NQ100S 全自動冰凍染色機的應用評價

何璋海，沈溪明

（中山大學孫逸仙紀念醫院病理科，廣東 廣州）

1 材料

1.1 材料

收集我院日常的冰凍切片病例，如乳腺、卵巢、甲狀腺、淋巴結等冰凍活檢組織。

1.2 儀器 CM 1950 冰凍切片機（德國徠卡公司）

NQ100S 全自動冰凍染色機（廣州耐確醫療設備公司）

1.3 試劑

冰醋酸95%酒精（1:99）混合固定液、改良Harris’蘇木素、0.5%鹽酸酒精、飽和碳酸鋰溶液、0.5%水溶性伊紅液、80%酒精、95%酒精、無水酒精、苯酚二甲苯（1:3）混合液、二甲苯、中性樹膠。

1.4 試劑配制

冰醋酸95%酒精混合固定液：將5mL 冰醋酸加入到495mL95%酒精中，充分混勻。

改良Harris’蘇木素：將蘇木精5g 溶于50mL 無水乙醇，硫酸鋁鉀100g 溶于1000mL 蒸餾水中，煮沸溶解，然后將兩液均勻混合至染液呈淡紅色，繼續加熱煮沸后取出，待30s 后緩慢加入氧化汞，待染液呈深紫色立即置入冰水中，待冷卻至室溫后過濾[2]。臨用前每80mL 蘇木素添加3mL 冰醋酸，充分混勻。

0.5 %水溶性伊紅液：水溶性伊紅粉末 2.5g，將其溶于500mL蒸餾水，充分溶解，過濾。臨用前 每80mL 水溶性伊紅液滴加50微升冰醋酸，充分混勻。

苯酚二甲苯混合液：將100mL 苯酚加入到400mL 二甲苯中，充分混勻。臨用前加80mL 至冰凍染色機的試劑缸中。

2 方法

2.1 冰凍組織切片

切片厚3-4μm，裱貼在載玻片中央，于載玻片磨砂面正確編號，放入冰凍染色機的片籃中，啟動染色程序，即可上機染色。

2.2 全自動冰凍切片HE 染色程序

程序染色完成后，手動取出切片，在抽風櫥內中性樹膠封片。

3 結果

冰凍切片HE 染色結果顯示細胞核呈藍色，細胞漿、纖維、紅細胞呈現不同程度的紅色，顏色鮮艷，對比清晰。

圖1 卵巢低分化腺癌（冰凍切片HE 染色） 低倍鏡下圖

表1 全自動冰凍切片HE 染色程序

圖2 乳腺導管原位癌（冰凍切片HE 染色） 低倍鏡下圖

圖3 乳腺浸潤性癌（冰凍切片HE 染色） 低倍鏡下圖

圖4 NQ100S 全自動冰凍染色機

4 討論

NQ100S 是廣州耐確醫療公司自主研發的一款全自動冰凍染色機，設備有軟、硬件2 個部分組成，該型號為單染色單元，每次最大染片量為4 片，可擴充為雙染色單元，最大染片量為8 片，可無限循環操作，該設備屬于浸染式染色平臺，具備成本相對低級試劑開放等特點[3]。該設備單染色周期為5-8min,可滿足冰凍診斷快速染色的要求（單份活檢冰凍切片時間≤30min）,機身自帶液面探測功能，每缸試劑的使用時間和次數都有累計記錄并自動監控，及時提醒操作者更換染色試劑。染色缸為轉盤設計，每缸帶獨立蓋子，避免試劑揮發和防止污染環境，蘇木素試劑缸附帶加熱功能，能彌補冬天染片上色慢的不足。觸摸屏的設計可以實時顯示染色過程和常見故障，使操作人員對試劑的使用及每天工作流程進行監控[4]，還可以通過預設染色程序以及參數設定來降低因組織不同而帶來的染色差異，另外還附設一鍵啟動和報警功能，染色完成后會自動報警，提示染色結束，使操作更為人性化和簡便。

結合自身工作實踐，對NQ100S 全自動冰凍染色機的使用和保養總結如下：（1）建立規范的儀器使用制度，并制定SOP 文件，專人負責，培訓上崗；（2）根據醫院手術室送檢的標本類型和科室實際情況制定3-5 種染色程序，從實際工作經驗中摸索出最適合本科室冰凍切片HE 染色的最佳程序；（3）每天上機前要及時觀察試劑的使用量，提前準備染液；（4）因我們科室是使用改良Harris’蘇木素，每天染色前必須觀察蘇木素有無氧化膜形成，及時過濾，避免造成染片污染[5]；（5）每天冰凍切片工作前至少提前30min進行儀器自檢運行，確保機器的清洗管道保持暢通以及加熱裝置正常運作；（6）定期保養，每周安排專人清潔全自動冰凍染色機，發現問題及時上報，請儀器工程師來協助解決問題，每半年要進行預防性檢修工作，延長設備的使用壽命；（7）制備機器的使用記錄表，包括試劑的更換用量、更換時間、操作者以及發現的問題和解決方案，都應能在記錄表上體現，做好交接班的手續。

全自動冰凍染色機因其高效、便捷、染色質量穩定等優勢開始逐漸應用于國內各大醫院病理科和實驗室，比起傳統的人工處理因操作繁瑣、費時費力等帶來的不良影響，現在可以通過智能化的編程設計和程序化操作，從而可以使操作者在進行切片、貼片的同時，利用全自動設備來完成染色程序，大大降低了操作者的工作強度，解放生產力，更能高效地減少人為染色的隨意性，進一步確保染片質量的均一性和穩定性。

總之， 耐確醫療公司生產的NQ100S 全自動冰凍染色機作為我國自主研發的冰凍染色設備，利用計算機和觸摸屏的優勢來整合染色模塊，進而能更好的幫助病理技師以高效、人性化的操作來彌補傳統手工染片的不足，使冰凍病理切片水平由傳統的經驗控制轉變為科學、智能化的質量控制，更加有利于對試劑使用和冰凍染色的流程進行監控，值得推廣使用。