尿激酶型纖溶酶原激活劑和纖溶酶原激活物抑制劑-1對前列腺癌的診斷價值研究

李亞飛，楊 娟

青海省人民醫院1泌尿外科，2腫瘤內科，西寧810007

前列腺癌為前列腺上皮性惡性腫瘤，據相關調查數據顯示，中國前列腺癌發病率為9.92/10萬，在男性惡性腫瘤發病率中居第6位，該病在55歲后隨著年齡的增長而明顯增多，在70～80歲達到高峰[1-3]。目前對于前列腺癌的診斷仍以手術或穿刺進行病理檢查為主，但上述方法對患者創傷較大，且穿刺活檢獲取組織較少，不利于患者疾病整體情況的判斷[4-5]。尿激酶型纖溶酶原激活劑（urokinasetype plasminogen activator，uPA）為絲氨酸蛋白酶類的一種，該物質被證實在多種腫瘤的浸潤及轉移中起關鍵作用[6]。血漿纖溶酶原激活物抑制劑（plasminogen activator inhibitor，PAI）可分為 PAI-1及PAI-2，其中PAI-1在血漿纖溶活性方面起主要作用，其為單鏈球形糖蛋白，可由血管內皮細胞合成并釋放入血而調節纖溶活性[7]。近年來多項研究結果顯示，uPA及PAI-1參與乳腺癌等多種惡性腫瘤的侵襲及轉移，可用于多種惡性腫瘤的早期診斷[8]。但uPA及PAI-1與前列腺癌發生、發展關系方面的研究國內尚未見有研究報道，因此本研究通過探討uPA及PAI-1對前列腺癌的診斷價值，為前列腺癌的診斷提供新的思路，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2016年9月至2018年8月在青海省人民醫院就診的前列腺癌患者的病歷資料。納入標準：①符合前列腺癌的相關診斷[9]，且經病理證實為原發性前列腺癌；②患者神志清醒，意識正常，可與醫護人員進行正常交流。排除標準：①合并其他惡性腫瘤；②合并自身免疫疾病；③凝血功能障礙；④入組前3個月接受過放化療。根據納入、排除標準，共納入72例前列腺癌患者作為觀察組，觀察組患者年齡61～76歲，平均（59.03±7.16）歲；體重指數17.95～24.68 kg/m2，平均（20.29±3.30）kg/m2。另選取同期健康體檢者72例作為對照組，對照組研究對象年齡58～79歲，平均（61.92±6.30）歲；體重指數 18.20～24.39 kg/m2，平均（20.71±3.27）kg/m2。兩組研究對象年齡、體重指數比較，差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 檢測方法

所有研究對象均抽取清晨空腹外周靜脈血4 ml，置入含抗凝劑的試管于4℃保存，在24 h內以3000 r/min的轉速離心10 min，分取上清液于-80℃冰箱中保存待測。采用上海莼試生物技術有限公司生產的人uPA ELISA檢測試劑盒及杭州默沙克生物科技有限公司生產的PAI-1 ELISA檢測試劑盒進行檢測，操作按試劑盒說明書進行；比色定量分析采用美國賽默飛世爾公司生產的Multiskan FС酶標儀進行檢測。觀察組患者根據Gleason評分系統分成5組，Gleason1組16例，Gleason2組15例，Gleason3組13例，Gleason4組14例，Gleason5組14例，對比不同級別患者uPA及PAI-1值。

1.3 統計學方法

采用SPSS 22.0統計學軟件進行數據分析，計量資料以均數±標準差（±s）表示，多組比較采用方差分析，多組間兩兩比較采用LSD-t檢驗，以受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROС）曲線分析各指標診斷效能。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組研究對象uPA及PAI-1水平的比較

觀察組uPA及PAI-1水平均明顯高于對照組，差異均有統計學意義（P＜0.01）。（表1）

表 1 兩組研究對象uPA及PAI-1水平的比較（ng/ml，±s）

表 1 兩組研究對象uPA及PAI-1水平的比較（ng/ml，±s）

對照組（n=72）觀察組（n=72）t值P值0.69±0.28 1.37±0.52 9.770 0.000 4.75±4.02 11.29±3.93 9.871 0.000組別uPA PAI-1

2.2 不同級別前列腺癌患者uPA及PAI-1水平的比較

前列腺癌患者uPA及PAI-1水平均隨著Gleason等級的升高而升高，差異均有統計學意義（P＜0.05）。（表 2）

表 2 不同級別前列腺癌患者uPA及PAI-1水平的比較（ng/ml，±s）

表 2 不同級別前列腺癌患者uPA及PAI-1水平的比較（ng/ml，±s）

注：a與Gleason1組比較，P＜0.05；b與Gleason2組比較，P＜0.05；c與Gleason3組比較，P＜0.05；d與Gleason4組比較，P＜0.05

?Gleason3組（n=13）Gleason4組（n=14）Gleason5組（n=14）F值P值0.65±0.24 0.89±0.23a 1.07±0.43a b 1.38±0.36a b c 1.53±0.39a b c d 16.797 0.000 5.60±3.47 9.57±4.42a 15.19±5.87a b 19.50±5.59a b c 23.44±6.24a b c d 31.115 0.004 uPA PAI-1

2.3 診斷價值分析

ROС曲線分析結果顯示，uPA對前列腺癌的診斷截斷值為0.78 ng/ml，靈敏度為86.11%，特異度為84.72%，ROС曲線下面積為0.718（95%СI=0.826～0.991，P=0.042）。PAI-1對前列腺癌的診斷截斷值為9.28 ng/ml，靈敏度為87.50%，特異度為83.33%，ROС曲線下面積為0.908（95%СI=0.801～0.933，P=0.022）。（圖1）

圖1 uPA及PAI-1診斷前列腺癌的ROС曲線

3 討論

前列腺癌為威脅全球范圍內男性健康的主要惡性腫瘤[10]。目前對于前列腺癌的無創診斷方法主要有血清前列腺特異性抗原、直腸指診、影像學檢查等[11]。外周血血漿是前列腺癌標志物的一種有潛力的樣本類型，其具有以下優勢：易于抽取血樣、非侵入性操作、價格低廉、在環境溫度下可以保存、標志物的回收率幾乎無損失[12-13]。血清前列腺特異性抗原的廣泛應用對于前列腺癌的早期診斷具有重要的價值，但因其特異度不高而使前列腺穿刺活檢結果陰性率較高，大多患者需要進行穿刺復檢，同時因血清前列腺特異性抗原特異度較低而導致出現過度診斷、過度治療的情況時有發生。近年來國內外學者對前列腺癌的早期診斷標志物進行了大量研究，可提高前列腺癌早期診斷的靈敏度及特異度[14-15]。

有研究者曾在結直腸癌中發現uPA與PAI-1的水平較周圍正常組織明顯升高，且隨腫瘤的轉移、分化及Dukes分期的升高而明顯上升[16]。本研究觀察組患者uPA及PAI-1水平均明顯高于對照組（P＜0.01），與上述結果相似，提示uPA與PAI-1有作為前列腺癌早期診斷指標的價值。侵襲及轉移是惡性腫瘤的重要特征，同時也是惡性腫瘤治療失敗及死亡的主要原因，與患者預后關系密切。大量研究結果顯示惡性腫瘤發生侵襲并最終轉移需要對基底膜及細胞外基質成分附著、黏附及侵襲而通過細胞基質屏障[17-18]。該步驟主要由細胞因子及生長因子調控，尿激酶系統在此過程發揮了重要的作用。uPA為多功能絲氨酸蛋白酶的一種，其主要功能是與uPA受體結合而將纖溶酶原激活，直接或間接起到降解的作用。另外uPA還可刺激細胞增生，加強細胞遷移而改變細胞黏附性及催化特殊的細胞因子而促進血管的生成。PAI-1則是uPA的抑制劑，主要由上皮細胞、顆粒細胞、腫瘤細胞等生成，可與細胞表面的uPA形成uPA-uPA受體-PAI復合物后被內吞再降解為uPA、PAI及uPA受體重新被利用[19]。PAI-1與uPA均為多功能蛋白，除具有抑制uPA活動外還可與玻璃黏連蛋白結合而調整細胞的附著及遷移。不同級別前列腺患者對比結果顯示，前列腺癌患者uPA及PAI-1水平均隨著Gleason等級的升高而升高，與相關研究結果基本一致[20]。前列腺癌患者的血漿檢測得出結論，uPA和uPA受體水平部分是由前列腺的局部釋放引起的。當通過免疫細胞化學半定量測定檢測根治性前列腺癌切除術治療患者的腫瘤組織中的uPA和PAI-1時，這兩個標志物被獨立使用，并且作為組合變量，對于疾病預后具有預測作用。另外前列腺研究提供了大量證據表明，纖溶酶原激活蛋白酶和信號系統具有關于腫瘤類型和行為的重要信息，并且這些標志物對該疾病有信息。本研究中uPA及PAI-1水平均隨著Gleason等級的升高而升高，提示uPA及PAI-1水平越高患者惡性程度越高，因此uPA及PAI-1可用于前列腺癌的早期診斷。

綜上所述，前列腺癌患者uPA及PAI-1水平均明顯高于健康人群，且其水平隨前列腺癌嚴重程度升高而升高。uPA對前列腺癌的診斷截斷值為0.78 ng/ml，PAI-1對前列腺癌的診斷截斷值為9.28 ng/ml。