松墨天牛漆酶基因MaLac1的克隆、原核表達及表達譜分析

陳 昊, 羅巧玉, 馬秋雨, 初 旭, 袁 超, 劉 穎, 余 偉,吳松青, 王 榮, 梁光紅, 張飛萍, 胡 霞,*

(1. 福建農林大學林學院, 福州 350002; 2. 福建農林大學, 生態公益林重大有害生物防控福建省高校重點實驗室, 福州 350002)

松墨天牛Monochamusalternatus，隸屬鞘翅目(Coleoptera)天?？?Cerambycidae)墨天牛屬Monochamus，幼蟲蛀食衰弱木的樹干和大枝條，加劇樹勢衰弱，嚴重時甚至造成樹木死亡；成蟲通過取食健康松樹枝條補充營養，攜帶并傳播松材線蟲病(王玲萍, 2004; Wuetal., 2013)。松材線蟲病是由松材線蟲Bursaphelenchusxylophilus感染引起的嚴重林業病害，被稱為“松樹的癌癥”(寧眺, 2004; 張鍇等, 2010)，在我國的分布范圍已擴大至17個省市，造成巨大的林業經濟損失，嚴重破壞了自然景觀和生態環境(潘宏陽等, 2009)。

漆酶(Laccase, EC 1.10.3.2)是藍色多酚氧化酶家族中的最大組成部分，底物范圍廣泛，可催化多種芳香化合物的氧化(Baldrian, 2006; 于孟蘭和倪金鳳, 2014)。漆酶也是兩大木質素酶系中的重要一類，在沒有過氧化氫的情況下，漆酶可以通過溶解氧直接氧化底物(池玉杰和伊洪偉, 2007)。漆酶在自然界廣泛存在，真菌、細菌、高等植物和昆蟲中均已找到漆酶(Hulloetal., 2001; Gavnholt and Larsen, 2002; Piscitellietal., 2011; Virketal., 2012)。物種不同，漆酶功能也各有不同。植物漆酶主要參與木質素的合成與降解(Gavnholt and Larsen, 2002)，細菌漆酶則具有黑色素生成、尿酸氧化、抗紫外線輻射等多種功能(Tamakietal., 2010; Yeetal., 2010)。真菌漆酶與色素生成和木質素降解等功能密切相關(Januszetal., 2013; Wang SNetal., 2018)，同時真菌漆酶還可以幫助真菌病原菌克服寄主植物抗性，使病菌免受丹寧酸等植物防衛素的影響，從而增強其侵染能力(Kimetal., 1995)。

在昆蟲漆酶的研究中，根據其分布、表達能力和功能的不同主要分為漆酶1(Lac1)和漆酶2(Lac2)?！?br>