，其中表沒食子兒茶素沒食子酸酯[epigallocatechin-3-gallate,EGCG，圖1(b)]含量最高(約占兒茶素的50%)且具有最大活性[3]。

人血清白蛋白(HSA)是血漿中含量最豐富的蛋白質(zhì)，因其獨(dú)特的分子結(jié)構(gòu)及良好的生物相容性而成為藥物傳輸領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。晶體結(jié)構(gòu)表明HSA由585個(gè)氨基酸組成，包括三個(gè)結(jié)構(gòu)相似的域(Ⅰ—Ⅲ)。藥物與蛋白的結(jié)合直接影響藥物的吸收、分布和代謝方式，進(jìn)而影響藥效的發(fā)揮。EGCG和DNR單一藥物與人血清白蛋白之間的相互作用已有報(bào)導(dǎo)[4-5]。但遺憾的是EGCG對(duì)DNR與人血清白蛋白的相互作用及細(xì)胞毒性的影響尚未見文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)。本工作利用熒光光譜法、紫外-可見吸收光譜法、圓二色譜法、動(dòng)態(tài)光散射研究了EGCG存在下DNR與人血清白蛋白的相互作用,測(cè)定了其結(jié)合常數(shù)、結(jié)合位點(diǎn)數(shù)、焓變、熵變等熱力學(xué)參數(shù)，并從微觀結(jié)構(gòu)出發(fā)加以討論。同時(shí)考察了單一藥物、聯(lián)合藥物及藥物與蛋白復(fù)合物對(duì)人宮頸癌HeLa細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。所得結(jié)果將為EGCG與DNR的聯(lián)合用藥提供理論基礎(chǔ)。……