李 鵬,董嫁詩,劉鼎鑫
黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,黑龍江大慶 163319
北方寒區(qū)多年來飼養(yǎng)的地方良種鵝-籽鵝,產(chǎn)于黑龍江綏化和松花江地區(qū),是世界上產(chǎn)蛋量最多的鵝種之一,一般年產(chǎn)蛋可達(dá)14~20 kg[1]。然而,隨著鵝產(chǎn)業(yè)的迅速發(fā)展,鵝的需求量逐年增加,但由于鵝繁殖性能較低,限制了鵝產(chǎn)業(yè)的發(fā)展[2]。據(jù)專家預(yù)測,目前全國養(yǎng)鵝約6億多只,鵝肉產(chǎn)量70萬噸,約為牛羊肉產(chǎn)量的40%;市場缺口在3億只左右。利用分子生物學(xué)技術(shù)提高禽類繁殖性能的研究發(fā)展很快,在雞的研究方面尤為突出,國內(nèi)外均取得了較多的科研成果[3]。本研究針對(duì)影響籽鵝產(chǎn)蛋性能的主要基因即促卵泡素(FSH)、催乳素(PRL)、抑制素(INH)開展研究,以提高籽鵝的繁殖性能,現(xiàn)報(bào)告如下。
1.1.1 樣品
選擇本地健康成年雌性籽鵝2只,取籽鵝卵泡及腦垂體。
1.1.2 所需試劑
pMD18T載體(購自寶生物工程(大連)有限公司);pcDNA3.0、pET-32a載體(由本實(shí)驗(yàn)室保存);RNA提取試劑盒、RNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒、PCR試劑盒、普通瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒(購自天根生化科技(北京)有限公司);限制性內(nèi)切酶EcoRⅠ、HindⅢ(購自寶生物工程(大連)有限公司);T4DNA 連接酶(購自北京鼎國生物科技有限公司);其余試劑均為分析純?cè)噭?/p>
1.1.3 主要儀器
Pico-21型臺(tái)式離心機(jī)(美國Thermo Fisher生產(chǎn));DYY-6C型電泳儀(北京市六一儀器廠生產(chǎn));凝膠成像系統(tǒng)(美國UVP生產(chǎn));T100TM型PCR儀(美國BIO-RAD生產(chǎn));LDZX-50KBS型高壓滅菌器(艾科儀器生產(chǎn));DRP-9272型培養(yǎng)箱(上海培因試驗(yàn)儀器有限公司生產(chǎn));超凈工作臺(tái)(北京東聯(lián)哈爾儀器制造有限公司生產(chǎn))。
1.2.1 RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR方法……p>