EM菌、乳酸菌的簡易擴大培養

路慶鵬 金雪霞 榮志敏

(江蘇綠科生物技術有限公司，江蘇 高郵 225600)

綠科生物科技專欄

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EM菌和乳酸菌在水產養殖上的應用已有近20年的歷史了，多年的實踐證明，這些微生態制劑對于水產養殖水體環境的調控及水產生物機體內環境的調節均十分有效。水產微生態制劑已成為水產養殖的必備物品，然而在實際應用中養殖戶發現，水產用EM菌等品種五花八門，應用范圍基本相同、菌體含量參差不齊，價格相差極大，但作用效果并無天壤之別，這些因素限制了微生態制劑的進一步應用和發揮功效，打擊了廣大養殖戶使用微生態制劑的熱情。特別是微生態制劑是通過生物間的資源競爭和相互拮抗來發揮作用的，起效有一定的時間，需要定時、定量使用才有效果。優質高價的產品養殖戶用不起，劣質低價的產品效果又不好。在這種情況下，養殖戶自主擴培微生態制劑的現象越來越多，且取得了一定的效果，逐漸成為一種趨勢。

一、目前EM菌、乳酸菌擴培中存在的主要問題

EM菌是有效微生物的一種統稱，其為一種復合菌制劑。當前水產上所用的雖然都稱為EM菌，但各廠家所生產的EM菌差別還是很大，有的以兼性厭氧性菌群為主，有的富含好氧性的菌群，而乳酸菌同樣因保存條件、作用性能等也是多種菌種的復合產品。既然EM菌是多菌屬、多菌種復合制劑，那么不同菌群的擴培條件肯定也存在差異，簡單的操作不可能擴培出穩定的EM菌液。

1.缺乏專一化的擴培菌種 當前市場上生產用于EM菌、乳酸菌擴培的專一化菌種的廠家極少，多數是生產相應的培養基，再以市售的商品化EM菌、乳酸菌為菌種。市售的EM菌差異極大，較為經典的EM菌以兼性厭氧菌為主要菌群，而現有很多的EM菌中又加入了多種好氧菌，這樣會造成有的擴培效果不錯，有的則很差。即使使用同一種EM菌做菌種，有時擴培很好，有時又很差。乳酸菌同樣如此。更值得注意的是，養殖戶為了節省成本，將一次擴培后的菌液留做菌種，再次或3次擴培，導致擴培液越發不穩定。

2.缺乏專門化的培養工藝 很多養殖戶認為擴培是十分簡單的，不需要按嚴格的流程來進行，故在擴培中隨意性很大，導致每批擴培產品差異大。容器、水源、培養基是否要消毒，是否密封，培養溫度、培養時間是多少，如何判定是否達到要求等沒有具體的可操作流程規定，造成擴培的菌液雜菌污染嚴重、有的甚至培養的就是不良雜菌菌液。這樣雖然使用成本降低了，但使用效果不佳，有時甚至有害。

二、保證EM菌、乳酸菌擴培效果的技術要求

為使EM菌、乳酸菌擴培能達到成本降低、效果穩定、雜菌率低等要求，擴培必須按一定的技術要求進行。

1.采用專一性的擴培專用菌種 專用菌種在設計生產時已考慮到菌種配伍、對通用培養條件的適應性等問題，菌種活性高、效果穩定，如2020年江蘇綠科生物推出的“EM發發樂”和“乳酸發發樂”。“EM發發樂”以兼性厭氧菌為主，含乳酸菌、酵母菌等多種菌種及其代謝產物、多種中微量元素；“乳酸發發樂”含植物乳桿菌、糞腸球菌等多種益生菌及其代謝產物、多種中微量元素。所用菌種經嚴格篩選，確保菌種活力高、抗逆性強、在環境和機體內定植力好、增殖迅速。采用國際先進的液態深層發酵工藝和低溫干燥制劑工藝生產，且經獨特的微囊包被處理，確保產品活性高、穩定性好、無雜菌污染。使用方便、成本低，500克/袋可擴培50千克菌液。需注意的是，每次擴培需按量使用相應的專用菌種。

2.培養容器 50～100千克容積的帶蓋塑料桶需經洗滌、用二氧化氯等消毒劑浸泡消毒(包括蓋子)，清洗后備用。

3.水源及培養基 水源以自來水、井水為佳，也可使用養殖水源，使用前均經過沉淀、消毒、曝氣處理；培養基可采用紅糖、糖蜜，適當加入酵母浸粉或蛋白胨等，具體見菌種使用說明。

4.培養方法及判定 在50千克可密封塑料桶中加入一半的培養水源，加入培養基，攪拌(用經消毒的攪棒)均勻后加入“EM發發樂”或“乳酸發發樂”500克，然后加水至50千克，再次攪拌均勻，密閉培養。培養的適宜溫度為25～35℃，時間3～5天，如氣溫低于25℃可將培養時間延長為5～10天。培養過程中會產生一定的氣體，可在培養時每天松蓋放氣并搖動后再密封。是否培養成功可通過顯微鏡觀察、測pH以及觀察顏色和氣味來實現。培養合格的產品pH在4.0以下，顏色由初始的深棕褐色變成淺棕褐色或黃褐色，味呈酸甜、香，顯微鏡下達108個/毫升數量級即可。