動物疫病監測與流行病學調查工作指南

梁云柱

摘 要：動物疫病監測與流行病學調查工作是為了進一步加強動物疫情風險分析評估，密切關注外來動物疫病、新發病監測預警和應急處置工作，科學研判防控形勢，為防控決策提供科學依據。所以，在這里提供動物疫病監測與流行病學調查工作指引，為做好動物疫病監測與流行病學調查參考。

關鍵詞：動物疫病;監測;流行病學調查

一、動物疫病監測與流行病學調查概要

（一）動物疫病監測與流行病學調查病種

重點開展以口蹄疫、豬瘟、高致病性豬藍耳病、小反芻獸疫、高致病性禽流感、雞新城疫、布魯氏菌病等主要動物疫病監測與調查;同時加強流感、痢疾等常見多發病的監測與流行病學調查。

（二）動物疫病監測與流行病學調查定點

高州市分為東南西北中五大區域，各區域選擇1～2個規模較大、畜禽產品流動量的養豬場和養雞場，作為動物疫病監測與流行病學調查的常年固定點，并且還選一個肉鴨養殖場、兩個牛羊養殖場、三個大型三鳥批發市場分別作為布魯氏菌病、小反芻獸疫、高致病性禽流感的監測和調查點。

（三）動物疫病監測與流行病學調查人員

動物疫病監測與流行病學調查工作是一項公益性工作，靠技術人員的無私奉獻精神。各鎮（街）畜牧獸醫站人員為動物疫病監測與流行病學調查主體責任人，負責整個鎮（街）動物疫病監測與流行病學調查工作;各村動物防疫員（疫情、疫病監測員）為各村動物疫病監測與流行病學調查責任人，負責該村日常動物疫病監測與流行病學調查工作。

各養殖場獸醫技術員負責該場動物疫病監測與流行病學調查工作，市動物疫病預防控制中心實驗室技術人員協助做好樣品采集、送檢工作。

二、動物疫病監測與流行病學調查方法

市動物疫病預防控制中心技術員重點對定點，開展口蹄疫、豬瘟、高致病性豬藍耳病、高致病性禽流感、雞新城疫等動物疫病血清抗體檢測監測，做好免疫與非免疫效果監測與評價，及時掌握病原分布情況，分析疫病流行趨勢。

下面重點介紹豬、雞采血采樣操作規程：

（一）豬前腔靜脈采血

1.基本操作。采血前對采血部位，用碘酒棉進行點螺式消毒，從里到外環繞消毒1次，再用酒精棉同樣方法消毒1次，每次退針時用消毒棉按壓采血部位。采血操作完成后，用過的棉球等廢棄物扔進垃圾箱，倒立插入固定架的注射器要套上護針帽。采血過程應遵循無菌操作原則，需從血管內采血，禁止吸取血管外滲漏血液。

2.站定保定采血。將保定繩套在豬嘴上，拉緊另一端，使豬的頭頸與水平呈30°以上角度，偏向一側，選擇頸部最低凹處，用碘酒消毒，使針頭偏向氣管約15方向下針，回抽有回血時，即把針芯向外拉伸使血液注入采血器，采集血液5mL。

3.仰臥保定采血。把前肢向后方拉直，選取胸骨端與耳基部的連線上胸骨端旁2cm的凹陷處，用碘酒消毒，采血器插入消毒部位，進針方向為向后內方與地面呈60角刺入2～3cm，當進入約2cm時可一邊進入一邊回抽可見血液進入采血器內，采血量不少于5mL，找出針頭后用干棉球壓迫止血。

（二）雞翅靜脈采血

1.基本操作。展開雞翅膀，露出肢窩部，拔掉羽毛，用碘酒消毒好手術部，持采血器，平行頸椎從胸腔前口插入，回抽見有回血時，即把針芯向外拉使血液流入采血器，采血量不少于2mL，拔出針頭后用干棉球壓迫止血。

2.注意事項。采血過程應遵循無菌操作原則，從血管內采血。血樣采集的廢棄物一起扔進垃圾箱，扔進垃圾箱和倒立插入固定架的注射器要套上護針帽。翼下靜脈采血時，要逆血流方向進針，不能順著血流方向進針。

（三）雞心臟采血

1.基本操作。雛雞：選定采血部位用碘酒消毒，一手抓雞，一手持采血器，平行頸椎從胸腔前口插入，回抽見有回血時，即把針芯向外拉使血液流入采血器，采血量不少于2mL，拔出針頭后用干棉球壓迫止血。成年雞：心臟采血方式分為側臥保定采血和仰臥保定采血兩種，側臥保定采血方式是垂直或稍向前方刺入2～3cm，回抽見有回血時即把針芯向外拉使血液流入采血器，采血量不少于2mL，拔出針頭后用干棉球壓迫止血;仰臥保定采血，胸骨朝上，用手指壓迫嗉囊，露出胸前口，消毒術部用裝有長針頭的采血器，將針頭沿其鎖骨俯角刺入，順著體中線方向水平刺入心臟，采血量不少于2mL，拔出針頭后用干棉球壓迫止血。

2.注意事項。確定心臟部位，切忌將針頭刺入肺臟。順著心臟的跳動頻率抽取血液，切忌抽血過快。

三、樣品采集、送檢

（一）采樣準備

根據動物疫病監測與流行病學調查工作目的，做好采樣準備，如采樣所需的器械、采樣記錄用品、樣品保存液、防護用品等。

（二）非洲豬瘟疑似病例采樣

1.對無害化處理場和生豬異常死亡的屠宰場，分批采樣。每批次至少采集5頭死亡豬的組織樣品，優先采成年豬。出現異常死亡的場（戶）和生豬交易市場，每欄（舍）至少采樣2頭死亡豬的組織樣品，優先采脾臟、淋巴結，也可同時采集扁桃體、腎臟、骨髓等，每個臟器不少于5g。采樣時注意采集相同的備樣品，冷藏運輸到達檢測實驗室后，-70℃冷凍保存。

2.發病豬：每欄（舍、批）至少采集5頭豬的抗凝血樣品，抗疑劑用EDTA，或采集全血樣。

3.對發病場（戶）及有流行病學關聯的養殖場（戶）進行采樣檢。隨機采集20頭豬的抗凝血樣品或全血樣品，不足20頭的全采，每份樣品量5mL。

4.鈍緣軟蜱將收集到的鈍緣軟蜱放入有螺旋蓋的樣品瓶/管中，放入少量土，蓋內襯以紗布，常溫保存運輸，到實驗室后-70℃冷凍保存，僅形態觀察可放入100酒精中。樣品的檢測，送有資質的市級動物疫病預防控制中心檢測，如出現為陽性的樣品，即可初步判定為疑似疫情。

5.立即送省級動物疫病預防控制中心檢測進行確診。樣品包裝和運用符合農業農村部《高致病性動物病原徴生物菌（毒）種或者樣本運輸包裝規范》規定。

（三）采集拭子樣本

有些動物，如疫病高致病性禽流感、雞新城疫、禽流感、小反芻獸疫等要分別采樣咽喉和泄殖腔雙拭子。拭子樣本應密封低溫保存，其常用的保存液為含抗生素的PBS液或30%甘油鹽水緩沖液。

（四）送檢要求

所有提供動物疫病監測與流行病學調查的樣品，各保存、送檢要求不同，按相關要求保存、送樣檢測。