張世忠 江 斌 陳盛星 劉 倩 張桂云 劉 景*
(1.福建省農業科學院畜牧獸醫研究所 福州 350013;2.中鯊動物保健品(廈門)有限公司廈門 361006;3.福建農林大學動物科學學院 福州 350002)
目前,對纖維性飼料的研究日益活躍,食物纖維在人類和動物營養方面有許多食療和疾病預防功能,適量的食物纖維對刺激產蛋雞胃腸道能動性和促進腸內微生物活動有益,被普遍認為有保健促進作用。不同種類的動物由于其消化系統、生理結構的不同而對纖維的消化利用能力是不同的。在飼糧中適當加入復合型纖維,有助于保持產蛋雞胃腸道的正常結構和功能。腸道健康是制約蛋雞生產性能的主要因素,腸道健康狀態的改變直接影響營養素的利用。復合型纖維“美纖多”是植物細胞壁的主要組成成分,對動物有營養和非營養雙重作用,適宜的飼糧粗纖維水平有助于維持動物胃腸道健康、改善能量利用,以便提高產蛋雞的生長性能。本研究用復合型纖維“美纖多”添加在產蛋雞育成和產蛋階段的日糧中,能促進蛋雞對礦物質的利用,并能降低氮及能量的利用,延長消化時間。本研究旨在探討在產蛋雞育成和產蛋階段日糧中添加不同比例的復合型纖維“美纖多”對蛋雞腸道結構、免疫指標及生長性能的影響。
1.1 美纖多 美纖多主要由甜菜粕纖維、海藻纖維等多種植物纖維混合而成,其中酸性洗滌木質素2.6%、中性洗滌纖維49.2%、酸性洗滌纖維26.2%,由中鯊動物保健品(廈門)有限公司提供。
1.2 試驗動物與基礎日糧 將384羽1日齡海蘭褐蛋雞隨機分成4個處理組,每個處理組24個重復,每個重復4羽雞。4個處理組分為試驗組1、試驗組2、試驗組3、對照組,每組使用的基礎日糧一致,試驗組1、試驗組2、試驗組3中分別添加0.8%、1.0%、1.2%復合型纖維飼料。按照《標準化海蘭褐蛋雞飼養標準》進行飼養管理。

表1 試驗日糧組成及營養水平
1.3 飼養管理 飼養管理全部與大規模蛋雞場生產群保持一致。籠養,每天喂2次粉料,自由采食和飲水。雞舍為全封閉式,雞籠二列三層式,每籠4羽,固定專人飼養管理。每天記錄產蛋數、破蛋率、耗料量、死淘數及雞群健康狀況等,疫苗防疫與消毒措施按常規方法進行。
1.4 主要儀器設備 生物組織自動脫水機、生物組織包埋機(浙江金華科迪儀器設備有限公司生產);組織切片機(德國Leika公司生產);光學顯微鏡、顯微照相設備(日本Nikon公司生產);全自動生化分析儀(深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司);電子分析天平FA-2204B。
1.5 測定指標 腸道絨毛高度、隱窩深度、成熟細胞數量、免疫球蛋白A(ImmunoglobulinA,IgA)、免疫球蛋白G(ImmunoglobulinG,IgG)、免疫球蛋白M(Immunoglobulin M,IgM)、采食量、糞便量、產蛋數。1.6 數據統計 應用Excel、SPSS 19.0統計軟件進行單因素方差分析,差異顯著后進行LSD多重比較,以P<0.05作為差異顯著性判斷標準,以P>0.05作為差異不顯著判斷標準,結果用平均數±標準差(Mean±SD)表示。
2.1 腸道結構形態 各組120日齡的蛋雞經屠宰后,取十二指腸前端2~3 cm的腸道,經固定24 h(4%PA灌注取材后固定6~8 h)以后,流水沖洗24 h,置于70%~80%乙醇中。對于貼壁生長細胞,胰酶消化,調整細胞濃度約1×105/mL,滴加于蓋玻片上(置于6孔板中),培養相應時間后,取出細胞爬片,用PBS洗滌3次。95%乙醇固定20min,PBS洗滌2次,每次1min。蘇木素染液染色2~3min,自來水洗滌。鏡下觀察,若細胞核染色過深,用1%鹽酸酒精溶液分色數秒,自來水洗滌。浸入伊紅染液染色1 min,自來水洗滌。吹干或自然晾干細胞,爬片后,中性樹膠封片。若細胞用4%多聚甲醛固定,則染色時間相應延長,蘇木素染色12~15 min、伊紅染色5min即可。
小腸是消化道內營養物質吸收和轉運的主要部位,吸收是小腸絨毛的主要功能,所以,動物小腸黏膜結構的良好狀態是養分消化吸收和動物正常生長的生理學基礎[1]。絨毛高度與隱窩深度反映了腸道的功能狀況,絨毛高度與成熟細胞數量呈顯著相關,只有成熟的絨毛細胞才具有吸收養分的功能。由圖1可見,試驗3組的絨毛高度比對照組、試驗組1、試驗組2更高,試驗組2的絨毛高度比試驗組1和對照組更高,試驗組1的絨毛高度比對照組高,添加復合型纖維各組的絨毛高度都高于對照組。各組間十二指腸隱窩深度和成熟細胞數量與絨毛高度的結果一致,添加復合型纖維的試驗組都好于對照組,且隨著添加量的增加效果更明顯。
2.2 免疫指數 于120日齡、180日齡,每個處理組選5羽體重相近的蛋雞,用肝素鈉管翅下靜脈采血3 mL,立即送往離心室,3 000 r/min離心10 min,將上層清液分離到EP管中,-20℃低溫保存。用全自動生化分析儀測定血清中免疫球蛋白A(Immunoglobulin A,IgA)、免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)、免 疫 球 蛋 白M (Immunoglobulin M,IgM),依據酶聯免疫分析試劑盒測定。

圖1 各組雞腸道形態結構顯微觀察
由表2可以看出,120日齡時,試驗組3的IgA含量最高,為623.16μg/mL;試驗組2次之,為621.32μg/mL,二者差異不顯著。對照組IgA含量最低,為528.38μg/mL;試驗組3與對照組相差94.78μg/mL;試驗組2、試驗組3與試驗組1、對照組差異顯著(P<0.05);試驗組1與對照組差異顯著(P<0.05)。試驗組3的IgG含量最高,為1761.56μg/mL;對照組最低,為1 692.73μg/mL,二者相差68.83μg/mL,各試驗組間差異顯著(P<0.05)。試驗組3的IgM含量最高,為682.30μg/mL;對照組最低,為620.36μg/mL,二者相差61.94μg/mL,各試驗組間差異顯著(P<0.05)。
180日齡時,試驗組3的IgA最高,為628.31μg/mL,比120 d時提升了5.15μg/mL;對照組最低,為603.31μg/mL,但與同組120 d時相比提升了20.93μg/mL;試驗組1和試驗組2的IgA含量較120 d均有所提高,各試驗組間差異顯著(P<0.05)。試驗組3的IgG最高,為1 778.75μg/mL,比120 d提高了17.79μg/mL; 對照組最低,為1 716.57μg/mL,比120 d提高了23.84μg/mL;試驗組1和試驗組2的IgG含量較120 d均有所提高,各試驗組間差異顯著(P<0.05)。試驗組3的IgM最高,為675.23μg/mL,比120 d下降了25.47μg/mL;對照組最低,為637.43μg/mL,比120 d提高了17.07μg/mL;試驗組1和試驗組2的IgM含量較120 d均有所提高,各試驗組間差異顯著(P<0.05)。
可見,試驗組3的IgA、IgG、IgM均比其它組高且差異顯著,表明試驗組3配方最能夠有效刺激機體產生免疫球蛋白,提高機體免疫力。
2.3 生產性能 對120日齡開產后蛋雞的采食量、糞便量、產蛋率和破畸蛋率進行統計,由表3可以看出,試驗組3的產蛋率最高,為50.69%;對照組產蛋率最低,僅為41.9%;試驗組3的產蛋率與對照組比較,差異顯著(P<0.05),其它組間差異不顯著(P>0.05)。各組間平均蛋重在49.51~50.54 g,組間差異不顯著(P>0.05)。試驗組3的破畸蛋率最低,為30.83%;對照組最高,為33.84%;組間差異不顯著(P>0.05);對照組糞便量最重,為9.58 kg;試驗組3最輕,為8.79 kg;二者間差異顯著(P<0.05),其它組間差異不顯著(P>0.05)。

表2 美纖多對蛋雞血清免疫球蛋白含量的影響
時至今日,蛋雞養殖業采用高能量、高蛋白的日糧已引發了一系列腸道健康問題,而在實際生產過程中,對高纖維日糧應用的認識不足[2]。目前,畜牧業飼料中添加的粗纖維主要以米糠、麥麩為主,米糠、麥麩中含有類似于大豆中的胰蛋白酶抑制因子(一種可能引起腹瀉的抗營養因子)和含有植酸等抗營養因子,需經過加工處理,以免采食過量影響產蛋雞的生產性能。米糠、麥麩中脂肪酶活性也較高,因此,貯存過長發霉產生霉菌毒素對產蛋雞腸道健康帶來危害。米糠、麥麩中的T-2毒素會使活雞腹瀉和肝臟等重要臟器壞死,脂肪肝、肝臟有出血班,血斑蛋、破蛋、軟蛋增多;腺胃、肌胃黏液分泌物增多或出現潰瘍,腺胃腫脹,嚴重的導致突然死亡,影響產蛋量甚至停產[3]。腸道健康是制約蛋雞生產性能的主要因素,腸道健康狀態的改變直接影響營養素的利用。隨著我國在2020年全面禁止抗生素作為促生長劑在飼料中添加,蛋雞腸道疾病問題將日益突出,因此,復合型纖維-美纖多的良好應用效果應給予更多的關注。

表3 美纖多對蛋雞生產性能的影響