CC趨化因子配體8在膠質瘤組織中的表達及其臨床意義

程詩琦，張 震，楊 黎，張 毅

(1.鄭州大學第一附屬醫院生物細胞治療中心，河南 鄭州 450052；2.鄭州大學第一附屬醫院腫瘤中心，河南 鄭州 450052)

膠質瘤是最常見的中樞神經系統惡性腫瘤，具有高復發率及高致死率的特點[1]。盡管膠質瘤的標準治療有多種方案，包括手術、化療和放療，但生存時間很短，膠質瘤中惡性程度最高的是膠質母細胞瘤(WHOⅣ級)，其中位生存時間小于15個月[2]。基于治療膠質瘤過程中所面臨的臨床挑戰，急需尋找新的治療方法來提高臨床效果[3]。趨化因子是一類可以分泌到細胞外的小分子蛋白，主要作用是調節免疫細胞的趨化、招募，在腫瘤發生、發展中發揮關鍵作用，已有很多研究[4]表明可以通過利用其趨化特性來提高腫瘤免疫治療的效果。CC趨化因子配體8(CC chemokine ligand 8, CCL8)也稱作單核細胞趨化因子-2，屬于CC趨化因子家族成員。目前研究[5-7]發現，CCL8在乳腺癌、肺癌、黑色素瘤等多種惡性腫瘤組織中表達異常，并與多種惡性腫瘤的發生、發展關系密切。然而，CCL8在膠質瘤組織中的表達及臨床意義尚不清楚。本研究利用癌癥基因組圖譜(the Cancer Genome Atlas，TCGA)數據庫的大樣本膠質瘤表達譜數據，從mRNA水平探究CCL8 mRNA在膠質瘤組織中的表達及臨床意義，并分析CCL8促進腫瘤進展的機制，為膠質瘤的臨床治療提供新的策略。

1 資料與方法

1.1 TCGA數據庫中RNA-Seq數據和臨床數據TCGA中膠質瘤數據來源于https://genome-cancer.ucsc.edu，共收錄697例腫瘤樣本；下載TCGA數據庫中膠質瘤的RNA-Seq數據和臨床數據。

1.2 數據集篩選及CCL8 mRNA表達與臨床病理參數的關系篩選TCGA數據庫中包含CCL8 mRNA表達譜和臨床病理參數的病例。依據膠質瘤的臨床病理特征(WHO分級、分子表型)分別進行病例篩選和分組，WHO分級研究共納入697例(其中低級別膠質瘤組織530例、膠質母細胞瘤組織167例)，分子分型研究共納入531例(其中間質型膠質瘤96例、經典型膠質瘤86例、神經元型膠質瘤111例、原神經細胞型膠質瘤238例)。分析CCL8 mRNA表達與以上各臨床病理參數的關系。

1.3 CCL8 mRNA表達與預后的關系分析CCL8 mRNA表達與膠質瘤總生存時間的關系。選取TCGA中CCL8 mRNA表達水平較高和較低的膠質瘤患者各150例，針對總體生存時間，繪制生存曲線。

2 結果

2.1 CCL8 mRNA在膠質瘤組織中的表達與WHO分級的關系與低級別膠質瘤組織相比，膠質母細胞瘤組織中CCL8 mRNA表達水平明顯提高(4.31±1.72vs2.47±1.89,t=11.190，P<0.001)。這表明CCL8的表達水平與膠質瘤的WHO分級相關，WHO分級越高，CCL8 mRNA的表達水平也越高。見圖1。

圖1 CCL8 mRNA表達與膠質瘤WHO分級的關系

2.2 CCL8 mRNA在膠質瘤組織中的表達與分子分型的關系為了探究膠質瘤組織中CCL8 mRNA表達水平與腫瘤分子分型的關系，我們分析了TCGA數據庫中CCL8 mRNA表達水平與膠質瘤分子分型的關系，結果顯示，間質型膠質瘤組織中CCL8 mRNA表達水平較經典型、神經元型、原神經細胞型膠質瘤升高(4.93±1.58、2.79±1.49、2.29±2.06、2.35±1.84，F=52.810，P<0.001)。這提示CCL8 mRNA在間質型膠質瘤組織中的表達水平明顯高于其他分子分型。見圖2。

圖2 CCL8 mRNA在膠質瘤組織中的表達與其分子分型的關系

2.3 膠質瘤組織中CCL8 mRNA的表達水平與患者預后的關系選取TCGA數據庫中CCL8 mRNA表達水平較高和較低的膠質瘤患者各150例，針對總體生存時間繪制生存曲線，結果顯示，與CCL8 mRNA高表達組相比，CCL8 mRNA低表達組患者的中位生存時間明顯延長(4 068 d、954 d,P<0.001)。這提示膠質瘤組織中CCL8 mRNA的表達水平與患者預后呈負相關。見圖3。

圖3 CCL8高、低表達膠質瘤患者的生存曲線比較

3 討論

膠質瘤是成人中最普遍和最致命的原發性腦腫瘤。由于包括外科手術切除、放療和化療在內的常規治療的效果有限，所以迫切需要尋求新的治療方式改善患者的預后[8]。隨著對腫瘤免疫機制研究的不斷深入，腫瘤免疫療法取得重大進展[9]。目前，一些研究發現腫瘤免疫微環境在支持膠質瘤惡性生長和進展中起著關鍵作用，而巨噬細胞又在膠質瘤免疫微環境中扮演著重要的角色[10-11]。腫瘤微環境中的CCL8等單核細胞趨化因子招募M2型巨噬細胞到腫瘤部位，而腫瘤部位的腫瘤相關巨噬細胞通過分泌轉化生長因子-β等細胞因子抑制T細胞功能，幫助腫瘤細胞逃脫免疫監視，從而促進腫瘤進展[12-13]。

本研究發現，在膠質瘤組織中，CCL8 mRNA的表達水平與膠質瘤的WHO分級、分子表型呈正相關。此外，本研究結果還顯示CCL8 mRNA高表達的患者的生存時間低于CCL8 mRNA低表達的患者。

綜上所述，CCL8 mRNA的表達與膠質瘤進展密切相關，有望成為膠質瘤診斷及治療的新靶點。