巨細胞病毒IgM抗體及巨細胞病毒DNA聯合檢測診斷嬰幼兒巨細胞病毒肝炎的價值分析

毋樂樂

焦作市婦幼保健院檢驗科，河南 焦作 454000

巨細胞病毒（CMV）又稱人類皰疹病毒5型，可通過唾液、宮內、圍生期與性接觸傳播，當機體發生原發性感染時后，CMV不能完全被宿主清除，而潛伏在宿主體內，可由多種情況引發感染而在活化［1］。嬰幼兒因為免疫系統發育不完善與抵抗力較弱，容易感染CMV發展為巨細胞病毒肝炎（HCMV）。患兒感染HCMV無臨床癥狀，且感染嚴重的情況下會損害多種臟器［2］。感染CMV的診斷主要依據實驗室檢查，包括血清特異性抗體檢測、DNA的PCR技術檢測、抗原血癥、基因轉錄產物與病毒培養等，其中最常見的實驗室檢查是血清特異性抗體檢測與PCR技術檢測CMV-DNA。但抗原血癥檢測是巨細胞病毒感染早期的診斷指標。多形核白細胞中低基質的磷酸化蛋白抗原（pp65）是活動性感染的標志，CMV-pp65是CMV的被膜蛋白，其表達與病毒復制有關，但國內很少開展［3］。基于此，本研究旨在探討CMV-IgM及CMV-DNA聯合檢測診斷嬰幼兒巨細胞病毒肝炎的價值分析。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性研究2018年3月—2019年4月間焦作市婦幼保健院收治的200例嬰幼兒巨細胞病毒肝炎患兒的臨床資料作為觀察組，同期選擇100例無感染癥狀健康嬰幼兒作為對照組。觀察組中男120例，女80例；年齡1～3歲，平均年齡（1.66±0.22）歲。對照組中男55例，女45例；年齡1～3歲，平均年齡（1.68±0.13）歲。比較兩組一般資料，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。此次研究已正式通過醫院醫學倫理委員會的審核，所有患兒及其家屬均知情且簽署了知情同意書。

1.2 入選標準

納入標準：（1）觀察組經單克隆抗體檢查病毒抗原檢查確診為巨細胞病毒肝炎者；（2）臨床資料、影像學資料均完整者；（3）凝血功能正常者。排除標準：（1）嚴重器官功能衰竭者；（2）感染單純皰疹病毒者；（3）合并其他原因引起的肝炎者。

1.3 方法

標本采集處理：靜脈采集患兒的清晨空腹血3 ml，置于促凝管中，然后靜置離心，取上層血清分別檢測CMV-IgM、CMV-DNA。CMV-IgM檢測：用化學發光儀及其配套試劑（美國雅培公司）檢測CMV-IgM；CMV-DNA檢測：用ABI stepone Plus儀（中山大學達安基股份有限公司），熒光定量PCR技術檢測CMV-DNA。

1.4 評價指標

CMV-IgM＞22 U/ml為陽性，≤22 U/ml為陰性；CMV-DNA≥2000 IU/ml為陽性，CMV-DNA＜2000 IU/ml為陰性。

1.5 統計學方法

數據采用SPSS 24.0軟件進行統計分析，全部計量資料均經正態檢驗，均符合正態分布，計量資料以均數±標準差（±s）表示，組間比較采用t檢驗；計數資料用例數和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同檢測方法檢測結果比較

觀察組患兒CMV-IgM、CMV-DNA的檢測結果均顯著高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 不同檢測方法檢測結果比較（±s）

表1 不同檢測方法檢測結果比較（±s）

組別對照組(n=100)觀察組(n=200)tP CMV-IgM（U/ml）12.66±1.05 25.65±1.35 84.291 0.000 CMV-DNA（IU/ml）130.56±28.66 2500.86±58.65 381.765 0.000

2.2 不同檢測方法陽性率比較

觀察組患兒CMV-IgM陽性率、CMV-DNA陽性率、聯合檢測陽性率均顯著高于對照組，且聯合檢測陽性率均高于CMV-IgM陽性率、CMV-DNA陽性率，差異有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 不同檢測方法檢測陽性率比較 例（%）

3 討論

嬰幼兒感染病毒性肝炎的病原體有很多，包括：CMV、單純皰疹病毒、乙型肝炎病毒與柯薩奇病毒等，因此準確診斷感染何種病原體與有效的治療是關鍵。嬰幼兒感染CMV和傳播的途徑有母乳、胎盤、產道等，且可分為：先天性感染、獲得性感染與圍生期感染［4-5］。CMV-pp65抗原是CMV活動性感染的主要蛋白，具有敏感度好與特異度高的優點，是早期快速的診斷指標，是國際公認的檢測CMV活性感染的方法，因此可以作為診斷CMV感染的金標準［6］。但是，目前對于HCMV的診斷主要依據CMV-IgM檢測與CMV-DNA檢測。

血清特異性抗體檢測是用于診斷HCMV最常用的方法。當患兒感染CMV后，機體產生一些特異性抗體如CMV-IgM、CMV-IgE、CMV-IgG，因此檢測患兒血清中的抗體可證實患兒機體感染了CMV。患兒檢測出IgM抗體陽性，表示感染CMV，但是其陽性率較低，因為IgM抗體在感染CMV后的2～4周才能被檢測發現，又受患兒免疫力低下的影響，會出現假陰性的結果。人CMV-IgM與CMV-DNA無關，表示CMV-IgM與病毒的復制無關［7］。實驗室檢測CMV是最主要的方法，其中用化學發光法檢測CMV-IgM具有一定的優勢，與傳統酶聯免疫吸附法比較，化學發光法速度快、自動化好、敏感度與特異度高，且檢測結果更可靠。熒光定量PCR技術通過在反應體系中加入熒光基團，用熒光信號檢測PCR的進程，可以定量分析未知模板。熒光定量PCR技術檢測CMV-DNA對診斷CMV具有很好的診斷價值，但也存在一定的問題，主要是DNA抽提、PCR反應條件與檢測位點的選擇等方面存在差異，影響檢測結果，且定性PCR會出現假陽性結果，不能準確的判斷是否感染CMV［8］。本研究結果顯示，觀察組患兒CMV-IgM、CMV-DNA的檢測結果均顯著高于對照組；觀察組患兒CMV-IgM陽性率、CMV-DNA陽性率、聯合檢測陽性率均顯著高于對照組，且聯合檢測陽性率均高于CMV-IgM陽性率、CMV-DNA陽性率。提示聯合檢測CMV-IgM及CMV-DNA，對診斷嬰幼兒巨細胞病毒肝炎具有重要意義，可提高檢測陽性率。

綜上所述，CMV-IgM及CMV-DNA聯合檢測對嬰幼兒巨細胞病毒肝炎具有診斷意義，可提高檢測陽性率，對嬰幼兒巨細胞病毒肝炎的早期診斷、治療、預防并發癥的發生具有重要意義，值得在臨床廣泛推廣應用。